LC-MS/MS法测定曲普瑞林微球的酰化杂质

聚酯类微球中多肽的酰化反应会导致多肽结构的改变,并可能造成失活、免疫原性和毒性等影响,一般应避免其发生.本文通过液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)的方法,从鉴定酰化产物的来源、修饰类型和反应位点3个方面对曲普瑞林微球中的酰化杂质进行了研究.研究结果表明,曲普瑞林微球的酰化反应均为曲普瑞林与乙交酯丙交酯共聚物(PLGA)及其单体的相互作用,且均发生在4位丝氨酸的羟基上,并未见在酪氨酸和精氨酸残基上发生反应.由此可知,丝氨酸的羟基位点亦为多肽类PLGA微球中一个重要的酰化位点.     

奥曲肽微球-凝胶复合体系的制备及加速释放

本研究旨在解决奥曲肽微球前期释放过程中的突释，将其设计成可注射的微球-凝胶复合体系。采用乳化溶剂挥发法制备奥曲肽微球，使用Box-Behnken响应面法对凝胶基质处方参数进行优化。通过考察pH、乙腈和乙醇浓度对该复合体系释药的影响，确定体外加速释放的条件，建立凝胶微球的体外加速释放方法。确定最优处方为：PL188、PL407和HPMC的质量分数分别为3%、22.2%和1%,成胶温度为37℃。该复合体系可有效减少微球前期突释，使药物释放行为更加稳定。确定体外加速释放条件为：含3%乙腈、6%乙醇、pH为7.4的PBS缓冲液为释放介质。该体外加速释放方法可快速有效评价复合体系的释放行为。     

利福平/OCS-PLGA纳米缓释微球的制备及体外释放性能

采用乳化溶剂蒸发法制备了油酰壳聚糖(OCS)包被的聚乙丙交酯(PLGA)纳米粒子(OCS-PL-GA NPs).采用红外光谱分析OCS-PLGA NPs.扫描电镜结果显示纳米微球形态规整、分布范围小,表面没有小孔、裂纹.PLGA浓度增大,缓释效果增强.PLGA的加入改变了疏水性内核的构造,在内核中形成网络状屏障,从而降低了药物的释放速度.OCS浓度增大,增加了纳米微球的稳定性,也增加了纳米微球外壳的厚度和致密性,增强了药物释放过程中的物理屏障,缓释效果增强.     

PLGA基载药复合微球的制备及其释放性能

以聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)为载体材料,牛血清蛋白(BSA)为蛋白模型药物,采用复相乳化溶剂法制备PLGA载药微球,探索载药微球制备过程中囊芯比、初乳水油比、分散剂浓度、超声乳化时间对微球粒径大小、载药率、包封率的影响。结果表明,最优载药微球的制备条件为:囊芯比1:1,初乳水油比3:5,分散剂质量分数0.5%,超声乳化时间2 min。在此条件下,所得PLGA微球的粒径为268.7 nm,载药率30.88%,包封率46.95%; 电镜照片表明微球表面连续光滑,粒径分布较均匀。采用静电吸附法用阳离子聚电解质壳聚糖对最佳条件下的PLGA载药微球进行表面修饰,扫描电镜表明复合后微球粒径变大,能谱分析表明复合后微球中有N元素存在,即复合微球中存在壳聚糖,电荷测试表明微球表面带正电; 体外释放实验表明PLGA-CS复合载药微球的缓释时间延长,释药初期的突释性明显改善。     

壳聚糖修饰的Lysozyme-PLGA阳离子纳米药物的制备与表征

通过二环己基碳二亚胺将聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)活化,又与溶菌酶进行化学键合,再采用单乳化-溶剂挥发技术制备表面带正电荷的壳聚糖(CHS)PLGA纳米微球。对纳米微球制备条件进行了优化。结果表明在ρ(CHS)=3 mg/mL,ρ(PLGA)=5 mg/mL,溶菌酶与PLGA的质量比为0.2的条件下,得到的纳米微球包封率为87.8%,载药量为14.7%。微球粒径φ可控制在(450±50)nm之间,在pH=4时,纳米微球表面ζ电位为42.5mV。SEM图像显示经CHS修饰的Lysozyme-PLGA的纳米微球形状规整。药物释放试验显示纳米微球在20 d后释放达到70%,且释放曲线规整。     

不同固化液对相分离微球体外性质的影响

本研究的目的是对比油酸乙酯和正庚烷两种体系的固化液对相分离法所制备的醋酸奥曲肽微球体外性质的影响.固定相分离阶段处方工艺,改变2种固化液体系中乙醇含量,以形貌、粒径、载药量、溶剂残留及体外累计释放为指标,对比2种体系形成的微球体外性质差别.结果表明,增加乙醇的用量,微球载药量、药物突释量降低,且能够减少二氯甲烷在微球内的残留量.在乙醇加入量相同的情况下,油酸乙酯体系形成的微球体外释放快于正庚烷体系形成的微球.2种不同固化液的对比研究为更好地理解相分离法微球形成过程提供了一种新的思路.     

放射性核素99mTc-奥曲肽体内生物分布的研究

目的:探讨99mTc-奥曲肽在生物体内与生长抑素受体结合的影像分布特性,为生长抑素受体显像提供实验依据。方法:利用薄层层析法计算99mTc-奥曲肽标记率与放化纯度。3只SD大鼠经静脉注射99mTc-奥曲肽后,在不同时间内显像并测定心血池放射性计数,计算奥曲肽血药浓度;3名志愿者静脉注射99mTc-奥曲肽后在不同时间内显像并观察人体内生长抑素受体分布。结果:99mTc-奥曲肽的放化纯度可以满足显像试验要求,静脉注射后在血中迅速进入器官组织,在肝脏中有较高浓度的聚集,主要经尿路排泄。结论:99mTc-奥曲肽在血液内清除速度快,主要在肝脏浓聚,并通过泌尿系统排泄,显像结果证明其具有很好的显像特性。     

新型W/O/O法BSA/PLGA微球的制备、表征及体外细胞活性的研究

选用牛血清白蛋白(BSA)为模型药物,聚乳酸-聚乙羟基醇共聚物(PLGA)为药物载体,通过水/油/油(W/O/O)新型凝聚法进行BSA/PLGA缓释微球的制备,考察PLGA的浓度、分子量、二氯甲烷(DCM)和硅油体积比、搅拌转速、固化溶剂及干燥方式等各个因素对制备过程的影响,并对其形貌、粒径、载药量和包封率等进行分析与表征,从而确定最佳的BSA/PLGA缓释微球的制备处方和工艺.结果表明:微球圆整均匀、平均粒度是75μm,包封率达85%;红外扫描图显示PLGA和BSA分子之间形成新的氢键,BSA被包裹在PLGA微球中;DSC图谱显示BSA被包裹在其中呈无定型状态;体外细胞活性实验中,3T3的细胞活性在80%以上,具有安全性.通过W/O/O新型凝聚法制备BSA/PLGA缓释微球的工艺较为稳定,包封率较高,载药量为4.58%.     

鲑降钙素有关物质结构HPLC MS/MS鉴定的计算机辅助方法

建立了一种辅助固相合成的鲑降钙素有关物质质谱解析的方法.根据主成分的氨基酸序列计算其肽键裂解产生的理论离子并与质谱图中的离子进行匹配,对主成分的二级质谱子离子进行归属;根据高分辨一级质谱计算有关物质的精确分子量及其元素组成,进一步计算该杂质与主成分差异片段的元素组成;推测差异片段连接于主成分不同位置的理论杂质的结构,计算该结构的杂质在质谱裂解过程中可能产生的理论碎片离子的质荷比（m/z）;将理论碎片离子与实测质谱子离子进行匹配,推测有关物质的氨基酸序列;将推测的杂质的子离子结构与主成分的对应子离子进行比较验证杂质的结构;借助ASP+HTML编程技术实现上述过程的自动化.研究结果共推断出7个鲑降钙素相关杂质的结构,包括1个降解杂质、1个乙酰化杂质、4个氨基酸重复连接杂质和1个同分异构体杂质.      

奥曲肽在术后早期炎性肠梗阻治疗中的应用

目的 探讨奥曲肽治疗术后早期炎性肠梗阻的临床效果.方法 术后早期炎性肠梗阻患者96例,随机分为治疗组50例和对照组46例.治疗组在一般非手术治疗的基础上加用奥曲肽,观察胃肠减压液量、腹部症状、肛门排气时间、腹部平片改善等指标,对结果进行比较.结果 治疗组胃肠减压量明显减少,肛门排气时间、腹胀消失时间、住院时间、腹部平片改善时间亦明显缩短.结论 奥曲肽具有抑制消化道分泌,减轻肠壁水肿,加速炎症消退,促进肠蠕动等作用.奥曲肽治疗术后早期炎性肠梗阻方法简便,临床效果好,值得推广应用.