葡萄幼胚培养技术的研究(Ⅰ)——激素对胚培养的影响及培养基的筛选

选用巨峰、里扎马特和无核白葡萄的幼胚接种在附加了GA3、IAA、6-BA等的不同激素水平的MS培养基上进行培养,结果表明花后60d的巨峰和花后50d的无核白的幼胚在附加GA30.5mg.L-1、IAA2.0mg.L-1、6-BA0.5mg.L-1的培养基上分别得到了44.0±8.9%和96.0±8.9%的发育率与31.9±6.4%和37.5%的成苗率;花后60d的里扎马特幼胚在附加GA30.5mg.L-1、IAA0.5mg.L-1、6-BA0.5mg.L-1的培养基上得到了76.0±8.9%的发育率和63.5±5.5%的成苗率.筛选出了适合不同品种的最佳胚培养、萌发以及成苗培养基,为葡萄新品种的选育提供了新的方法与技术依据.     

巨峰葡萄胚培养技术的研究

选用巨峰葡萄在花后35～60 d,取其胚接种在含有GA3I、AA、6-BA的不同激素水平MS培养基上进行胚挽救,以研究葡萄的幼胚培养技术.结果表明,巨峰葡萄在花后60 d效果最好.在附加GA30.5 mg/LI、AA1.0 mg/L、6-BA0.5 mg/L的最佳培养基上得到了(76.0±16.7)%的发育率和(69.1±13.1)%的成苗率.     

葡萄幼胚培养技术的研究(Ⅱ)——接种时间及处理方法对胚培养的影响

选用花后35￣60d的巨峰、里扎马特和无核白葡萄,取其幼胚接种于不同激素水平M S培养基上,进行胚培养,以研究接种时间及处理方法对胚培养的影响.结果表明对花后60d的里扎玛特和巨峰的幼胚进行胚培养,其发芽率和成苗率显著高于层积处理后催芽播种的种子的发芽率与出苗率.低温和横切处理能有效地促进葡萄幼胚的萌发.花后60d的巨峰和里扎马特的发育率和成苗率最高;花后60d的无核白的幼胚发育率最高,花后50d的幼胚成苗率最高.     

无核白葡萄胚挽救机理的研究

选用无核白葡萄在开花后35￣60d,取其胚接种在含有GA3+IAA+6-BA的不同激素水平MS培养基上,进行胚挽救,以探讨研究无核葡萄的胚挽救机理.结果表明无核白在开花后50d胚挽救效果最好.在附加GA30.5mg.L-1+IAA1.5mg.L-1+6-BA 0.5mg.L-1的MS培养基上得到了84%的发育率和31.9%的成苗率(50d);开花后60d的发育率最高,得到了100%的发育率,却未得到成苗,说明在胚挽救中幼胚的不同部位其发育与败育过程不同步.对无核葡萄胚挽救适期的确定依据提出了新的见解.     

青钱柳离体胚的培养及快速繁殖

以青钱柳离体胚为材料,采用正交试验设计对影响其萌发、快速成苗的各种因素进行研究,并进行了诱导增殖试验.结果表明,基本培养基种类是影响青钱柳离体胚萌发和成苗最关键的因素.离体胚萌发的最佳培养基组合为WPM GA3(10 mg/L) 蔗糖(30 g/L),萌发率可达100%;适宜成苗的培养基组合是WPM GA3(5 mg/L) 麦芽糖(30 g/L),培养60 d的无菌苗移栽成活率为100%;最适的增殖培养基为WPM 6-BA(0.5 mg/L),平均增殖系数为3.45.     

红宝石无核和希姆劳特葡萄杂交胚挽救技术研究

为了优化无核葡萄杂交胚的离体培养条件,分别以种子败育型无核品种红宝石无核和希姆劳特为父、母本杂交和自交胚珠的材料,进行亲本基因型、取样时期、发育培养基、萌发培养基对无核葡萄胚挽救效果影响的研究.结果显示:红宝石无核与希姆劳特正反交时,以红宝石无核作母本时杂交胚的发育率和萌发率均高于以希姆劳特作母本的杂交胚;红宝石无核自交胚的发育率和萌发率高于希姆劳特自交胚;红宝石无核×希姆劳特杂交胚珠和红宝石无核自交胚珠的最佳取样时期均为授粉后61 d,希姆劳特×红宝石无核杂交胚珠和希姆劳特自交胚珠的最佳取样时期均为授粉后54 d.适合于红宝石无核×希姆劳特和希姆劳特×红宝石无核杂交胚发育的培养基为:Nitsch+1.5 mol/L IAA+0.5 mol/L 6-BA+0.5 mol/L GA3+60 g/L蔗糖+5 g/L琼脂+1 g/L活性炭,胚发育率分别为8.40%和8.30%;适于红宝石无核×希姆劳特和希姆劳特×红宝石无核杂交胚萌发的培养基为:WPM+0.2 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖+5 g/L琼脂+1.5g/L活性炭,萌发率分别为7.32%和6.12%.     

以红宝石无核葡萄为亲本胚挽救育种技术的研究

为了提高无核葡萄胚挽救中幼胚的成苗率,对以红宝石无核葡萄为母本,巨玫瑰、玫瑰香和希姆劳特葡萄为父本的杂交胚珠进行胚挽救,分析不同父本、取样时间和培养基对杂交胚珠胚挽救效果的影响.结果表明,在胚的离体培养中,以巨玫瑰葡萄作父本更有利于胚的发育和萌发,红宝石无核×巨玫瑰、红宝石无核×希姆劳特和红宝石无核×玫瑰香杂交胚珠的最佳取样时期均为授粉后61 d,相应的胚萌发率分别为20.55%、6.56%和9.60%.分析不同发育培养基和萌发培养基对胚挽救效果的影响,适合红宝石无核×希姆劳特和红宝石无核×玫瑰香杂交胚发育的为N1培养基(Nitsch+1.5 mol/L IAA+0.5 mol/L 6-BA+0.5 mol/L GA3+60 g/L蔗糖+5 g/L琼脂+1 g/L活性炭,pH值为5.8),胚发育率分别为8.00%和13.92%.适合胚萌发成苗的为W1培养基(WPM+0.2 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖+5 g/L琼脂+1.5 g/L活性炭,pH值为5.8).通过根尖染色体倍性鉴定,确定红宝石无核×巨玫瑰的9株杂交幼苗中,4株为三倍体幼苗,5株为二倍体幼苗.     

秋葵幼胚培养试验初步研究

以秋葵幼胚为试材,筛选较适合幼胚萌发和成苗的培养基,并研究胚龄分别为开花后4 d、6 d、8 d、10 d的幼胚萌发率和成苗率.结果表明,秋葵幼胚萌发和成苗的适宜培养基分别为Qz(Ms+0.1 mg/mL BA+1.0 mg/mL GA3)和QG(Ms+0.5mg/mL GA3);开花后8 d的幼胚萌发率和成苗率最高.由此建立秋葵幼胚培养的方案.     

中间锦鸡儿组织培养体系的建立

以中间锦鸡儿茎段为外植体,建立了它的组织培养体系,具体条件如下:愈伤组织诱导培养基为MS+GA30.15mg/L+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.4mg/L+AC 0.1g/L+蔗糖25g/L+琼脂6g/L,愈伤诱导率达33.33%;丛生芽诱导培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.2mg/L+蔗糖25g/L+琼脂6g/L,诱导率为13.33%;诱导生根培养基为MS+IAA 0.5mg/L+GA30.15mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6g/L,生根率达60%;将生根幼苗移至蛭石和营养土体积比为2∶1的基质中,移栽成活率高达100%.     

常绿杨植株再生体系的建立

以水培常绿杨(Populus deltoides60/160×P.nigra'chile')枝条得到的叶柄为外植体,探讨了常绿杨植株再生的方法.结果表明:在MS BA0.3 mg/L NAA0.1 mg/L培养基上,不定芽的分化率最高,为82.5%;不定芽在MS BA0.2 mg/L NAA0.05 mg/L培养基上的继代增殖系数为7.2;在继代增殖培养基中添加0.4 mg/L GA3时,对不定芽的增殖和伸长有显著效果;在生根培养基1/2MS NAA0.05 mg/L上,生根率达到96.5%.     

安祖花组织培养研究

安祖花外植体的离体培养显示,在MS+2,4-D 0.1 mg.L-1+NAA0.2 mg.L-1+BA1.0 mg.L-1的培养基愈伤组织诱导率最高,达93.8%.40 d后,将愈伤组织接于MS+BA1.0 mg.L-1的培养基上,45 d后出现芽的分化.再生芽易于生根,将小芽接于MS培养基上壮苗30 d,再接于1/2MS培养基上,30 d后形成完整小植株,移栽成活率达95%以上.     

不同因子对“金丰一号”金银花生根的影响

研究了基本培养基,IBA,活性炭和蔗糖对“金丰一号”金银花生根的影响,结果表明:基本培养基为1/2 MS时,生根效果较佳;IBA 3 mg·L-1,时,试管苗生长较好,生根也快;从节约成本出发,蔗糖的浓度为15 g·L-1对生根较为有利.即适于生根的培养基为1/2 MS+IBA 3 mg·L-1+0.2 g·L-1活性...     

二乔刺槐组织培养及其体外植株再生技术研究

以二乔刺槐叶片为试验材料,进行组织培养及其体外植株再生技术研究.结果表明,二乔刺槐幼嫩叶片进行组织培养的适宜基本培养基为WPM,芽诱导最适培养基为WPM+IBA0.25mg.L-1+BA5mg.L-1+GA30.05mg.L-1,根诱导最适培养基为WPM+IBA0.3mg.L-1.该结果为二乔刺槐的细胞工程和基因工程操作及其新品种的快速繁殖奠定了基础.     

PP333对怀地黄种质离体保存的影响

研究了PP333对怀地黄"85-5"脱毒苗离体保存的影响.结果表明:适宜浓度PP333(1~2 mg.L-1,单位下同)可以延缓脱毒苗的生长速度,延长其保存时间,减少其继代次数;高浓度PP333(4~8)对其生长产生毒害作用,不利于种质保存.适宜怀地黄脱毒苗离体保存的培养基为MS+NAA0.02+6-BA0.2+PP3331,在该培养基上保存180 d后,存活率达68%,恢复培养时生长正常,成活率达100%.     

大岩桐叶柄诱导再生植株

用大岩桐叶柄作为外植体,分别对试管苗诱导、增殖和生根条件进行了初步研究。结果表明:适宜诱导培养基以MS+6-BA2 0mg·L-1+NAA0 2mg·L-1+3%蔗糖+0 7%琼脂最佳,35d其诱导率为1 324,增殖培养基以MS+6-BA2 0mg·L-1+NAA0 1mg·L-1+3%蔗糖+0 7%琼脂为最好,30d其增殖倍数可达5 3倍。生根培养基以1/2MS+NAA0 6mg·L-1+3%蔗糖+0 7%琼脂为最好,生根率可达89 7%。