Aromatase and steroid sulfatase mRNA expression in fine needle aspirates from benign and malignant breast disorders

The fine needle aspiration (FNA) test is a convenient and tolerable technique with minimal invasion that is accepted by most women.Local estrogen synthesis depends mainly on the aromatase and steroid sulfatase pathways that are believed to play important roles in breast carcinogenesis.However,little is known about the level of aromatase and steroid sulfatase mRNA expression in FNA samples which contain only small amounts of tissue.The nested Q-PCR assay has been proven to be a highly sensitive and specific method to assess the aromatase expression of breast tissue.In this study,aromatase and steroid sulfatase mRNA expression in 74 patients with benign or malignant disorders was evaluated and compared using nested Q-PCR and non-nested Q-PCR assays.The expression levels were analyzed and correlated with clinical parameters.No difference in the aromatase expression levels between nested and non-nested Q-PCR was noticed.Age and aromatase mRNA expression level were two independent risk factors for breast cancer (P=0.04 and P=0.00,respectively),while menopausal status and steroid sulfatase mRNA expression levels were not associated with breast cancer.This study showed that both nested and non-nested Q-PCR assays were effective methods for research using FNA breast samples.     

ki67、Cytokeratin19在口腔粘膜扁平苔藓及口腔鳞癌上皮组织中表达的研究

目的研究口腔粘膜扁平苔藓及口腔鳞癌患者口腔粘膜上皮ki67,Cytokeratin19的表达,探讨012发病的可能机理及是否为癌前病变。方法用免疫组化SABC法检测20例口腔粘膜扁平苔藓患者口腔粘膜组织及30例OSCC13腔粘膜组织中ki67,Cytokeratin19的表达并行细胞计数,其中对Cytokeratin19的表达行半定量统计分析。结果（1）OLP与正常组中ki67中阳性表达率有显著差异,P〈0.05;（2）Cytokeratin19行半定量分析发现OLP组与OSCC组有显著差异,P〈0.05。结论（1）ki67,Cytokeratin19的异常表达可能是OLP,OSCC的发病原因。（2）Cytokertin19、ki67的高表达均提示OLP可能是一种癌前病变。（3）Cytokertin19、ki67可作为口腔鳞癌检测的指标。     

ki67、Cytokeratin19在口腔粘膜扁平苔藓及口腔鳞癌上皮组织中表达的研究

目的 研究口腔粘膜扁平苔藓及口腔鳞癌患者口腔粘膜上皮ki67,Cytokeratin19的表达,探讨OLP发病的可能机理及是否为癌前病变.方法 用免疫组化SABC法检测20例口腔粘膜扁平苔藓患者口腔粘膜组织及30例OSCC口腔粘膜组织中ki67,Cytokeratin19的表达并行细胞计数.其中对Cytokeratin19的表达行半定量统计分析.结果 (1)OLP与正常组中ki67中阳性表达率有显著差异,P＜0.05;(2)Cytokeratin19行半定量分析发现OLP组与OSCC组有显著差异.P＜0.05.结论 (1)ki67,Cytokeratin19的异常表达可能是OLP,OSCC的发病原因.(2)Cytokertin19、ki67的高表达均提示OLP可能是一种癌前病变.(3)Cytokertin19、ki67可作为口腔鳞癌检测的指标.     

定量免疫PCR检测血清胃肿瘤相关MGAgs新方法的建立及在胃癌早期诊断中的预警价值

建立定量免疫PCR检测血清胃肿瘤相关MGAgs新方法及研究其在胃癌早期诊断中的预警价值.采用定量免疫PCR技术检测43例胃癌、37例健康献血员血清中MGAgs的含量.研究显示,血清MGAgs含量在健康对照组与胃癌组组间存在显著差异(P<0.01), 应用定量免疫PCR方法检测50 μL血清MGAgs的截断值相当于为5 972个MKN45细胞裂解所得抗原.研究表明,定量免疫PCR技术检测血清MGAgs抗原具有较高的灵敏性和稳定性,通过对胃癌患者血清中MGAgs进行定量检测,可能用于胃癌的诊断和鉴别诊断.     

实时定量PCR检测B细胞恶性肿瘤中BCL11A基因的表达水平

目的:建立B细胞淋巴瘤/白血病BCL11A基因的定量检测方法,并分析其在B细胞恶性肿瘤中的表达水平。方法:利用实时定量RT-PCR分析B细胞淋巴瘤(18例)、B细胞性慢性淋巴细胞白血病(B-CLL,8例)、T细胞性急性淋巴细胞白血病(T-ALL,8例)和正常对照(15例)外周血单个核细胞(PBMC)中BCL11A基因的表达水平,以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)基因作为内对照。结果:B-CLL组和B细胞淋巴瘤组患者PBMC中BCL11A表达水平均明显高于正常对照(P=0.000)和T-ALL组(P=0.000);T-ALL组和正常对照组BCL11A表达水平无显著差别(P=0.084);B-CLL组和B细胞淋巴瘤组BCL11A表达水平无显著差别(P=0.776)。在B细胞淋巴瘤不同的病例中,BCL11A表达水平有较大差异,其中最小值为0.04,最大值为9.70,中位值为1.00。结论:成功建立BCL11A基因的定量检测方法。     

FTIR assessment of the secondary structure of proteins in human breast benign and malignant tissues

The compositions of the secondary structures of protein in the human breast normal, hyperplasia, fibroadenoma and invasive ductal carcinoma tissues have been estimated from the Fourier self deconvolved spectra, the second derivative spectra and the curve-fitting analysis of the amide I bands in their spectra. Some parameters of the secondary structures of proteins in these 4 types of tissues are significantly different and located in separate ranges. Fibroadenoma tissue demonstrates the most remarkable difference in the compositions of α-helical and atypical helical structures. The carcinoma tissue has the highest ratio of the intermolecular β-sheet content and the intramolecular β-sheet content. This noticeable difference in the secondary structure may have important implications for analyzing the properties and types of human breast disease.     

恶性血液病红细胞体积分布宽度的变化及意义

目的 :探讨恶性血液病患者红细胞体积分布宽度 (RDW )变化的临床意义。方法 :正常对照组 81例 ;恶性血液病例组 75例 ,其中急性白血病 5 7例、慢性粒细胞白血病 10例、多发性骨髓瘤 8例。采用血细胞自动分析仪检测研究对象外周血红细胞体积分布宽度和其它各种红细胞参数。结果 :红细胞体积分布宽度 (RDW)正常对照组为 13 36± 0 81,急性白血病组为 17 5 4± 2 63,慢性粒细胞白血病组为 2 0 99± 2 63,多发性骨髓瘤组为 2 1 31± 6 0 2 7。 3组恶性血液病患者与正常对照组相比RDW值明显升高 ,具有显著性差异 (P <0 0 1)。结论 :恶性血液病患者红细胞有质和量的异常变化。     

DNA损伤修复蛋白在胆囊病变组织中的表达及其临床意义

目的 研究胆囊腺癌、癌旁组织、腺瘤性息肉和慢性胆囊炎组织中DNA损伤修复蛋白hMSH2和hMLH1表达及其临床意义.方法 选取胆囊腺癌108例、癌旁组织46例、腺瘤性息肉15例和慢性胆囊炎35例手术切除标本常规作石蜡包埋切片,采用EnVisionTM免疫组化法检测hMSH2和hMLH1.结果 hMSH2和hMLH1表达阳性率,胆囊腺癌分别为50.0%和49.1%、评分分别为2.2±1.9和2.2±1.8,均明显低于癌旁组织（阳性率分别为84.8%和87.0%;评分分别为3.9±1.3和4.2±1.2）、腺瘤性息肉（阳性率分别为80.0%和86.7%;评分分别为3.7±1.3和4.0±1.1）及慢性胆囊炎组织（阳性率分别为88.6%和88.6%;评分分别为4.1±1.1和3.9±1.1）（P＜0.05）;不同类型良性病变中2种DNA损伤修复蛋白表达阳性率及其评分均无明显差异（P＞0.05）.hMSH2和hMLH1表达阴性的良性病变胆囊上皮均呈中至重度不典型增生的病理形态学表现.腺瘤癌变或高分化腺癌、肿块最大径＜2 cm,无淋巴结转移及未侵犯周围组织的病例hMSH2和hMLH1表达阳性率及其评分均明显地高于低分化腺癌、肿块最大径≥2 cm、淋巴结转移及侵犯周围组织病例（P＜0.05）;2种DNA损伤修复蛋白表达与患者性别、年龄及有无胆囊结石均无明显关系（P＞0.05）.结论 DNA损伤修复蛋白表达水平均为反映胆囊腺癌发生、进展、临床生物学行为及预后的重要标记物,检测其表达水平对指导预防和早期发现、临床化疗胆囊癌可能有一定临床意义.     

血清CA19-9对良、恶性胆道疾病的诊断价值

目的:探讨血清糖类抗原CA19-9对良、恶性胆道疾病的诊断价值.方法:选取确诊的良、恶性胆道疾病患者114例,健康成年人49例,用全自动化学发光免疫分析仪检测血清CA19-9水平,并检测血清中的总胆红素(STB)、直接胆红素(CB)含量.结果:①胆道癌患者血清CA19-9水平明显高于正常对照组、胆囊炎和胆道结石患者(P<0.05);胆道结石黄疸组血清CA19-9水平明显高于无黄疸组、胆囊炎组和正常对照组(P<0.05),显著低于胆道癌患者(P<0.05).②血清CA19-9检测诊断胆道癌的敏感度、特异度和准确度分别是93.75%、66.33%和70.18%.③胆道结石黄疸组患者血清CA19-9水平与STB之间r=0.759(P<0.001),与CB之间r=0.775(P<0.001).结论:血清CA19-9检测是筛查胆道恶性疾病的灵敏指标,但对于伴有黄疸的血清CA19-9阳性患者,应进一步排除良性梗阻性疾病的可能.     

碱性成纤维细胞生长因子在乳腺良恶性病变细胞中的分布特征及其微血管密度的关系

目的 :研究碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)在乳腺癌细胞中的表达特征 ,寻找有助于诊断乳腺癌的生物学标记 .方法 :收集乳腺腺病、乳腺纤维腺瘤和乳腺癌等的手术切除标本各 2 2例 ,常规石蜡包埋切片 (4μm) ,分别做HE染色和用ABC法进行bFGF(1∶2 0 0 )、血管标记抗体CD34(1∶10 0 )免疫组织化学染色 ,参考Weidner和Maeda方法进行微血管密度 (MVD)测定 .结果 :在乳腺腺病和乳腺纤维腺瘤中的肌上皮细胞、导管上皮细胞、血管内皮细胞、血管壁平滑肌细胞和纤维母细胞等均表达bFGF ,其阳性产物主要位于胞浆 ,肌上皮细胞和导管上皮细胞的阳性产物部分见于胞核 ,但乳腺癌细胞的阳性产物主要位于胞膜 ,少数位于胞浆 ;胞核阴性 ,与良性增生性病变形成鲜明的对照 .2 2例乳腺癌bFGF膜阳性者 17例 (占 77 3% ) ,其MVD =90 5 6± 2 3 6 2 .肿瘤直径 4cm(10 /2 2例 )时 ,MVD增高达 93 19± 2 0 75 .乳腺腺病MVD =4 2 0 5± 12 2 6 ,乳腺纤维腺瘤MVD =4 3 14± 18 2 1,与乳腺癌相比有显著差异 (P <0 0 1) .结论 :1)bFGF免疫染色阳性产物在乳腺癌细胞中主要分布在胞膜 ,在良性增生性病变细胞中主要位于胞浆和胞核 .乳腺癌的MVD明显高于良性增生性病变 .2 )质量好的免疫染色、bFGF反应产物的分布特征 ,结合MVD有助于     

猕猴不同组织器官中黄嘌呤脱氢酶/氧化酶基因的mRNA表达的半定量RT-PCR检测方法的建立

目的建立半定量RT-PCR检测方法检测猕猴体内肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织,肾脏组织中黄嘌呤氧化脱氢酶(XDH/XO)的mRNA的表达。方法分别提取健康猕猴新鲜肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织,肾脏组织中总RNA,用RT-PCR二步法进行XDH/XO基因片段扩增,内参基因选用管家基因GAPDH,对获得的目的片段进行序列测定以鉴定其特异性,在凝胶影像分析仪Quantity one软件得出其电泳条带的灰度值(IOD),计算目的基因与内参基因比值得到猕猴不同组织XDH/XO的mRNA的相对表达量。结果建立了半定量RT-PCR检测方法,猕猴不同组织XDH/XO的mRNA表达在肝脏组织中表达水平最高,其次为心肌,肾脏,睾丸,皮肤。结论本研究所建立的半定量RT-PCR检测方法可应用于检测猕猴各组织器官组中的XDH/XO的mRNA的表达差异。     

miR-140-3p在侵袭性念珠菌感染患者中的诊断意义及预后价值

目的:探究miR-140-3p在侵袭性念珠菌感染(ICI)患者中的诊断价值和预后中的作用.方法:选择2021年1月至2021年6月在广东同江医院确诊治疗的60例侵袭性念珠菌感染患者作为本次研究实验组,另收集同期在该院进行体检的正常人50例作为本次对照组.收集两组人群血清,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检...     

Differential diagnostic value of tumor markers CEA,NSE and CYFRA21-1 in serum and pleural effusion

目的:探讨联合检测血清和胸水中癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、细胞角蛋白19片断( CYFRA21-1)在胸腔积液鉴别诊断中的价值.方法:对79例临床已确诊的胸腔积液患者(恶性47例,结核性32例)的血清和胸腔积液标本,采用化学发光法检测CEA、NSE、CYFRA21-1的含量,采用酶免疫法检测组织多肽抗原(TPS)、可溶性肿瘤坏死因子受体(sTNFR)、恶性肿瘤生长因子(TSGF)的含量.结果:恶性胸腔积液患者的6种肿瘤标志物水平均明显高于良性疾病组,差异有统计学意义(P＜0.05).血清中CEA、NSE、CYFRA21-1的在腺癌、小细胞未分化癌、鳞癌中的阳性率分别为66.7％、90.0％、72.7％,差异有统计学意义(P＜0.05),胸腔积液中CEA、NSE、CYFRA21-1的在腺癌、小细胞未分化癌、鳞癌中的阳性率分别为73.3％、100.0％、86.4％,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:联合检测血清和胸水中CEA、NSE、CYFRA21-1在胸腔积液鉴别诊断及肿瘤组织学分型中有一定的价值.     

离体甲状腺正常组织、良性瘤及癌的自体荧光光谱分析

用氩离子激光器作为激发光源，对甲状腺正常组织、良性瘤及瘤的离体组织标本进行了激光诱导组织自体荧光光谱分析。结果表明，３种不同性质甲状腺组织的自体荧光光谱之间有着较明显的差异，这些光谱差异对于癌症的光谱诊断研究有一定的参考价值。     

STAT3在新生大鼠高氧肺损伤肺组织中的表达及意义

目的:了解信号转导和转录活化因子3(STAT3)在新生大鼠未成熟肺高氧损伤过程中的表达规律及其与早产儿慢性肺疾病的内在联系.方法:取22 d胎龄足月新生SD大鼠,随机分为实验组(高氧组)与对照组(空气组),每组各8只大鼠,实验组生后立即置入体积分数＞95%持续氧环境中饲养;对照组则在空气中饲养.两组新生大鼠于生后第3、7、14天随机抽取后处死并取其肺组织,HE染色观察肺组织病理变化,Masson三色染色判断肺组织纤维化程度,免疫组化测蛋白含量,逆转录和聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测肺组织STAT3 mRNA的表达.结果:空气组生后第3、7、14天各亚组未见肺损伤的病理性改变,也没有胶原沉积增多现象;高氧组生后3 d肺泡内炎症反应及胶原纤维的沉积均不明显;第7天时可见大量炎细胞浸润,胶原沉积开始增多;第14天时炎细胞浸润减少,纤维化程度更加显著.第3、7、14天高氧组STAT3在肺泡上皮细胞、支气管上皮细胞、肺血管内皮细胞及炎症细胞等的表达明显增强,与同时期的空气组相比均显著增高,在高氧组中,以第7天时表达最强.第7、14天高氧组中肺组织的STAT3 mRNA的相对表达量明显高于对照组,其中以第7天高氧组的相对表达量最高,而两组的第3天亚组并未见明显差别.结论:高氧可造成新生鼠肺组织明显的病理损伤,早期为炎性反应阶段,后期纤维化程度逐渐增强.高氧暴露早期STAT3在肺组织中的表达随着暴露时间的延长而增加,提示STAT3主要在早期的急性炎症阶段起作用,在后期纤维化阶段呈逐渐降低趋势,未证实其与高氧肺损伤后期的纤维化有相关性.