普通环境长爪沙鼠肠道菌群的分离鉴定

目的调查普通环境长爪沙鼠肠道菌携带情况,为制定长爪沙鼠微生物学等级标准提供依据。方法对普通饲养环境的65只长爪沙鼠进行解剖,取回盲部内容物接种于6种不同培养基,分离菌株后同时进行生化分析和PCR测序鉴定,以期准确判断分离菌株所属菌属,并分别计算检出率。结果用6种培养基组合进行肠道菌群的分离大大提高了细菌的检出率。本研究共检出37种细菌,不同细菌感染率相差很大,阳性率在1/65（1.5%）到60/65（92.3%）之间,其中部分细菌为大鼠和小鼠致病菌。结论本研究为长爪沙鼠的微生物学等级标准的制定提供了参考数据。     

制备型高效液相色谱法分离纯化绿原酸

采用制备高效液相色谱技术,从杜仲叶提取物中分离纯化得到高纯活性成分绿原酸.对制备色谱的洗脱方式、洗脱剂组成、浓度、洗脱速度等参数进行优化,提出并应用了流动相速度梯度洗脱方法.最佳操作条件为:采用流速梯度进行洗脱,流速先为28 mL/min,然后为45 mL/min;流动相为15%的有机酸B和 0.1%的有机酸E(体积分数);测定波长为254 nm;进样体积为10 mL;进样量为2500 mg.通过该工艺分离纯化,制备回收率为83.3%,相对标准偏差为3.1%,绿原酸的纯度达98.61%,同时可得到杜仲叶黄酮、桃叶珊瑚甙等副产品.     

天然多肽分离方法及其应用前景

综述了近几年来多肽物质主要分离方法,主要包括高效液相色谱法、电泳等方法,并概述了多肽在多肽药物、多肽食品、及多肽护肤品方面的应用。     

高效液相色谱法分离测定人参保健制品中的人参皂甙

样品经60％的甲醇水溶液溶解，超声提取30min。冷却至室温后，用60％甲醇溶液准确定容。再经15000r／min离心10min，取上清液经高效液相反相色谱法测定，以乙腈-水为流动相，经梯度洗脱分离测定人参保健制品中的6种主要的人参皂甙。使用紫外检测器在203nm波长处检测。应用方法对皂甙Rb1进行线性范围测定，测得其在0～378μg／mL浓度范围内有良好的线性，测得其回收率在95％以上，最低检测限为2.2ng。     

乳汁菌群对6月龄婴儿肠道菌群的影响初探

目的:基于16S rRNA测序技术初步探讨有菌乳汁对产后6月龄婴儿肠道菌群的影响。方法:本研究共纳入12例产妇及其婴儿,收集产妇产后6月乳汁及其6月龄婴儿粪便标本,根据产后6月乳汁有无菌群,将乳汁分为乳汁无菌组和乳汁有菌组,比较无菌乳汁和有菌乳汁喂养6月龄婴儿肠道菌群多样性与物种差异。结果:收集的12例产后6月乳汁样本中,7例乳汁样本中检测出菌群,乳汁样本中菌群检出率58.33%。有菌乳汁喂养的6月龄婴儿肠道菌群与无菌乳汁喂养6月龄婴儿肠道菌群α多样性和β多样性无显著性差异。有菌乳汁喂养的6月龄婴儿肠道中无害芽孢梭菌、未分类丹毒丝菌科、丹毒丝菌纲、丹毒丝菌目、丹毒丝菌科的相对丰度显著高于无菌乳汁喂养6月龄婴儿(P<0.05),无菌乳汁喂养婴儿肠道中乳酸菌科、乳酸菌属的相对丰度显著高于有菌乳汁喂养的婴儿(P<0.05)。结论:产后6月乳汁中可无菌群的存在,乳汁菌群的有无虽不能改变6月龄婴儿肠道菌群的多样性,但可改变6月龄婴儿肠道菌群的菌群结构。     

高效液相色谱测量啤酒中氨基酸

本文建立了测量啤酒氨基酸的有效方法,该方法使用高效液相色谱采用梯度洗脱测定啤酒中的氨基酸,结果回收率为99.2%,RSD为2.01%,表明本方法精密度高,稳定性好,可作为检测啤酒氨基酸有效方法。     

HPLC/NMR法对OPPEO离子型表面活性剂的分离与鉴定

本文采用高效液相色谱/核磁共振波谱离线联用的方法,选择最佳分离条件,制备纯组分,描出良好的主组分`H质子NMR图谱。根据得到的高效液相色谱分离、制备结果及核磁共振数据,对该聚合物进行了结构判断,获取了十六种主成分化合物,较为理想。     

红景天中含红景天苷量的测定

为建立一个稳定可靠分离度好的方法测定红景天中含红景天苷的量.采用高效液相色谱法,色谱柱为BDS HYPERSIL-C18(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈-0.03%磷酸为流动相进行梯度洗脱;流速1.0 m L/min;检测波长275 nm;柱温30℃.结果表明,红景天苷的进样量在1.25~10μg范围内有良好的线性关系,平均回收率为98.16%,RSD为0.89%.该方法准确、可靠、分离度好,可用于红景天的质量评价.     

蛋白质组分离方法及其进展

介绍了新兴的蛋白质组学领域中较为常用的分离方法二维凝胶电泳、高效液相色谱和毛细管电泳及电色谱的基本原理．对其应用、改进和发展做了一些讨论．     

高效液相色谱法分离测定人参保健制品中的人参皂甙

样品经60%的甲醇水溶液溶解,超声提取30 min.冷却至室温后,用60%甲醇溶液准确定容.再经15000r/min离心10min,取上清液经高效液相反相色谱法测定,以乙腈-水为流动相,经梯度洗脱分离测定人参保健制品中的6种主要的人参皂甙.使用紫外检测器在203 nm波长处检测.应用方法对皂甙Rb1进行线性范围测定,测得其在0～378 μg/mL浓度范围内有良好的线性,测得其回收率在95%以上,最低检测限为2.2 ng.     

高效液相色谱手性固定相法拆分喹禾灵对映体

采用高效液相色谱法,在直链淀粉-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)(Sino-Chiral AD)手性柱上,对喹禾灵外消旋体进行拆分,考察流动相正己烷中,不同的醇类添加剂、醇类添加剂浓度及温度对手性分离的影响,当流动相为V正己烷∶V乙醇(95∶5)、流速为0.5mL·min-1、25℃时喹禾灵在Sino-Chiral AD柱上获得完全分离,分离度Rs达2.17.     

高效液相色谱法测定帕布昔利布含量

为建立帕布昔利布(PD)含量测定方法,采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent HC C_(18)(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(二者体积比为300∶700,含0.1%(体积分数)三氟乙酸),流速为1.0 mL/min,按照等度洗脱,进样量为10μL,检测波长为234nm,柱温为40℃。结果表明:主药与各杂质之间分离度良好;帕布昔利布质量浓度在50~150μg/mL范围内与峰面积线性关系良好,r为0.999 5;仪器精密度、中间精密度、稳定性试验的RSD值小于2.0%;帕布昔利布回收率为100.0%,RSD值为0.8%(n=9)。本方法可以准确快速测定PD含量,有效排除其他外界因素的影响,为帕布昔利布原料药含量测定提供新的参考。     

青枯雷尔氏菌HPLC分析中色谱分离条件的研究

研究了在青枯雷尔氏菌的高效离子交换色谱(HPLC)分析中,不同色谱分离条件对分离效果的影响.建立了在室温下分离青枯雷尔氏菌的最佳色谱条件:采用Toyopearl SuperQ-650C强阴离子交换树脂、0.02mol/L哌嗪-HCl缓冲液(pH 8.0)、洗脱盐浓度为1 mol/L NaCl、洗脱梯度0~75%/30 min、流速1 mL/min.在该色谱条件下,可获得良好分离的3个青枯雷尔氏菌色谱峰.     

Quantification of mRNA by RT-competitive-PCR and high performance liquid chromatography

The use of RT-competitive-PCR with high performance liquid chromatography (HPLC) detection to quantify the absolute number of mRNA copies in mammalian cells is reported. As an example, the glutathione transferase (GST)-α mRNA in human hepatoma Hep G2 cells has been estimated. A PCR-generated internal standard was used as a competitor, co-amplified with the GST-α target sequence. The RT-competitive-PCR method was improved by designing target and competitor molecules which differed in only 30 base pairs. This allowed the two sequences to be co-amplified with the same efficiency. This improvement also facilitated a wider ratio to be used than previous methods (target:competitor ratio between 0.2 and 5). Products were baseline separated by HPLC using an ion-exchange column readily quantified at 260 nm. To validate the improved methodology, the effect of a known GST-α inducer, the anticancer drug oltipraz, was shown to induce GST-α mRNA up to 3-fold in Hep G2 cells. The RT-competitive PCR-HPLC method provides a reliable and sensitive way to quantify the amount of specific mRNA with 0.1 ng of total RNA.     

高效液相色谱的使用与维护

介绍了高效液相色谱的组成和液相色谱的适用范围.阐述了流动相、色谱柱、检测器等仪器的使用技术、应用以及日常维护.为液相色谱的初学者提供了一些液相色谱的知识和管理经验.     

RP-HPLC法分析罗红霉素含量

目的建立用RP-HPLC法分析罗红霉素药物含量的方法。方法以安捷伦ZORBAX Eclipse XDB—C18柱为色谱柱、乙腈（0．010moL／L）醋酸铵缓冲液（体积比70：30,pH=6．5）为流动相,选择220nm为检测波长;柱温40℃,用反相高效液相色谱法测定罗红霉素（Roxithromyein,RM）的含量。结果罗红霉素的浓度在1．150～100．8mg,／L范围内与峰面积呈良好线性关系,r=0．99977,平均回收率为99．57％,相对标准偏差为1．23％（n=5）。结论该方法操作简单、快速,可用于罗红霉素含量的测定。     

高效液相色谱法检测鸡蛋中的三聚氰胺

建立了高效液相色谱法检测鸡蛋中三聚氰胺的方法。样品用1%三氯乙酸和2.2%乙酸铅超声提取。色谱柱为HypersilODS100×4.6mm,5μm;流动相为乙腈:辛烷磺酸钠离子对试剂(pH=3)=15:85(V/V);流速为1mL/min;检测波长为210nm;柱温为40℃。三聚氰胺在0.2μg/mL～10μg/mL范围内,有良好的线性关系。在空白样品中添加0.2μg/mL、0.4μg/mL、1.0μg/mL三个质量浓度的标准工作液,回收率在82.0%～104.0%,相对标准偏差为6.81%(n=9)。     

RP-HPLC法分析罗红霉素含量

目的 建立用RP-HPLC法分析罗红霉素药物含量的方法.方法 以安捷伦ZORBAX Eclipse XDB-C18柱为色谱柱、乙腈(0.010mol/L)醋酸铵缓冲液(体积比70:30,Ph=6.5)为流动相,选择220nm为检测波长;柱温40℃,用反相高效液相色谱法测定罗红霉素(Roxithromycin,RM)的含量.结果 罗红霉素的浓度在1.150-100.8 mg/L范围内与峰面积呈良好线性关系,r=0.99977,平均回收率为99.57%,相对标准偏差为1.23%(n=5).结论 该方法操作简单、快速,可用于罗红霉素含量的测定.