苏芸金杆菌187菌株的研究进展

苏芸杆菌１８７菌株自１９７８年发现以来，经近２０年的研究，现已在如下方面取得了重要成果：１．苏芸金杆菌１８７菌株的生物学特性；２．其毒力与对纹幼虫的致病机理；３．其伴孢晶体和芽孢的超微结构，生理生化与抗原特性，４．其发酵条件与特性，５．大田灭蚊应用研究。     

酶联免疫吸附测定法检测苏云金杆菌187菌株晶体蛋白的研究

本文采用液体双相法分离苏云金杆菌以色变种187菌株产生的伴孢晶体,然后碱解提取具体物活性的晶体毒素蛋白作为抗原,以ELISA间接法测定,最低检测阀值为1ng/ml。最敏感的检测区间为10~(-6)—10~(-9)g/ml。此区间内,抗原浓度的负对数值与ELISA的吸光值呈直线关系,其直线回归方程为(?)=6.457-0.3x。     

苏云金杆菌187菌株对致乏库蚊(Culex pipiens fatigans)幼虫中肠细胞影响的超微结构观察

本文采用电于显微镜技术,对感染苏云金杆菌187,菌株的致乏库蚊幼虫进行了细胞病理学观察。发现在感染二小时以内,线粒体嵴内空间加大或内嵴模糊消失,粗面内质网网膜出现空泡并逐步扩大。微绒毛和细胞膜溶解,细胞解体。存感染2小时以后,中肠上皮细胞核内染色质向中央集中而远离核膜,基膜内褶明显萎缩和消失,褶内空间显著变小。     

从土壤分离苏芸金芽孢杆菌

从120个土壤样品检测了11790株芽孢杆菌,其中有81株是产生伴孢晶体的苏芸金芽孢杆菌。它们在生长和对昆虫的致病力上,彼此存在明显差异。从中筛选出了毒力较强的苏芸金芽孢杆菌菌株,从而认为从土壤中分离苏芸金芽孢杆菌有效菌株,是一条新的途径。     

苏芸金杆菌发酵水平与溶氧关系的研究

在对苏芸金杆菌(Bacillus thuringiensis,B.t)发酵生理特性研究的基础上,证实了B.t发酵过程中发酵液中溶氧(DO)浓度是影响发酵永平的关键因素。在12L玻璃发酵罐试验中,通过优化供氧条件,使发酵水平(活芽孢数)得以提高。如搅拌转速由300r/min增加至600r/min,菌数可提高47.1%;适当增加搅拌器直径,菌数可提高13.6%。发酵全过程采用变转速控制,菌数比300 r/min定速控制提高36%,轴功耗较600r/min定速控制节约50%。在20t发酵罐放大试验中,调整内部结构后,使溶氧水平提高,菌数比改造前增加了15.3%。     

苏芸金杆菌中试规模发酵的工艺控制初探

采用密闭通风发酵设备对苏芸金杆菌ＢＴ—３７进行了中试规模液体深层发酵的实验和生产，就不同黄豆饼粉含量培养基和不同种子罐培养菌龄对最终发酵液活菌含量的影响作了初步探讨，为进一步优化工艺控制打下了基础。     

苏芸金芽孢杆菌与蜡状芽孢杆菌基因组DNA同源性及多态性的研究

用ＲＡＰＤ－ＰＣＲ扩增到６１个标准株、生产用菌株及２４个蜡状芽孢杆菌参比菌株的全ＤＮＡ指纹图,通过计算多态性扩增片段的大小,利用ＮＴＳＹＳ软件进行聚类分析,蜡状芽孢杆菌菌株并未形成独立于苏芸金芽孢杆菌的聚群,这是此近缘种ＤＮＡ分子水平高度同源的新证据．６１个苏芸金芽孢杆菌的聚类结果表明：其ＤＮＡ指纹图与Ｈ－血清型有一定相关性．与引物０９５５－０３相比,引物０９４０－１２对苏芸金芽孢杆菌不同亚种及蜡状芽孢杆菌菌株具有更高的鉴别价值,大多数特异株ＤＮＡ全指纹图有菌株特异性,证实ＲＡＰＤ－ＰＣＲ技术是苏芸金芽孢杆菌及蜡状芽孢杆菌种下分类和鉴定的简便快速有效的方法     

苏芸金杆菌代谢特性研究

采用12L玻璃发酵罐,测定了苏芸金杆菌(Bacillus thuringiensis, B. t)发酵过程中的菌体浓度、总糖、还原糖、氨基氮、溶磷、溶氧、铵离子、核酸、ATP、pH、蛋白酶及粘度等参数。获得了B.t生长过程的代谢曲线,从中分析了各参数变化间的相互关系。这对于控制B.t发酵过程及提高发酵水平具有一定指导意义。     

苏芸金芽孢杆菌与蜡状芽孢杆菌基因组DNA同源性及？…

用ＲＡＰＤ－ＰＣＲ扩增到６１个标准株,生产用菌株及２４个蜡状芽孢杆菌参比菌株的全ＤＮＡ的指纹图,通过计算多态性扩增片段的大小,利用ＮＴＳＹＳ软件进行聚类分析,蜡状芽孢杆菌菌株并未形成独立于苏芸金芽孢杆菌的聚群,这是近近缘种ＤＮＡ分子水平高度同源的新证据,６１个苏芸金牙孢杆菌的聚类结果表明,其ＤＮＡ指纹图与Ｈ－血清型有一定相关性,与引物０９５５－０３相比,引物０９４０－１２对苏芸金芽孢杆菌不同亚种及     

应力应变表示法分析

考察了在从标系变换时使弹性系数矩阵保持相似的应力应变表示法－协调表示法，分析了协调应力应变表示法的协调条件和本征量的特性，并讨论了其中的一组具有独特优点表示法－规范表示法。     

中国棉铃虫核多角体病毒VHA273毒株病毒粒子结构蛋白及超微结构的研究

ＨａＮＰＶＶＨＡ２７３毒株的ｓＮＰＶ与ｍＮＰＶ病毒粒子大小为２８０～２７５×６０～１５０ｎｍ,核衣壳大小为３１０～４００ｎｍ×６０ｎｍ．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析显示,该病毒粒子含有２３种结构蛋白,分子量为１．０～９．２×１０４道尔顿．虽然浓度梯度超离心显现病毒粒子有５条沉降带,但各沉降带的电泳图谱非常一致．说明ＶＨＡ７３的ｓＮＰＶ与ｍＮＰＶ的结构蛋白在分子及亚分子水平上是一致的．     

狐米草胁迫相关蛋白诱导与分析

本对狐米草进行NaCl、ABA、PEG—6000三种胁迫处理后，在不同时间段分别收集叶片，用高盐溶液处理，然后测定一些与抗生相关的生理生化指标，并用统计学逐步回归的方法进行抗胁迫相关蛋白的推测．结果表明，每种处理对狐米草各生理生化指标均有不同程度的影响，且能够使蛋白含量发生变化，其中表观相对分子量为40．5kDa、39．5kDa、38kDa、36kDa的蛋白与狐米草抗胁迫能力有相关性．同时证明，狐米草存在交叉适应现象，用低浓度盐和ABA处理的狐米草能不同程度的抵高浓度盐胁迫。     

187菌株灭蚊有效成份的研究

本文对187菌株灭蚊有效成份进行了研究。结果表明:187菌株的伴孢晶体对蚊幼虫有较高的毒力;滤液与芽孢无毒力;高浓度未形成晶体与芽孢的菌体(培养11小时),虽有较低毒力,但死亡速度缓慢。     

共振光散射技术在生化及药物分析中的应用

散射光在高分子化学、胶体化学中已得到广泛应用,在分析化学中已应用于色谱监测系统中,但在分子光谱分析中,通常散射光是一个干扰成分而采取诸如低温冷冻技术和场分辨技术加以消除或降低.1993年,Pasternack通过同时扫描普通荧光光度计的激发单色器和发射单色器获得了聚集体系的共振光散射光谱[1],在此基础上我们提出了应用卟啉在核酸表面长距组装导致光散射增强的现象建立和核酸的共振光散射分析方法[2].近年来,共振光散射技术已在生物大分子包括蛋白质、核酸和糖类分析,临床药物和金属离子分析中得到广泛应用,已成为一个新兴的光谱分析方法[3～5].     

流动注射分析法测定氨基酸和蛋白质扩散系数的研究

提出了用盘曲管道流动注射分析以半峰宽测定扩散系数的理论模型和实验方法，测定了一些小分子化合物和蛋白质样品的扩散系数，每次测定所需时间为１０－３０ｍｉｎ，提出了用该方法扩散系数测定蛋白质分子量的新方案并测定了一些蛋白质样品的分子量。