真空充氮热处理对鲜切双孢蘑菇贮藏中褐变的影响

为延缓鲜切双孢蘑菇褐变的发生,研究了不同真空度(0,-20,-40,-60,-80,-98kPa)下充氮热处理对鲜切双孢蘑菇贮藏中的色泽以及过氧化物酶、多酚氧化酶、苯丙氨酸解氨酶和总酚含量的影响。结果表明,在实验范围内,真空充氮热处理可以减缓鲜切双孢蘑菇L*值(亮度)的下降速率,抑制其颜色向红色和黄色方向加重,减缓了鲜切双孢蘑菇褐变的发生;与对照组(0kPa)和其他真空度充氮热处理相比,在40℃、热处理5min时,-40kPa和-80kPa真空充氮可使鲜切双孢蘑菇过氧化物酶和多酚氧化酶活性保持在较低水平,而保持较高的苯丙氨酸解氨酶活性和总酚含量,进而延缓鲜切双孢蘑菇的衰老并提高其抗性。     

双孢蘑菇丛生变异的RAPD分析及差异片段的克隆

通过双孢蘑菇正常菌株及其丛生变异菌株基因组DNA的RAPD研究，找到一个与双孢蘑菇丛生变异可能相关的DNA片段。将其克隆并测序，GenBank查询结果表明该片段可能的部分开放读框(ORF)与多种生物的二氢硫辛酰胺脱氢酶(DLDH)的部分氨基酸序列有较高的同源性，由此提出了一个双孢蘑菇丛生变异的分子机理假设。     

双孢蘑菇疣孢霉的分离鉴定及其杀菌剂的筛选

从四川崇州双孢蘑菇疣孢霉受灾严重地区分离到一株致病菌,通过其纯培养特征、微观形态特征及回复感染验证确定该致病菌为疣孢霉(Mycogone sp.).经过初筛、复筛从21种杀菌剂中筛选出对该株疣孢霉生长抑制效果较好的6种,测定两两复配对疣孢霉和双孢蘑菇菌丝生长的影响.结果表明杀菌剂复配使用比单一杀菌剂效果更好,实验确定了两个较好的复配组合:果鲜灵(100000倍稀释) 甲醛(40000倍稀释),施宝功(100000倍稀释) 洁霉精(20000倍稀释).它们对疣孢霉的生长抑制率均达到了100%,而对双孢蘑菇菌丝的生长几乎没有影响.     

酒糟和马粪质量对栽培双孢蘑菇的影响

研究了用酒糟栽培双孢蘑菇的可行性，当酒糟单独堆制发酵或与稻草一起发酵后都不能得到符合质量要求的培养料，证明酒糟不适合用来栽培双孢蘑菇．然而用酒糟作为主要饲料的马粪(简称2型马粪)则是一种效果很好的栽培原料．栽培实验结果表明：由2型马粪和稻草组成的培养料中的粪草比例(干重比)与双孢蘑菇产量之间呈极显著的负相关性(r=-0．9714)，而由1型马粪(即以秸秆作为主要饲料的马粪)和稻草组成的培养料中的的粪草比例与双孢蘑菇产量之间则呈极显著的正相关性(r=0．9438)，通过测定培养料中的菌丝胞外漆酶活性，证明马粪质量对双孢蘑菇产量的影响作用主要是靠影响菌丝生长实现的。     

不同护色剂对冻藏双孢蘑菇片防褐效果的研究

研究了单一和复合护色剂对冻藏双孢蘑菇片防褐效果及品质的影响,结果表明,经不同护色剂浸渍后的冻藏双孢蘑菇片多酚氧化酶活性由低到高顺序为：L-半胱氨酸、Na2S2O5＋柠檬酸、Na2S2O5、Na2S2O5＋L-半胱氨酸、柠檬酸、对照,过氧化物酶活性由低到高顺序为：L-半胱氨酸、Na2S2O5＋L-半胱氨酸、Na2S2O5＋柠檬酸、柠檬酸、Na2S2O5、对照,即0.15%L-半胱氨酸处理对冻藏双孢蘑菇片的防褐变效果最好;此外,经过L-半胱氨酸处理的双孢蘑菇片可溶性固形物流失量最低,细菌总数最少,且不引起亚硫酸盐残留.     

高温诱导双孢蘑菇蛋白质表达变化的分析

对24℃常温培养和32℃诱导培养的双孢蘑菇8213、02、2796、4607菌株的菌丝体总蛋白质的SDS－PAGE分析比较,发现2796和4607菌株在43kD-110kD之间有明显的差异蛋白质出现,而和8213菌株的蛋白质差异带不明显。这些高温诱导特异表达的蛋白质可能与双孢蘑菇的热耐受相关。     

响应面法优化双孢蘑菇液态发酵培养基

以麦粒煮汁培养基作为双孢蘑菇液态发酵的基础培养基,采用响应面法对麦粒煮汁培养基进行了优化。双孢蘑菇在麦粒煮汁基础培养基中的菌丝体生物量和多糖产量分别为3.21g/L和201.55mg/L。在麦粒煮汁培养基中补充蛋白胨和麦芽糖后,其菌丝体生物量和多糖产量得到了显著提高(P0.05)。响应面法优化培养基结果表明,最优麦粒煮汁培养基的配方为:1 000mL麦粒煮汁,3.50g蛋白胨,41.00g麦芽糖,1.00g KH_2PO_4和0.50g MgSO_4。在最优麦粒煮汁培养基上,双孢蘑菇的菌丝体生物量和多糖产量分别达到12.33g/L和579.93mg/mL。     

不同外磁条件对双孢蘑菇176菌株生物学效应的研究

用不同磁性条件处理双孢蘑菇（Agricus bisporus）176菌丝体，经生物学指标测定结果表明：用单一磁处理水条件培养能使双孢蘑菇176的核酸含量、可溶性蛋白质含量提高10.1%和14.7%。用磁场处理，0.1T的磁场强度对双孢蘑菇负效应最明显，均使其菌丝体的核酸含量、可溶性蛋白质含量以及总蛋白质含量降低得最多，酯酶同工酶（EST）表现产量性状的主要酶带酶活性降低，部分弱酶带消失，无论是培养在MPDA上或是PDA上的菌丝体结果相似。但是双重磁性条件处理（磁处理水加上磁场处理）比单一磁场处理的生物负效应更强。     

双孢蘑菇原生质体制备条件的优化

采用L16(45)正交分析方法,对双孢蘑菇原生质体制备工艺进行了优化.试验结果表明,最佳制备条件是取菌龄7 d的液体菌丝体,以2.5%溶壁酶 7%蜗牛酶为组合,0.6 mol/L NaCl作为渗透压稳定剂,在30℃条件下,酶解3 h,原生质体产率为2.34×108个/mL.本研究可为双孢蘑菇原生质体的融合及转基因研究提供理论依据.     

双孢蘑菇预煮液成分分析及其降血压效果

以双孢蘑菇预煮液为原料,将样品冻干后测定其蛋白质、氨基酸、糖类、呈味核苷酸二钠以及重金属含量,并研究双孢蘑菇预煮液对原发性高血压大鼠的降血压作用。结果表明,双孢蘑菇预煮液冻干样品中,蛋白质质量分数为31.3%,主要以游离氨基酸和小肽的形式存在,分子质量小于1 000 u的成分比例达95.43%;碳水化合物质量分数为55.5%,主要以单糖和小分子糖类形式存在,分子质量小于1 000 u的比例高达98.67%;氨基酸总质量分数为11.78%,其中,呈味氨基酸的比例达到75.13%,呈味核苷酸二钠的质量分数为7.84%;重金属中,总砷、铅、镉和总汞的质量分数分别为(3.3×10~(-5))%、(3.1×10~(-5))%、(2.3×10~(-5))%和(1.3×10~(-5))%。对原发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)灌胃双孢蘑菇预煮液冻干样品后,SHR收缩压从(28.664±2.026)kPa开始下降,12 h后收缩压出现最低值(21.465±1.947)kPa,然后缓慢上升,24 h后收缩压仍维持在较低值(25.091±3.120)kPa,表明双孢蘑菇预煮液具有一定的降血压效果。     

双孢蘑菇耐温差异蛋白质组学研究

利用蛋白质组学和荧光定量PCR方法,研究双孢蘑菇(Agaricus bisporus Lange (Imbach))02菌株在常温与高温胁迫下的蛋白质表达差异,发现了6个差异蛋白质点,经NCBI数据库比对分析,表明6个差异蛋白质分别为HSP70家族的HSS1热激蛋白、异柠檬酸裂解酶、细胞色素P450单氧化酶及3个未知蛋白质.这些蛋白质在双孢蘑菇受热胁迫下具有保护自身稳定的功能.     

定西市科技成果公报（2007年度）

糯玉米单交种临糯4号;无公害新农药应用技术试验研究与示范推广;定西市马铃薯晚疫病综合防治技术研究与示范推广;冬春麦混播区陇西小麦条锈病发生流行规律及综防措施研究与示范;袋栽双孢蘑菇高产高效栽培技术试验研究.     

双孢蘑菇菇柄中多糖、核酸等成分的提取利用

废弃的双孢蘑菇菇柄富含多糖、核酸等活性物质,应获得更好的开发利用。本文就改进食用菌多糖的提取纯化工艺和简化核酸类物质的提取纯化工艺,采用膜分离技术,获得较高纯度的多糖产品、核酸产品进行了探索。     

生料栽培双孢蘑菇的初步尝试

双孢蘑菇(Agaricus bisporus)是一种味道鲜美、营养丰富的大型食用真菌,也是世界上很多国家和地区普遍栽培的一种食用和药用真菌。目前,我国栽培的双孢蘑菇主要采用堆肥发酵的方法。此种方法对气温高、湿度大的地区来说较为适宜。而青海省,由于海拔高,条件差,气温低、空气干燥,解决堆肥发酵困难较大;再者我省的食用菌栽培业起步晚、发展慢、底子薄、设备条件差,尚未适合我     

肉桂酸及其衍生物对双孢蘑菇致腐微生物的体外抑菌效果比较

双孢蘑菇(Agaricus bisporus(Lange)Sing)组织细嫩,营养价值高,采后呼吸代谢旺盛,为微生物的生长繁殖提供了有利条件,但容易引起一些不良的生理反应,加速组织的衰老和腐败,极大地降低了双孢蘑菇的商品价值.本文从腐烂的双孢蘑菇中分离鉴定得到6株细菌和8株真菌,分别为黏质沙雷氏菌(Serratia marcescens,2株)、产酸克雷伯菌(Klebsiella oxytoca,1株)、不动杆菌属(Acinetobacter guillouiae,1株)、沙雷氏菌属(Serratia sp.,1株)和阿氏肠杆菌(Enterobacter asouriae,1株)以及哈茨木霉(Trichoderma harzianum,5株)、多变根毛霉(Rhizomucor variabilis,1株)、绿色木霉(T.viride,1株)和米根霉(Rhizopus oryzae,1株).分别采用琼脂扩散法和生长速率法测定了肉桂酸及其衍生物对上述细菌和真菌的抑制作用,研究结果表明肉桂酸及衍生物对这些菌株有不同程度的抑制作用,抑制效果的强弱依次为4-甲基肉桂酸4-甲氧基肉桂酸肉桂酸4-羟基肉桂酸.本研究结果可为双孢蘑菇的采后防腐提供依据.     

蒙古口蘑与双孢蘑菇原生质体融合育种研究

以蒙古口蘑和双孢蘑菇为出发菌株,研究了酶浓度、酶解时间、菌龄和渗透压稳定剂、再生培养基等对蒙古口蘑和双孢蘑菇原生质体制备和再生的影响.结果表明,蒙古口蘑原生质体制备和再生的最佳条件是,培养5 d的菌丝体用2.5%(w/w)的溶壁酶酶解4 h,渗透压稳定剂为0.6 mol/L KCl,MB为再生培养基,制备率为7.53×1010个/L,再生率为8.4×10-4;双孢蘑菇原生质体制备和再生的最佳条件是,培养5 d的菌丝体用2%(w/w)的溶壁酶酶解3 h,渗透压稳定剂为0.6 mol/L KCl,PQA为再生培养基,制备率为6.96×1010个/L,再生率为7.4×10-4.对两种菌原生质体的释放过程进行形态观察,均为顶端释放.采用双亲灭活原生质体融合技术对蒙古口蘑和双孢蘑菇原生质体融合进行研究,蒙古口蘑原生质体采用热灭活,65℃处理30 min,灭活率达100%,双孢蘑菇采用紫外灭活,在15 W紫外灯下,距离30 cm,处理20 min,灭活率达100%,两菌株按1∶1混合,以30%PEMG(6 000)为促融剂,融合10 min,融合率为5.6×10-5.经遗传稳定性检验,融合菌株的遗传稳定率为80%,从菌落特征、菌丝形态、菌丝生长量、酯酶、游离全蛋白、乳酸脱氢酶、乙醇脱氢酶和过氧化物酶等同工酶方面对融合子进行筛选,获得一株具有双亲性状的融合株.     

微波辅助提取双孢蘑菇柄中多糖的工艺研究

为提高双孢蘑菇柄中多糖的提取得率,采用微波辅助法提取双孢蘑菇柄中多糖.分别对微波功率、微波处理时间、液料比、提取次数4个因素进行单因素实验和正交试验,并通过极差、方差分析,对提取过程中显著影响提取率的因素进行了统计分析.结果表明:微波辅助提取多糖的较佳工艺条件为微波强度60%、辐射时间6min、液料比1:12、提取次数4次,该工艺条件下提取多糖提取率为1.64%.     

科学发展,产学研联合再结硕果

2009年7月11日,由山东理工大学轻工与农业工程学院和淄博市临淄区农业技术推广中心共同完成的山东省农业科技成果转化资金项目“双孢蘑菇贮藏保鲜技术研究及其试验示范”、和山东淄博绿宝果菜新技术研究所共同完成的山东省良种工程重点项目“蕨菜品种优化、高效栽培及保鲜技术研究”两个项目同时通过了山东省科技厅组织的科技成果鉴定．     

利用ISSR分析野生蘑菇与双孢蘑菇的遗传多样性

利用ISSR分子标记对一批野生蘑菇进行分子鉴别，从选用的60 个ISSR 引物中，筛选出11 个引物，对供试的14个菌株基因组DNA 进行扩增，获得的指纹图谱清晰稳定、多态性强.结果表明，在获得的116个条带中，74.1％是多态性条带,相似系数从0.32到0.72.用NTSYS 软件进行聚类分析，野生蘑菇与双孢蘑菇的相似系数较低，最高的仅在0.7的水平上.研究结果表明，该批野生蘑菇有明显的遗传多样性，可以作为蘑菇杂交育种的资源.     

工厂化双孢蘑菇不同降温刺激后的转录组分析

为了探究双孢蘑菇降温结实的分子机制,本实验以双孢蘑菇W192为对象,在催蕾期利用高通量RNA测序技术对通过4 d、6 d、8 d把环境温度由21.5℃匀速降到17.5℃处理后的菌丝体进行基因表达分析.分析结果6 d有1481个差异表达基因,较8 d和4 d分别高出6.9%和34%.GO(Go Ontology)功能聚类分析表明,差异基因在细胞组分和生物学过程中分布较多,其中6 d除了在代谢、细胞过程中差异基因占优外,在胁迫响应、子实体分化和发育过程等条目下的差异基因明显并基本为上调表达,而4 d和8 d并没有出现这类差异基因,同时,6 d的差异表达基因参与的细胞内进行各种氨基酸和糖代谢更明显.KEGG通路(pathway)功能富集分析表明差异表达基因主要富集在氨基酸和抗生素生物合成通路上,其中6 d在糖酵解和核糖体生物合成通路富集,而4 d和8 d未出现.4 d、6 d降温刺激容易高产,但4 d出菇早,密度高,分层不明显等导致菇型受到影响,6 d更加稳产保质.本研究揭示了在不同降温刺激下的菌丝体的表达模式,可用于指导工厂化双孢蘑菇催蕾期环境调控.