双水相纯化湖南黑茶茶多酚工艺优化

选用PEG-(NH4)2SO4双水相体系对湖南黑茶茶多酚进行分离纯化。通过单因素实验考察PEG的平均分子量与质量分数、硫酸铵质量分数、提取液体积、体系pH值和温度等多种因素对茶多酚纯化的分配系数以及萃取率的影响,并选择正交实验对茶多酚纯化工艺条件进行进一步优化。实验表明,双水相纯化湖南黑茶茶多酚的最佳工艺条件为:10.0g双水相体系中,选用平均分子量为600、质量分数为30%的PEG,质量分数为21%的(NH4)2SO4,体系的提取液体积为2.7 mL,pH=5.5,温度为25℃。在此最优工艺条件下,可得双水相纯化湖南黑茶茶多酚的分配系数为34.50,萃取率可达97.57%。     

PEG/磷酸盐双水相系统萃取BSA的研究

以PEG／磷酸盐双水相系统萃取BSA为对象，研究了双水相系统成相浓度、外加盐NaCl,BSA起始浓度等对BSA在两相间的分配系数和BSA下相萃取率的影响，结果发现，BSA在部分被萃取入双水相体系的下相，成相组成的PEG6000 10％（质量分数）／PO4^3- 6％（质量分数）和PEG10000 6％（质量分数／PO4^3- 6％（质量分数）的双水相系统有利于BSA的萃取分配；外加NaCl对PEG6000 10％（质量分数）／PO4^3- 6％（质量分数）系统萃取BSA的影响不大；得出了上、下相BSA浓度和BSA在两相间分配系数K与系统BSA起始浓度之间的表达式，与实验结果有较好的拟合。     

人溶菌酶的双水相萃取法分离

采用双水相体系直接从重组巴氏毕赤酵母发酵上清液中分离人溶菌酶,研究了体系中聚乙二醇(PEG)平均分子量,PEG、硫酸钠和氯化钠浓度,pH对人溶菌酶和总蛋白的分配系数、相体积比、萃取率和纯化因子的影响。结果表明:在PEG 4000、N a2SO4和N aC l质量分数分别为0.08、0.13、0.06,pH为5.6时,在室温下的双水相萃取率达96.63%,纯化因子为6.5。     

2种盐与PEG4000组成的双水相体系及其对BSA萃取的影响

通过对PEG4000-NaH2PO4和PEG4000-(NH4)2SO4双水相体系最佳条件的确定,研究双水相体系对BSA萃取的影响.考察NaH2PO4、(NH4)2SO4、PEG4000的质量分数,BSA的质量浓度对双水相形成以及牛血清白蛋白分配行为的影响.结果表明,PEG4000-NaH2PO4双水相系统中w(PEG4000)=10.50%,w(NaH2PO4)=20%,回收率最大为89.4%;PEG4000-(NH4)2SO4双水相系统中,w(PEG4000)=12%,w((NH4)2SO4)=17.50%,回收率最大为91.5%.PEG4000-(NH4)2SO4双水相体系比PEG4000-NaH2PO4更易分离纯化得到大量目标蛋白质.     

基于PEG和不同盐的双水相体系萃取牛血清白蛋白研究

建立了PEG 4000/NaH_2PO_4和PEG4000/(NH_4)_2SO_4两种双水相体系,比较了两种双水相体系对牛血清白蛋白萃取行为的影响.考察了无机盐种类和浓度、PEG质量分数、牛血清白蛋白浓度等因素对双水相形成以及对牛血清白蛋白分配行为的影响.结果表明PEG 4000/NaH_2PO_4双水相系统的最佳萃取条件为:PEG4000=11.50%,NaH_2PO_4=20%,此时K值最小为0.45,达最大回收率.PEG4000/(NH_4)_2SO_4双水相系统最佳萃取条件为:PEG4000=12%,(NH4)_2SO_4=17.50%,此时K值最小为0.42,达最大回收率.     

双水相体系纯化天冬氨酸酶、纤维素酶和脂肪酶

用聚乙二醇(PEG)/磷酸钾双水相抽提技术分别从天冬氨酸粗酶、商品纤维素酶和脂肪酶中分离纯化出天冬氨酸酶(Aspartase)、纤维素酶(Cellulase)和脂肪酶(Lipase)。研究了PEG分子量及浓度、磷酸钾浓度、蛋白质含量、pH、氯化钠浓度等因素对分配系数,酶活回收率和分离效果等参数的影响,并设计出双水相体系抽提三种酶的相组成系统。     

ATPS法分离纯化Aspergillus sp.F044脂肪酶

研究了Aspergillussp.F044脂肪酶在双水相(ATPS)中的分配平衡,考察了PEG相对分子质量、PEG/磷酸盐质量分数、pH值和NaCl质量分数等5个重要因素对分配平衡的影响.发现PEG相对分子质量越小疏水作用越强,越有利于F044脂肪酶向上相分配,并且两相间电势差、氢键作用等对分配平衡有较大影响.试验得到的最优纯化条件为:PEG相对分子质量为600,质量分数为17.5%,磷酸盐质量分数为12.5%,w(NaCl)=0.5%,pH值为7.0,在此条件下脂肪酶分配系数达到7.1,纯化系数达到4.7,回收率达到91%.直线放大试验结果表明:该系统能够用于大量分离纯化Aspergillussp.F044脂肪酶,具有工业应用价值.     

PEG/(NH4)2SO4双水相体系甘草酸盐分配系数测定和关联

利用双水相分配技术从甘草中提取甘草酸盐，测定了不同分子质量PEG／(NH4)2SO4双水相体系的分配系数，并利用改进Diamond—Hsu模型对此双水相体系的分配系数进行了数学关联。得到比较好的结果。     

双水相萃取法分离纯化月季花色素

采用PEG400/Na2SO4双水相体系分离纯化月季花色素,确定了月季花色素的双水相体系组成为25％PEG400与18％Na2S04,并通过实验探讨了温度、色素粗提液体积、pH值对萃取效果的影响.结果表明,色素粗提液体积对萃取效果影响最大,其次为pH值和温度.最佳萃取条件为:pH2.0;粗提液体积1mL;温度30℃.在此条件下,月季花色素的萃取率为98.45％.双水相萃取法是分离纯化植物色素的有效方法.     

双水相萃取法富集分离地木耳中的藻蓝蛋白

采用聚乙二醇(PEG4000)/硫酸盐双水相体系,经一次萃取从地木耳细胞破碎液中富集分离藻蓝蛋白.分别考察萃取时间、硫酸盐种类及浓度、PEG4000浓度、溶液pH值和离子强度对双水相萃取分离地木耳中藻蓝蛋白的影响.结果表明:在萃取时间为30 min,Na2SO4的质量分数为15％,PEG4000的质量分数为12％,加入...