水稻基因工程育种及其进展

总结了水稻基因工程育种的主要内容，介绍了其技术体系(特别是近年有关实验方法的改进)。及其研究进展。     

用基因工程创造新花卉

当今,植物分子生物学的发展,为基因工程技术改良花卉作物开辟了道路。与花卉品质有关的基因工程技术的应用,使人们更深入地理解植物的生长与发育。采用反义RNA选择已知或未知功能的突变基因;利用根癌农杆菌属的T—DNA基因改变内源激素水平,为控制植物发育提供了巨大的可能性。植物生物工程的应用,也必将使花卉育种工作进一步向精确化、高效化的方向发展。 目前,世界花卉市场对新奇花卉的需求日益增加,因而采用基因工程为新的花色引入基因,却具有十分诱人的前景。因为基因工程能为花卉的品质改良增添可用的基因库;授于目标性状的基因,在不改变植株其它遗传性状的同时,改变单个性状,而直接     

基因工程法制备15N标记的蛋白质样品

为了用多维核磁共振方法解析蛋白质溶液构象奠定基础,在用基因工程法使天花粉蛋白在大肠杆菌中获得高效表达的基础上,用１５Ｎ标记了这种蛋白质并通过亲和层析方法进行纯化得到电泳纯的蛋白样品;测定了此蛋白对中期妊娠小鼠的止孕效应;在核磁共振波谱仪上测得了此蛋白的１Ｈ－１５Ｎ异核相关谱（ＨＳＱＣ）。结果表明,上述方法可以用于制备１５Ｎ标记的蛋白质样品。     

水稻蛋白质二级结构预测

针对水稻蛋白质二级结构预测研究,查阅了国家水稻数据中心文献资源,基于国际蛋白质数据库(protein data bank, PDB),选择具有代表性的蛋白质(5XQI)作为样本,应用BP神经网络建模技术,对水稻蛋白质二级结构进行预测研究。结果表明：先用氨基酸描述子量化一级结构,再用主成分分析综合描述子,能简化模型结构,提高模拟预测准确度和运行速度;构建标量型的人工神经网络模型和仿真函数预测式,简捷直观,应用方便;适宜的模型结构为21∶20∶3,即21个输入层节点、20个隐含层神经元、3个输出层神元的BP神经网络模型结构;模型的整体拟合准确度为0.85,H、E、C三种二级结构的拟合准确度分别为0.92、0.79、0.81;整体预测准确度为0.72,三种二级结构的预测准确度分别为0.79、0.65、0.71。基于BP神经网络的水稻蛋白质二级结构预测模型的拟合、预测准确度比以往同类研究高,为水稻蛋白质二级结构预测提供了一种新的研究方法。     

利用转基因植物生产基因工程疫苗

综述了10年来转基因植物疫苗的研究进展,分析了其中存在的问题,并提出了-些提高植物疫苗表达量的策略.     

种子蛋白质基因工程及其在分子育种工作中的应用

 本世纪全世界将面临三大不可逆转的压力 ,这就是人口递增、粮食消耗量增加和农田耕地面积减少。我国是一个人口众多的农业大国 ,人口已达13亿 ,耕地面积却在加速减少 ,我国受到的压力也将更为沉重。为了解决粮食生产中所面临的三大严峻挑战 ,创造优质、高抗、高产的超级农作物新品种将是我国粮食生产的主攻方向。重视农业生物高科技产业 ,迅速发展种子蛋白质基因工程分子育种技术已是一项紧迫的任务。一、开展种子蛋白质基因工程研究的紧迫性近几年来 ,生命科学的发展日新月异 ,DNA重组技术的建立使人们不但可以从生物体内分离出某种基因 ,并在生物体外进行基因的拼接重组 ;而且还可以进行基因的人工合成、修饰与拼接。     

种子蛋白质基因工程及其在分子育种工作中的应用

本世纪全世界将面临三大不可逆转的压力 ,这就是人口递增、粮食消耗量增加和农田耕地面积减少。我国是一个人口众多的农业大国 ,人口已达１３亿 ,耕地面积却在加速减少 ,我国受到的压力也将更为沉重。为了解决粮食生产中所面临的三大严峻挑战 ,创造优质、高抗、高产的超级农作物新品种将是我国粮食生产的主攻方向。重视农业生物高科技产业 ,迅速发展种子蛋白质基因工程分子育种技术已是一项紧迫的任务。一、开展种子蛋白质基因工程研究的紧迫性近几年来 ,生命科学的发展日新月异 ,ＤＮＡ重组技术的建立使人们不但可以从生物体内分离出某种基…     

用耳朵研究蛋白质

正对,你没看错!科学家发明了一种方法,如果眼睛看累了,可以用耳朵研究蛋白质。芬兰、美国和英国研究人员组成的研究小组,利用一种被称为超声处理的技术,将蛋白质数据转换成了有旋律的音乐。大量研究后,他们得出结论:听比看容易,大部分人可以注意到旋律之间的联系;经过一定训练,科学家可以听出不同的蛋白质结构,发现异常突变。     

水稻剑叶蛋白质的双向电泳分析

以三系杂交稻不育系武金4A,保持系武金4B剑叶为材料,利用双向电泳技术,获得了孕穗期剑叶蛋白质双向电泳图谱。经考马斯亮兰染色,可辨别出蛋白质斑点数450个左右；经银染复染后,可辨别出约800个左右蛋白质点。蛋白质相对分子量约在14.0kDa～94.0kDa范围内,主要分布在14.0kDa～67.0kDa之间；等电点(pIs)约在3.5～9.5范围内,主要分布在5.0～7.0之间。     

基因工程枯草杆菌生产中性蛋白酶的研究

使用一株基因工程枯草杆菌ＤＢ４０３（ｐＷＬ２６７）生产中性蛋白酶，其宿主ＤＢ４０３失去了野生菌株９９％的胞外蛋白酶生产能力，质粒ｐＷＬ２６７则带有野生菌株中性蛋白酶的全部结构基因。在分批培养中，中性蛋白酶的活性为２６２ｍｇ／ｍｉｎ·Ｌ左右，通过培养基改进达到３．２８６ｇ／ｍｉｎ·Ｌ。连续培养表明，中性蛋白酶的比生产速率在比生长速率为０．２ｈ￣（－１）时最大。在控制补加葡萄糖和其它培养基成分的补料分批培养中，中性蛋白酶活性达１７．６７０ｇ／ｍｍ·Ｌ。     

用基因工程制备牛碱性纤维细胞生长因子

再生(regeneration)原来是动物的一种天生能力,低等动物的再生能力高于高等动物。如把一条蚯蚓切在两段,过几天,缺头的那一端会长出一个新头,缺尾的那一端会长出一条新尾,结果变成了两条蚯蚓。某些两栖类动物,尤其是有尾两栖类动物,如蝾螈,具有很强的使失去的肢体再生的能力。科学家们的研究发现,细胞受到伤害后会释放出某些化学物质,以刺激邻近细胞发生分裂,实现再生。这种物质,被称为细胞生长因子。能使神经     

水稻生产商品化

目前,随着国内农村环境的复杂变化,城市化进程日益加速,农村劳动力急剧下降,必然要求农业产业化进程加快,然而由于我国的实际情况,农业产业化进程相对缓慢,这也进一步加大了城乡差距,不利于社会的和谐发展。在此之下,水稻生产商品化研究刻不容缓。本篇中我将会给读者描绘一下水稻生产商品化的具体流程以及其中的相关问题。     

双水相萃取与疏水层析分离基因工程人溶菌酶

采用双水相萃取与疏水层析分离纯化重组巴氏毕赤酵母表达的基因工程人溶菌酶.通过正交实验方法研究了聚合物浓度、盐浓度和pH对双水相体系萃取人溶菌酶过程的影响.结果表明:当双水相萃取的pH为4,硫酸钠、氯化钠、PEG4000的质量浓度为0.13、0.06和0.08时,人溶菌酶上相回收率达98.8%,纯化因子18.0,浓缩因子3.6.双水相萃取后选用高效疏水层析色谱纯化人溶菌酶,经苯基高取代基介质疏水层析后得到纯化因子为22.7,收率为88.4%的人溶菌酶纯化产品,电泳纯度检测为100%.     

用蛋白质添加饲料养猪

衢州市饲料公司,自一九八一年五月开始进行蛋白质添加饲料的试制和使用效益试验,到去年十月,共试制六千斤,并经六个集体猪场、一个农户152头猪(包括小猪、种猪、肉猪),分八个组五种饲喂方式对比试验,得出生猪增长率高、料比少、成本低、     

基因工程菌发酵生产l-苯丙氨酸工艺优化

对重组l－苯丙氨酸工程菌E.coli HB101.Ⅰ发酵过程中的营养物质消耗及产物l－苯丙氨酸的积累进行实验分析。得出：l－苯丙氨酸在培养温度为38.5℃，pH为7.0－7.5，溶氧控制在20％，含糖量控制在1.5%，酪氨酸添加量为1.0-1.2g/L时，产酸量最大，为工艺优化控制提供了有用的基础数据。     

单克隆抗体亲和层析纯化基因工程人γ-干扰素研究

用抗基因工程人γ－干扰素单克隆抗体（２Ａ１２）细胞株亲和层析从表达人γ－干扰素的大肠杆菌抽提液中纯化经稀释复性后的γ－干扰素。一步纯化后的γ－干扰素含量达９５％以上，蛋白质的比活性达 １．２×１０ｕ／ｇ，收率为７８％。洗脱液用 ０．５ｍｏｌ／ＬＮａＣＩ的 ＰＢＳ溶液，洗脱率达９２．８％。     

抗基因工程人rIFN-γ杂交瘤细胞株的建立

用杂交瘤技术将基因工程人γ－干扰素（ｒＩＦＮ－γ）免疫的Ｂ淋巴细胞与ｓｐ２／０鼠骨髓瘤细胞融合，建立了 ３株抗 ｒＩＦＮ－γ杂交瘤细胞株。这些细胞株经两年多的传代培养仍保持稳定分泌抗体的能力，并与ｒＩＦＮ－γ及新型γ－干扰素呈特异性反应，可用于亲和层析纯化γ－干扰素．     

重组抗栓人胰岛素基因工程菌高密度发酵研究

通过重组DNA技术构建抗栓人胰岛素突变体基因,并转化入大肠杆菌宿主菌,构建基因工程菌株.通过高密度发酵技术对重组菌株进行大规模培养.通过对培养条件包括温度、溶氧量、pH值、补料等的调整,达到最佳培养状态,进而获得高产量的重组大肠杆菌菌体.检测大量培养重组大肠杆菌的表达率,并对表达产物进行纯化与进一步的理化分析鉴定.