白花蛇舌草的研究进展

为深入研究白花蛇舌草,对近年来的相关文献进行总结和分析。白花蛇舌草含有黄酮类、萜类、蒽醌类等多种化学成分,具有免疫调节和抗肿瘤、抗炎等多种药理作用,为进一步研究提供了理论基础和依据。     

白花蛇舌草与同属植物水线草的区别

对白花蛇舌草、水线草的来源、性状、成分、功效进行了概述。     

白花蛇舌草的药理作用进展

近年来关于白花蛇舌草的药理及临床研究颇多,特别是其提高免疫力、抗肿瘤、抗感染方面的报道。本文就近年来白花蛇舌草的化学成分和药理作用方面研究作一综述,为白花蛇舌草的更深入研究和临床应用提供参考。     

白花蛇舌草中多糖抑制骨肉瘤的作用机制

为探讨白花蛇舌草(Hedyotis diffusa)活性成分对骨肉瘤的作用及其机制,对白花蛇舌草中分别提取的黄酮类、三萜酸类、香豆素类和多糖类化合物,用噻唑蓝(MTT)法检测不同提取物对MG-63细胞活性的影响;同时建立裸鼠骨肉瘤移植瘤模型,观察不同提取物对移植瘤生长的抑制作用;并通过流式细胞仪检测细胞凋亡及周期变化,蛋白质免疫印记(Western blot)检测Bax及Bcl-2蛋白表达水平.结果显示:4种提取物都对MG-63细胞的增殖具有明显抑制作用,并呈现明显的剂量依赖性,最优药物质量浓度为80μg/mL;在此质量浓度下4种提取物对裸鼠移植骨肉瘤均具有抑制作用,其中多糖类对MG-63细胞活性和移植瘤生长的抑制作用最强,明显促进MG-63细胞凋亡,阻滞细胞周期;Bax表达量在48h内随着白花蛇舌草多糖类提取物作用时间延长而增加,而Bcl-2表达量则降低.由上述结果可知,白花蛇舌草活性成分中多糖类的抗肿瘤活性最强,其作用机制可能是通过抑制骨肉瘤细胞增殖、促进细胞凋亡和阻滞细胞周期来达到抑瘤效果.     

白花蛇舌草化学成分的研究

 对白花蛇舌草(Hedyotis diffusa)的化学成分进行研究.采用甲醇提取,石油醚、氯仿-甲醇(V/V为1:1)、甲醇-水(V/V为1:1)溶剂划段,多种分离材料进行反复分离纯化,根据化合物的理化性质和光谱数据鉴定其结构.从其氯仿-甲醇(V/V为1:1)部分分离鉴定了7个化合物:3-甲氧基-5,7-二羟基-黄酮醇(Ⅰ)、10-乙酰基鸡屎藤甙(Ⅱ)、车叶草甙(Ⅲ)、5,7,4′-三羟基-黄酮醇(Ⅳ)、熊果酸(Ⅴ)、胡萝卜苷(Ⅵ)、β-谷甾醇(Ⅶ).化合物Ⅰ,Ⅱ首次从该植物中分离得到.     

物种特异性PCR在中药材白花蛇舌草鉴定中的应用

提供中药材白花蛇舌草物种特异性鉴定引物以及建立简便、高效的特异性鉴定方法和研制鉴定试剂盒．为此收集目前市场上出现的所有白花蛇舌草正伪品样品共9种,并测定所有样品的核糖体基因ITS区核苷酸序列,在此基础上设计一对物种特异性引物B174和B53,特异性地鉴定白花蛇舌草．表明用这对引物扩增白花蛇舌草,获得207bp的特异性产物,而其它伪混品样品没有阳性产物．可以认为用白花蛇舌草特异性鉴定引物B174和B53的所配制的鉴定试剂盒具有很好的应用前景．     

不同产地白花蛇舌草活性成分含量的比较研究

探讨产地对白花蛇舌草(Hedyotis diffusa Willd.)活性成分的影响.用苯酚-浓硫酸法测定白花蛇舌草中多糖含量及用RP-HPLC测定白花蛇舌草中氨基酸的含量.结果表明:不同产地白花蛇舌草中多糖含量有极显著差异,其中福建和河南产的白花蛇舌草多糖含量较高,云南、广西、海南、广东、江苏和湖南的含量均较低.白花蛇舌草所含氨基酸中,各组分之间的含量不同,差异极显著,其中赖氨酸含量最高,苯丙氨酸含量最低;每一组分的含量在产地之间都有变化,不同组分含量变化程度不同,含量变化最大为苯丙氨酸,变异系数为67.98%,甘氨酸的含量变化最小,其变异系数为22.42%;白花蛇舌草中总氨基酸和各类氨基酸的含量在不同产地也有变化,氨基酸总量在产地之间差异极显著,进行栽培种植的产地,其白花蛇舌草中氨基酸总量较高,表现为:湖南>河南>广西>江苏>广东>海南>云南>福建,白花蛇舌草野生生长的产地,其白花蛇舌草中必需氨基酸占氨基酸总量的百分比较大,必需氨基酸、半必需氨基酸和支链氨基酸占氨基酸总量的百分比大小分别为:云南>海南>福建>广东>湖南>广西>河南>江苏;河南>广西>福建>广东>海南>湖南>江苏>云南;广西>河南>福建>海南>广东>湖南>云南>江苏.     

白花蛇舌草苷类成分的研究

从茜草科植物白花蛇舌草（Hedyotis diffusa Willd）中通过溶剂提取、硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱层析和制备薄层层析等方法分得6个苷类化合物。波谱分析（核磁共振氢谱、碳谱和质谱）确定它们的结构分别为E-6-O-p-methoxy cinnamoyl scandoside methylester（1），Z-6-O-p-methoxycinnamoyl scandoside methyl ester（2），asperuloside（3），asperulosidic acid（4），乙基-β-D-吡喃葡萄糖苷（ethyl β-D-glucopyranoside，5）和胡萝卜苷（daucosterol，6）。化合物5为首次从本植物中分到。     

白花蛇舌草提取物体外抗肿瘤作用及机制研究

目的　研究中药白花蛇舌草提取物对Bel 7402细胞抗肿瘤作用及其作用机制.方法　采用MTT法和集落形成实验检测白花蛇舌草提取物对Bel 7402细胞生长的抑制作用;采用淋巴细胞转化实验检测白花蛇舌草提取物对小鼠脾脏T淋巴细胞增殖的刺激作用,并筛选出药物的安全剂量范围;采用透射电镜初步观察药物作用后Bel 7402细胞的形态变化.结果　1)MTT比色实验、集落形成实验的结果表明,白花蛇舌草提取物对Bel 7402细胞的生长具有明显的抑制作用,且这种作用是剂量依赖关系,IC50为1.6g/L;2)透射电镜观察表明,药物作用后的Bel 7402肿瘤细胞的体积变小,核分裂像显著减少,没有明显的凋亡现象;细胞核固缩,异染色质块状聚集浓染,线粒体变大变圆,基质变淡,线粒体嵴变短变少甚至消失,在极度肿胀时,线粒体转化为小空泡状结构,并有细胞膜破损现象.结论　1)白花蛇舌草提取物可能通过直接影响肿瘤细胞能量代谢,对Bel 7402细胞生长具有明显的抑制作用,且呈剂量依赖关系;2)白花蛇舌草提取物具有促进小鼠脾淋巴细胞增殖的作用.     

核磁共振技术追踪白花蛇舌草分离纯化过程中化学成分的变化

利用核磁共振技术追踪检测白花蛇舌草活性部位分离纯化过程中化学成分的变化,通过HPLC-MS法分析化学成分含量呈动态分布的系列混合物.以核磁共振和高效液相色谱-质谱动态谱学方法追踪检测四种单体,准确的指导了有效部位的分离纯化过程.结果表明,将核磁共振技术作为选择性提取分离的监测手段,依据目标化合物的NMR谱学特征,以1H-NMR监控和指导从白花蛇舌草有效部位中寻找和得到四种化合物收到了较好的效果,传统检测手段HPLC-MS在结果上达到了高度的一致.并运用多种核磁共振技术对分离得到的化合物进行了结构解析,提高了复杂很合物的分析效率.     

HPLC法同时测定白花蛇舌草中4种多酚物质

建立一种同时测定白花蛇舌草中4种天然抗氧化活性成分(槲皮素、山奈酚、咖啡酸、芦丁等)的高效液相色谱法(HPLC)分析方法.采用AgilentXDB-C_(18)(75 mm×2.1 mm,2.7μm)色谱柱,流动相A为甲醇、流动相B为磷酸/水(0.5%,V/V);紫外检测器检测波长260 nm;流速0.3 mL/min;柱温35℃.结果表明,槲皮素、山奈酚、咖啡酸和芦丁4种活性成分的线性范围分别为0.9～20、4.5～100、2.7～60、3.6～80 mg/L,回收率分别为99.4%(RSD=1.84)、98.5%(RSD=2.15)、98.7%(RSD=1.90)、99.3%(RSD=2.00),且4种抗氧化活性成分均得到很好的分离.该方法快速、准确,重现性好.     

黄瓜中总黄酮提取方法的研究

用乙醇提取法和索氏提取法分别提取华北型黄瓜和华南型黄瓜中总黄酮.采用紫外分光光度法,以芦丁为标准,亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠显色,在500 nm波长下检测总黄酮含量.芦丁的线性范围为20~100μg·m L,回归方程:y=0.015 1 x-0.456,R2=0.999 6,用索氏提取法和乙醇提取法测得华北型黄瓜中总黄酮量分别为35.04 mg/g和40.32 mg/g,平均回收率分别为99.8%和100.4%,RSD分别为1.30%和2.65%,华南型黄瓜中总黄酮量分别为24.44 mg/g和37.66 mg/g,平均回收率分别为101.3%和99.5%,RSD分别为1.93%和1.88%.结果表明,乙醇提取法能更好地提取黄瓜中的异黄酮,操作简便,结果准确.     

超声波辅助提取枇杷叶中黄酮类化合物的工艺研究

研究了超声波辅助乙醇浸提法从枇杷叶中提取总黄酮的工艺.通过单因素试验确定了影响总黄酮的主要因素及较优水平.用正交设计试验优化提取工艺条件.结果表明,最佳工艺为:超声波功率为135w,乙醇体积分数40%,提取温度80℃,提取时间30min,料液比1:20.最佳条件下总黄酮得率7.23%.     

甘草叶总黄酮提取工艺

为建立一种高效提取甘草叶中总黄酮的方法,对比研究了闪式提取、索氏抽提、搅拌提取、超声波提取4种方法对胀果甘草叶总黄酮的提取效果,并利用正交实验对总黄酮的闪式提取工艺进行了优化。结果表明：闪式提取法所用提取时间短,提取溶剂用量少,各因素对总黄酮提取效果的影响程度依次为固液比〉乙醇浓度〉提取时间,最佳提取工艺为固液比1：40,乙醇浓度70％,提取时间6min．闪式提取法是一种高效、快速提取甘草叶中总黄酮的方法。     

车前草中黄酮类化合物的提取及其含量的测定

为了采用超声辅助法萃取车前草中黄酮类化合物和分光光度法测定总黄酮的含量,利用亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠体系分光光度法,在波长为510nm处,测定车前草提取液样品中总黄酮的含量.实验表明,以40%的乙醇,料液比为1:20,超声温度为50℃,采用超声波在功率400W下处理40分钟得到车前草中黄酮的得率为9.435mg/g.     

槐花米中黄酮物质的提取及其光度分析

探讨用芦丁作标准品,以NaAc-KAl(SO4)2为显色剂,于420 nm处测定槐花米中总黄酮的含量.结果表明,NaAc-KAl(SO4)2显色法测定槐花米中总黄酮含量的显色稳定性和重复性良好.显色体系最大吸收波长为430 nm,加入土温-40后,其最大吸收波长紫移至420 nm,表观摩尔吸光系数为6.906×104 L·mol-1·cm-1,芦丁含量在1.6×10-3～1.0×10-2 g/L范围内服从比耳定律.将该方法用于槐花米中总黄酮含量测定,结果满意.同时研究了从槐花米中提取黄酮的几种方法,通过比较,得出微波法是较理想的提取方法.     

茵陈总黄酮的提取及初步纯化

研究了3种极性不同的大孔吸附树脂对茵陈黄酮的静态吸附行为,筛选出了较优的吸附分离树脂,并对洗脱剂进行了优化.络合显色法用于茵陈总黄酮含量的测定.结果表明：DM-301对茵陈黄酮吸附效果最好,70%的乙醇（体积比）作洗脱剂洗脱效果最好,解吸率最高.茵陈总黄酮的粗黄酮粉得率为17.8%,粗黄酮粉总黄酮含量为17.3%,茵陈总黄酮含量为干重的3.08%.