原人参二醇、人参皂苷CK和原人参三醇对阿霉素诱导足细胞损伤的保护作用

为探讨原人参二醇(PPD)、人参皂苷CK和原人参三醇(PPT)对肾病综合征(NS)中足细胞损伤的保护作用,本研究采用阿霉素(ADR)诱导足细胞损伤。通过CCK8及细胞划痕、Transwell实验分析,结果表明三种人参皂苷可以改善ADR损伤后足细胞的增殖活力并抑制其迁移能力。Western blot及细胞免疫荧光实验结果表明PPD、人参皂苷CK和PPT均可以通过降低Desmin、NF-κB P65、p-NF-κB P65、p-IκBα及升高IκBα的表达水平缓解足细胞损伤,并且可以促进GR的表达及其核转位,其中PPD的作用效果较好。计算机分子对接结果显示PPD、人参皂苷CK和PPT与GR均具有一定的结合活性,但PPD与GR的结合活性最优。因此,PPD、人参皂苷CK和PPT均可以在一定程度上改善ADR诱导的足细胞损伤,其中PPD在保护足细胞损伤方面具有一定的优势。     

人参皂甙Rg1对3T3细胞增殖作用的研究

利用MTT比色分析法和Brdu增殖细胞标记法,检测不同浓度GRg1对3T3细胞增殖的影响.发现GRg1在适当浓度范围内可以促进3T3细胞的增殖,为进一步探讨GRg1的药理作用及对胚胎发育的作用机理提供一些研究基础.     

红景天苷抑制卵巢癌细胞SKOV3增殖的基因水平研究

目的：探究红景天苷对卵巢癌细胞SKOV3增殖的作用及作用机制.方法：在培养基中添加不同浓度(4、8、16、30和40μmol/mL)红景天苷,分别标示为SAL-1、SAL-2、SAL-3、SAL-4和SAL-5组,采用CCK-8检测细胞活性,流式细胞术检测SKOV3细胞的细胞周期和凋亡率,实时荧光定量PCR (RT-qPCR)和Western blot检测磷酸酶与张力蛋白同源基因(PTEN)的mRNA水平和蛋白水平的表达.结果：对照组(CG)中SKOV3细胞生长良好,增殖旺盛.与CG组相比,SKOV3细胞数量在48h和72h时相对减少,SKOV3细胞增殖的抑制率随着红景天苷剂量的增加而增大.SAL-5组的抑制率明显高于CG组和SAL-1组(P<0.05或P<0.01).SAL-5组在24h、48h和72h时,SKOV3细胞的凋亡率均显著高于CG组和SAL-1组(P<0.05或P<0.01).G0/G1期细胞比例逐渐增加,S期细胞比例逐渐减少,SKOV3细胞中的PTEN基因和蛋白表达随红景天苷浓度的增加而升高(P<0.05),SAL-5组为最大值.结论：红景...     

人参皂甙Rb1和Rg1对小鼠睾丸支持细胞增殖的影响

观察人参皂甙Rb1(ginsenodde Rb1,GRb1)和Rg1(ginsenoside Rg1,GRg1)对体外培养的小鼠睾丸支持细胞(sertoli cell)增殖的影响,探讨二者的药理作用机制.取原代培养传代一次第3天的支持细胞,加入不同浓度的GRb1和GRg1,利用MTT比色分析法和BrdU增殖细胞标记法,检测不同浓度GRb1和GRg1对体外培养支持细胞增殖的影响.结果显示,20 mg/L GRb1对支持细胞增殖有明显促进作用,而不同浓度的GRg1对支持细胞的增殖无明显影响.GRb1能维持小鼠支持细胞的存活,并在适当浓度范围内可以明显促进支持细胞的增殖,而GRg1对支持细胞的增殖无明显影响.     

绿茶多酚表没食子儿茶素没食子酸酯对肝癌Hep G2细胞的增殖抑制作用和凋亡诱导效应

表没食子儿茶素-3-没食子酸酯((-)-epigallocatechin-3-gallate,EGCG)是绿茶多酚的主要成分,具有抗氧化、抗衰老、抗过敏和潜在的抗癌特性.本文运用MTT试验,DAPI染色和Annexin V-FITC分析了EGCG对肝癌Hep G2细胞的增殖抑制作用和凋亡诱导.结果表明,EGCG对Hep G2细胞具有明显的增殖抑制作用,存在剂量和时间依赖效应;EGCG能诱导Hep G2细胞凋亡,并具有剂量依赖效应.     

人参皂甙Rb1对体外培养的小鼠支持细胞增殖作用的研究

观察人参皂甙Rb1(ginsenoside Rb1,GRb1)对体外培养的小鼠支持细胞增殖能力的影响,探讨其促进精子发生的作用机制.采用多次贴壁法纯化原代培养的支持细胞,取体外培养第2代第3天的支持细胞,利用MTT比色分析法和Brdu增殖细胞标记法,检测不同质量浓度GRb1对体外培养支持细胞增殖的影响.20 mg/LGRb1对支持细胞增殖有明显促进作用.GRb1能维持小鼠支持细胞的存活,并在适当质量浓度范围内可以明显促进支持细胞的增殖,从而为进一步探讨GRb1的药理作用及精子发生的机理提供一些研究基础.     

HMBA对人成骨肉瘤MG-63细胞增殖和相关基因表达的影响

研究了环六亚甲基双乙酰胺对人成骨肉瘤MG-63细胞的增殖和相关基因表达的影响.实验结果表明HMBA可明显抑制MG-63细胞的增殖,细胞生长抑制率达50.69%,分裂指数抑制率达58.8%,增殖细胞核抗原的表达降低,细胞周期被阻滞在G0/G1期.免疫细胞化学染色结果显示,经HMBA处理之后,与增殖分化调控有关的癌基因c-myc、c-fos、c-erbB-2、mtp53的表达降低、抑癌基因p21WAF1/CIP1、p16、rb的表达升高.研究结果表明,HMBA能够有效抑制人成骨肉瘤MG-63细胞的增殖活动,其对细胞增殖的抑制作用与HMBA下调c-myc、c-fos、c-erbB-2、mtp53等癌基因以及上调p21WAF1/CIP1、p16、rb等抑癌基因的表达,从而调控细胞周期有重要关系.     

FOXP3在人肺腺癌细胞中的表达意义

目的通过检测FOXP3在人肺腺癌细胞中的表达情况,探讨FOXP3在人肺腺癌发生、发展中的作用机制.方法收集临床肺腺癌患者术后石蜡包埋标本42例和正常肺组织10例,采用免疫组化SP法检测FOXP3蛋白的表达水平,分析其在肺癌细胞组与正常支气管黏膜组表达的差异,以及其在肺癌细胞的表达与临床病理指标的内在联系.结果 FOXP3在人肺腺癌细胞高表达,阳性率为64.3%;在正常肺组织低表达,阳性率为20.0%,两组比较差异具有统计学意义(P=0.011).FOXP3蛋白表达与有无淋巴结转移显著相关,有淋巴结转移组FOXP3的阳性表达率为83.3%,无淋巴结转移组FOXP3的阳性表达率为50.0%,两组比较差异具有统计学意义(P=0.026).FOXP3蛋白表达与患者性别、年龄、肿瘤的大小和分化程度均无明显相关性(P0.05).结论FOXP3参与人肺腺癌的发生、发展,可作为评判肺腺癌恶性生物学行为的指标之一.     

人参皂甙Rg1对人成骨肉瘤MG-63细胞形态结构和终末分化指标的影响

为了研究人参皂甙Rg1对人成骨肉瘤MG-63细胞(以下简称"MG-63细胞")形态与超微结构及终末分化指标的影响,鉴定其对MG-63细胞的诱导分化作用,以50 μg/mL人参皂甙Rg1处理MG-63细胞,光学显微镜与电子显微镜观察MG-63细胞形态、超微结构变化,免疫细胞化学方法检测成骨细胞相关终末分化蛋白的表达变化,并同步以HMBA处理MG-63细胞作为阳性对照.光学显微镜与电子显微镜观察结果显示细胞形态与超微结构产生了细胞形态规则、大小一致、细胞铺展体积增大,核质比例减小、核内核仁数目减少、细胞器丰富发达等与正常细胞相似的恢复性变化.观察到MG-63细胞终末分化指标I型胶原、骨粘素、骨钙蛋白的阳性表达及钙化糖原颗粒的增多与典型骨节结的形成,其变化结果与HMBA处理细胞类似.本研究证实人参皂甙Rg1能显著改变MG-63细胞形态与超微结构恶性特征,并增强成骨细胞相关的终末分化指标的表达,从而对MG-63细胞的终末分化具有一定的诱导作用.     

人endostatin基因重组逆转录病毒载体的构建及其在NIH3T3细胞中表达

为探讨转人血管内皮抑制基因（endostatin）在转染细胞中的表达，利用逆转录病毒载体构建人endostatin基因的重组质粒，通过脂质体（lipofectamine）将重组质粒导入包装细胞PA317,制备重组病毒液。用重组病毒液感染NIH3T3细胞，经G418筛选获得转入endostatin基因细胞株NIH3T3-endo。同法制备对照细胞株NIH3T3-pLncx.PCR检测NIH3T3-endo细胞基因组，在扩增产物中一份550bp人endostatin基因特异性片段，对照组为阴性。免疫组化测定示仅NIH3T3-endo细胞中有外源性endostatin蛋白的表达，说明人endostatin基因已被成功导入NIH3T3细胞，并获得稳定表达。     

人神经营养因子-3在哺乳动物细胞中瞬时表达和稳定表达的初步研究

将人神经营养因子－3全长cDNA克隆入真核表达载体pcDNA3,分别COS-7儿CHO细胞中获得了瞬时表达和稳定表达，经大乳鼠脊髓背根神经节测活，瞬时表达和稳定表达产物均能明显促进其神经突起的生长，瞬时表达量约为10^-7g/mL，稳定表达量可达10^-8g/mL。