IDO抑制剂LPM3480226联合不同化疗药物抗小鼠结肠癌CT26

研究吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)抑制剂LPM3480226与不同化疗药物联合使用对小鼠结肠癌CT26移植瘤生长的抑制作用,为IDO抑制剂的应用提供临床前药效学依据.采用CT26皮下移植瘤小鼠模型,通过观察荷瘤小鼠体重、肿瘤体积、肿瘤重量等指标,考察LPM3480226分别与紫杉醇、伊立替康、力扑素(紫杉醇脂质体注射...     

LPM3480226联合索拉菲尼抗小鼠肾癌Renca

本文旨在研究吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)抑制剂LPM3480226联合多靶点抗血管生成药物索拉菲尼的抗肿瘤效应及其潜在作用机制。采用小鼠肾癌Renca移植瘤模型,经口灌胃给予200 mg/kg LPM3480226(2次/d),15 mg/kg索拉菲尼(1次/d),或二者联用,连续19 d,观察荷瘤小鼠体重、肿瘤体积、肿瘤重量、肿瘤浸润CD3⁺CD4⁺和CD3⁺CD8⁺T细胞比例以及肿瘤组织CD34阳性微血管密度(CD34-MVD)。结果显示,LPM3480226与索拉菲尼联用时动物体重未显著降低,二者联用的抗肿瘤作用优于药物单用,且肿瘤组织内CD3⁺CD4⁺、CD3⁺CD8⁺效应T细胞比例显著提高,CD34-MVD水平显著降低。本研究表明,LPM3480226与索拉菲尼在Renca小鼠模型中具协同抗肿瘤作用,与增加肿瘤浸润淋巴细胞比例和降低血管形成有关。基于IDO抑制剂的免疫治疗与抗血管生成药物联用可能成为...     

FluxOR~(TM) Thallium Assay Kits在药物安全性筛选方面的应用

以稳定表达人类的hERG基因的中国仓鼠卵巢细胞(CHO-K1)为材料,使用FluxORTMThallium Assay Kits检测西沙比利和多菲利特对hERG通道的抑制性.以此系统为基础,检测本实验室合成的5个新化合物对hERG通道的作用.实验结果显示,西沙比利和多菲利特对hERG通道的IC50分别为86.7,28.1 nmol/L;5种化合物HBHG2201,HBHG1013,HBHG2311,HBHG1023,HBHG2108对hERG通道的抑制率分别为-2.34%,78.0%,23.8%,44.2%和49.8%.FluxORTM Thallium Assay Kits系统可用于药物研发安全性筛选,以评估化合物潜在的hERG毒性.     

CHO-K1细胞株的建立及其在药物安全性筛选方面的应用

研究了稳定表达hERG基因的CHO-K1(中国仓鼠卵巢细胞)细胞株及其在药物研发安全性筛选方面的应用。使用Lipofectamine 2000系统将hERG基因转染入CHO-K1细胞,用Western Blot检测其表达,并进一步通过FluxORTM Thallium Assay Kits验证;同时使用FluxORTM Thallium Assay Kits检测Cisapride和Dofetilide对hERG通道的抑制性。建立了4株稳定表达hERG基因的CHO-K1细胞株,Cisapride和Dofetilide对hERG通道的IC50分别为86.7 nmol.L-1和28.1 nmol.L-1。hERG基因成功地在CHO-K1细胞株实现了稳定表达,此细胞株可用于FluxORTM Thallium Assay Kits系统,用于药物研发安全性筛选,以评估化合物潜在的心脏毒性。     

舒泰、速眠新Ⅱ 和利多卡因复合麻醉在比格犬开颅手术中的应用

摘要:目的 本实验采用舒泰、速眠新Ⅱ 全身麻醉并配合利多卡因局部浸润麻醉方法,研究其在比格犬开颅手术中的麻醉效果。 方法 麻醉前 15 min 皮下注射阿托品(0. 1 mg / kg) ,麻醉采用静脉注射舒泰( 2 mg / kg) ,同时肌肉注射速眠新Ⅱ (0. 02 mL / kg) ,术部皮下注射 0. 5%利多卡因溶液( 0. 1 mL / kg) 。 检测指标包括麻醉镇痛评分,麻醉前后动物心率、呼吸和体温变化。 结果 1. 利多卡因可以显著增加麻醉镇痛效果;2. 阿托品使犬心率显著增加;3. 复合麻醉方法对犬呼吸和体温有一定影响,但在正常范围内。 结论 此复合麻醉方法安全性较高及麻醉镇痛效果好,可以满足犬开颅手术对于麻醉效果的要求,但对犬的心率影响较大,因此对心率要求较高的实验需谨慎选择。     

钾通道阻断剂对胶质瘤细胞迁移和侵袭的影响

为了检测电压门控钾通道阻断剂4-氨基吡啶(4-AP)、四乙胺(TEA)和ATP敏感钾通道阻断剂格列苯脲(Glibenclamide,Gli)对胶质瘤细胞迁移和侵袭的影响,选用人胶质瘤细胞系U87和U251,其中钾通道阻断剂4-AP、TEA及Gli处理作为实验组,未处理的作为对照组.采用划痕实验和Transwell小室法检测钾通道阻断剂对U87和U251细胞迁移和侵袭能力的影响; Western blot检测药物处理后细胞高迁移率蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)表达水平.结果表明:5 mmol·L^-1的4-AP、40 mmol·L^-1的TEA及400 μmol·L^-1的Gli可以显著抑制胶质瘤细胞的迁移、侵袭,并降低HMGB1表达水平.电压门控钾通道和ATP敏感钾通道对胶质瘤细胞迁移和侵袭具有重要调控作用,3种钾通道阻断剂对胶质瘤细胞迁移和侵袭有不同程度的抑制作用,可能通过调控HMGB1相关通路实现.     

基于单片机控制的两相混合式LPM驱动系统设计探讨

以两相混合式LPM为样机,设计了一种基于单片机(SCM)开发的细分驱动系统,并对LPM升降频规律及控制方法进行了探讨。     

气象因素对北京市猫、犬伤门诊就诊人数影响的病例交叉研究

探讨北京市气象因素对猫、犬伤(抓伤/咬伤)门诊就诊人数的影响,采用双向配对病例交叉设计,研究了2008-2012年气象要素(日平均气压、日平均气温、相对湿度、24 h降水量、日照时间、平均水汽压)对猫、犬伤门诊就诊人数的影响.结果表明,双向l:2匹配病例交叉研究的效应值最大,在1:2匹配时,气压升高对犬伤的主要气象因素效应值(OR)为0.994时的95%置信区间(95%CI)为0.989~0.996.温度升高对犬伤影响较大,OR为1.01 9时,95%CI为1.009~1.023.湿度加大对猫伤有一定影响,OR为1.005时,95%CI为1.001~1.008.日照时间对猫、犬伤均有影响,日照时间加长,犬伤的OR为1.004,95%CI为1.000~1.011,猫伤OR为1.007,95%CI为1.001~1.008.降水量及平均水汽压结果差异无统计学意义.气温和日照时间是影响猫、犬伤人的主要气象因素,明显反映出气温和日照时间的变化对猫、犬性情的影响较大,而气压及相对湿度也会对猫、犬伤人产生一定的影响.     

钾盐对烟草燃烧特性及烟气成分的影响研究

研究了2种无机钾盐(氯化钾、硝酸钾)和2种有机钾盐(乙酸钾、柠檬酸钾)对烟草燃烧特性的影响以及它们对烟气成分的影响.利用同步热分析-红外-气质联用仪(STA-IR-GC/MS)对添加不同钾盐的烟草的热解行为进行研究,通过对热解产物进行红外扫描,同时对其产物进行实时GC-MS分析检测.将生物质的综合燃烧特性指数应用于烟草燃烧过程的研究,并得出上述钾盐对卷烟的综合燃烧指数的影响大小为:柠檬酸钾硝酸钾乙酸钾氯化钾.利用卷烟燃烧指数的评价方法及IR-GC/MS分析手段,可进行推广评价不同品种的钾盐添加入卷烟后,对烟丝的综合燃烧指数和烟气中成分含量的影响.     

犬细小病毒、犬冠状病毒和犬轮状病毒三重PCR方法的建立及初步应用

犬细小病毒(Canine parvovirus, CPV)、犬冠状病毒(Canine coronavirus, CCoV)和犬轮状病毒(Canine rotavirus, CRV)是引起犬腹泻的主要病原.3种病原引发的疾病临床症状相似,难以诊断,因此需要建立可以高效鉴别这3种病原的分子检测方法.通过对引物浓度、退火温度的条件优化,建立了可同时检测CPV、CCoV和CRV 3种病毒的三重PCR方法,并进行特异性、敏感性和重复性试验.结果显示,该方法可特异性扩增CPV VP2基因(253 bp)、CCoV ORF-1b基因(379 bp)和CRV VP6基因(852 bp)的目的片段,未检出其他相关病原;对CPV、CCoV和CRV的最低检测浓度分别为6.44×10^-1 pg/μL、8.72×10^-1 pg/μL和8.35×10^-1 pg/μL,方法的灵敏度高;重复性试验显示该方法具有良好的稳定性.应用建立的三重PCR方法对2019～2020年成都市区采集的135份犬腹泻粪便样本进行了检测,并与单重PCR检测结果相比较.结果显...     

LC-MS法测定新型VMAT2抑制剂LPM3770164中的樟脑磺酸酯

本文建立了LC-MS法对LPM3770164中的樟脑磺酸甲酯(MCS)、樟脑磺酸乙酯(ECS)进行定量检测。采用色谱柱ACQUITY UPLC Peptide CSH C18(150 mm×2.1 mm, 1.7μm),以10 mmol·L^-1乙酸铵溶液-乙腈(90∶10,V/V)为流动相A、乙腈为流动相B进行梯度洗脱。质谱采用电喷雾正离子化选择离子监测模式进行检测。经方法学验证结果表明,MCS在1.97～14.79 ng·mL^-1内线性关系良好(r=0.999 9);ECS在1.90～14.26 ng·mL^-1内线性关系良好(r=0.999 9)。通过加样回收率试验,MCS、ECS的平均回收率(n=9)分别为98.5%、99.1%。研究表明该方法操作简便,灵敏度高,可用于LPM3770164中樟脑磺酸甲酯、樟脑磺酸乙酯的测定,并为其质量控制提供参考。     

犬毛色、毛色基因型及性别与导盲犬培训成功率的相关性研究

摘要: 目的 探究拉布拉多犬与金毛猎犬的毛色、毛色基因型及性别对导盲犬培训成功率的影响。方法 采用 PCR/测序方法对 45 只拉布拉多犬和 16 只金毛猎犬的毛色基因 MC1R( c． C916T) 、TYRP1( c． C991T) 位点进行多态 性检测,并对基因型加以分型,探讨犬毛色及毛色基因型与导盲犬培训成功率的相关性。另外对中国导盲犬大连 培训基地犬只的性别进行统计分析,探讨犬性别与导盲犬培训成功率的关系。结果 金毛猎犬共检测 16 只( 14 雄 2 雌) ,毛色表型均为金黄色,毛色基因型均为 eeBB 基因型; 拉布拉多犬共检测 45 只( 23 雌 22 雄) ,毛色表型为黄 色( 23 只) 与黑色( 22 只) ,毛色基因型分别为 eeBB、eeBb、EEBb、EeBB、EeBb。通过 χ2 检验的关联度分析,拉布拉 多犬与金毛猎犬的毛色及毛色基因型与导盲犬培训成功率无显著相关性( P ＞ 0. 05) ,另外,拉布拉多犬与金毛猎犬 的性别与导盲犬成功率也无显著相关性( P ＞ 0. 05) 。结论 拉布拉多犬和金毛猎犬的毛色、毛色基因型及性别与 导盲犬成功率没有显著相关性,不能作为预测导盲犬培训成功率的有效指标。     

拉布拉多犬与金毛猎犬毛色基因MC1R(R306ter)与TYRP1(Q331ter)SNP位点的检测

目的建立犬毛色基因MC1R R306ter(c.C916T)与TYRP1 Q331ter(c.C991T)SNP位点的检测方法。方法采用PCR/测序的方法,对19只拉布拉多犬和15只金毛猎犬的MC1R基因c.C916T SNP位点及TYRP1基因c.C991T SNP位点的多态性进行检测,根据MC1R和TYRP1的多态性对犬的毛色基因型进行分析。结果 PCR/测序法能够对TYRP1基因c.C991T SNP位点进行明确和有效的检测。但MC1R基因c.C916T SNP位点的测序结果出现了特殊峰,经克隆/测序法确认该特殊峰型为杂合性SNP位点。毛色基因型分析表明,金毛猎犬的毛色基因型皆为纯合的eeBB(15只),未见其他基因型。拉布拉多犬的毛色基因型分别为:黑色犬EeBB(6只)、EeBb(2只);黄色犬eeBB(9只)、eeBb(2只)。未发现其他如EEBB和EEBb(黑色)、eebb(黄色)的毛色基因型。另外,拉布拉多犬样本中没有巧克力色犬,也未检测出其相应的Eebb和EEbb基因型。结论本研究成功建立了犬毛色基因MC1R R306ter(c.C916T)与TYRP1 Q331ter(c.C991T)SNP位点的检测方法,为分析毛色基因型与导盲犬培训成功率之间的相关性提供了前期工作基础。     

经皮肺动脉去交感神经冷冻消融术治疗犬肺动脉高压疗效评价

摘要:目的 通过野百合碱诱导的犬肺动脉高压模型,观察肺动脉去交感神经冷冻消融术后 6 个月的肺动脉平均压力( mPAP) 、肺毛细血管楔压( PCWP)及内皮素受体-1( ET-1)变化,评估冷冻消融去比格犬肺动脉交感神经的安全性和有效性。 方法 将 15 只比格犬随机分为 A 组(冷冻消融组) 、B 组(假手术组) 及 C 组( 对照组) ,对比观察比格犬手术前后 mPAP、PCWP 及 ET-1 水平变化。 结果 A、B 和 C 各组术后 6 个月,mPAP、PCWP 和 ET-1 值均低于术前水平,差异有统计学意义( P<0. 05) 。 结论 犬肺动脉高压经皮肺动脉去交感神经冷冻消融术安全且有效,术后表现出延续性降肺动脉压力效果。     

四(4-叔丁基苯基)硼酸钾手性离子选择电极对缬氨酸甲酯的手性识别

以四(4-叔丁基苯基)硼酸钾为手性选择剂,将其负载于PVC膜中制得离子选择性电极,对缬氨酸甲酯对映异构体进行检测,电极能优先响应L-缬氨酸甲酯,线性范围10~(-4)~10~(-1)mol·L~(-1),斜率50 m V,检测限3.16×10~(-5)mol·L~(-1),电极能对缬氨酸甲酯进行手性识别检测,其对映选择性系数lgK_(L,D)~(pot)为-1.82.     

应用 COMT 基因 SNP 位点鉴别拉布拉多和金毛猎犬胆量行为的研究

摘要:目的 检测拉布拉多和金毛猎犬儿茶酚-O-甲基转移酶( Catechol-O-methyltransferase,COMT)基因 SNP 位点的多态性,并统计分析 SNP 位点的基因型及单倍型与犬胆量行为间的关联性,以期为工作犬培训的前期筛选提供有效的遗传学分子标记。 方法 选取 91 只拉布拉多和 27 只金毛猎犬,共计 118 只,采用犬胆量评估( dog courage assessment,DCA)测试方法对犬的胆量行为进行评估,用高分辨率熔解曲线法( high resolution melting,HRM) 对该118 只犬的 COMT 基因的 4 个 SNP 位点:-1 666 bp C>G、c. 39 A>G、c. 216 G>A 和 c. 482 G>A 进行基因型鉴定,应用SPSS 19. 0 和 PHASE 2. 1 软件统计分析 4 个 SNP 位点的基因型和单倍型与犬胆量行为之间的相关性。 结果 拉布拉多和金毛猎犬的品种、性别和年龄与犬的胆量行为之间没有显著关联性( P>0. 05) 。 COMT 基因的 4 个 SNP 位点的基因型与拉布拉多和金毛猎犬的胆量行为之间存在显著相关性( P< 0. 01) 。 COMT 基因 4 个 SNP 位点的单倍型与拉布拉多和金毛猎犬的胆小性情显著相关( P<0. 01) ,并且 c. 216 G>A 和 c. 482 G>A 位点的 A 等位基因在犬的胆小行为上起主导作用。 结论 COMT 基因的 4 个 SNP 位点的基因型和单倍型与拉布拉多和金毛猎犬的胆量行为之间存在显著相关性,提示 COMT 基因对犬的胆量行为具有显著的影响,可作为胆小犬早期鉴定的有效遗传学分子标记。     

近红外荧光染料MHI-148应用于肿瘤活体成像的初步研究

评估近红外荧光染料MHI-148在肿瘤活体成像研究中的应用。近红外染料MHI-148(0.1 mmol/kg)腹腔注射SD大鼠,观察其体内的安全性;将MHI-148按照1μmol/kg剂量腹腔注射人胃癌原位荷瘤裸鼠,48 h后通过活体成像仪进行肿瘤特异性荧光成像;将MHI-148与放射性核素68Ga标记后,前肢静脉注射自发性睾丸肿瘤的犬,1h后进行PET/CT成像。MHI-148腹腔注射SD大鼠14 d,脏器未见任何病理变化;MHI-148腹腔注射荷瘤裸鼠,48 h后活体成像,在肿瘤部位能检测到特异性荧光;将标记成功的2.6 mCi的68Ga-MHI-148化合物注入实验犬体内,1 h后通过PET/CT成像,在犬的右侧睾丸部位检测到特异性的高量核素的摄取(SUV均值为1.43),是正常组织(SUV均值为0.44)的3.25倍,通过HE染色确认该部位为肿瘤发生区域。结论近红外荧光染料MHI-148毒性低,具有良好的安全性,标记核素68Ga后通过PET/CT能够特异性地检测犬肿瘤部位,具有重要的临床应用前景。     

白鲜碱对气管平滑肌的舒张作用及机理研究

目的:探讨白鲜碱对异常收缩的气管平滑肌的舒张作用.方法:以80 mmol·L~(-1) KCl或100μmol·L~(-1) ACh预刺激气管,用生物机能系统检测气管的张力,用膜片钳技术检测离子通道电流,观察白鲜碱对气管平滑肌的影响.结果:白鲜碱能呈剂量依赖性地抑制高钾和ACh诱导的预收缩,而对静息状态下的气管无影响.且白鲜碱能阻断VDCCs电流,抑制细胞外Ca~(2+)内流.除VDCCs通道外,它还抑制ACh激活的其他离子通道,并抑制肌质网中的内Ca~(2+)释放.结论:白鲜碱具有舒张气管平滑肌异常收缩的作用,有望作为一种钙离子拮抗剂抑制气道高反应,缓解哮喘.     

血液灌流吸附对犬内毒素血症模型的实验观察

目的本实验运用内毒素吸附柱,对比格犬内毒素血症模型进行灌流吸附作用,探讨其在犬体内吸附内毒素的有效性和安全性。方法静脉输注LPS(内毒素)复制犬内毒素血症模型,随机分为治疗组和对照组。治疗组采用血液灌流机配合内毒素吸附柱进行灌流吸附治疗,对照组采用不含内毒素吸附剂的空柱。分别选取多个时间点,采血测定犬相关的生理生化指标和内毒素含量。结果安全性检测:治疗组犬的体温持续下降,对照组犬的体温先升后降。与对照组比较,治疗组犬体温在灌流吸附90 min、120 min时,有显著性差异(P<0.05)。与对照组相比,治疗组犬在心率、血常规、血清总蛋白和血清白蛋白、电解质含量、凝血酶原时间、部分活化凝血酶原时间、血清补体C3浓度及纤维蛋白酶含量等生理指标,均未见显著性差异(P>0.05)。吸附效率检测:测定内毒素过滤柱灌流吸附60 min、90 min1、20 min三个时间段内毒素含量,治疗组犬血清中内毒素降低的程度与对照组相比,具有极显著差异(P<0.01)。结论内毒素吸附柱具有较好的血液相容性,具有吸附血清中内毒素的作用,可降低血清中内毒素水平。     

以双乙烯酮为原料制备硝基乳清酸钾

硝基乳清酸钾为有机合成和制药工业的重要中间体.应厂商要求笔者采用两种不同的路线对合成5-硝基乳清酸钾的方法进行实验研究.结果表明:方法(1)有双乙烯酮和尿素为原料,经4步反应制备5-硝基乳清酸钾,总收率47.6％.方法(2)用乙酰乙酸乙酯和硫脲为原料经4步反应制备5-硝基乳清酸钾,总收率36.5％～38.5％.无论从收率或方法的可行性考核,方法(1)均比方法(2)优越.