爪蟾胚胎发生中角蛋白的表达

本文应用二株抗角蛋白单克隆抗体(MAb D10为抗爪蟾角蛋白,MAb AF5为抗人角蛋白)对爪蟾卵母细胞、受精卵、不同发育期胚胎作免疫转移印迹观察,研究其角蛋白多肽亚单位的组成。发现不同发育期胚胎角蛋白表达有变化。同时应用免疫组织化学染色技术研究角蛋白在胚胎中的分布。发现角蛋白分布于表皮、脊索、嗅板、垂体原基、粘腺、咽上皮、神经管内表面等部位。     

视黄酸对热带爪蟾胚胎致畸效应的表型特征

取典型的胚胎致畸剂——全反式视黄酸对热带爪蟾(Xenopus tropicalis)胚胎进行24,36和48 h暴露.结果表明,2,10和50 μg·L^-1视黄酸暴露对胚胎的存活率没有影响,对胚胎的生长和发育却有明显的抑制作用,并导致所有胚胎出现畸形现象,说明视黄酸对热带爪蟾胚胎具有极强的致畸性,同时显示了热带爪蟾胚胎对视黄酸的敏感性.视黄酸主要引起胚胎脑部缩小、眼睛色素减少、围心腔水肿和尾巴弯曲等多种畸形类型. 24,36和48 h后,暴露组脑部畸形指数和眼睛畸形指数较对照组均有明显增加,并表现出较好的浓度-效应关系,而时间-效应关系不明显,表明视黄酸对脑和眼部的影响主要发生在暴露的前24小时;48 h后尾部的畸形指数相对于24 h有明显的升高.将视黄酸导致的胚胎畸形类型与污染物三丁基锡对比,表明视黄酸致畸特征图谱在三丁基锡致畸机制的研究中有重要的参考价值.由此可见,有可能将FETAX实验发展为一种基于致畸机制的发育毒性检测方法.     

爪蟾卵母细胞中核酸—蛋白质的相互作用

已知爪蟾中编码核糖体蛋白Ｌ１的基因是在转录后被调节的；第三内含子能从前体ｍＲＮＡ以两种可选择的方式被剪裁下来，结果导致Ｌ１ｍＲＮＡ的产生或释放出一种小的核仁ＲＮＡ（Ｕ１６）。通过卵母细胞的显微注射，对剪接复合物的形成进行了活体研究，证明了剪接体的装配在Ｌ１的第三内含子上受到了损害，而剪接效率低的原因是由于存在次等的同感序列。对核内不均一的核内核蛋白体（ｈｍＲＮＰ）的分布也进行了分析，揭示了核内不均     

运用爪蟾变态实验检测镉的甲状腺激素干扰效应

将NF51阶段非洲爪蟾(Xenopus laevis)蝌蚪暴露于Cd2+浓度为0.01,0.1和1mg.L-1的溶液中21d,观测Cd2+对爪蟾的生长、变态和甲状腺组织结构的影响.1mg.L-1Cd2+暴露组爪蟾蝌蚪与对照组相比,7d后,平均体重减少了0.39倍,体长和后肢长分别减少了0.17倍和0.27倍,发育阶段稍有延缓;21d后,1mg.L-1Cd2+暴露组爪蟾蝌蚪后肢长减小了0.11倍,延缓了1个发育阶段.其余各浓度组在7d和21d暴露后,体重、体长、后肢长和发育阶段与对照组无显著差异.21d后,Cd2+各浓度组甲状腺组织结构出现滤泡数目减少、胶质减少甚至空泡化等现象,1mg.L-1Cd2+暴露组甲状腺滤泡之间还出现溶通现象.结果表明CdCl2具有甲状腺激素干扰效应,并可能是由于该化合物直接作用于甲状腺组织引起.由此可见,爪蟾变态实验可以有效检测重金属盐的甲状腺激素干扰效应.     

非洲爪蟾卵母细胞内的螺旋钙波和靶波

该文应用定态线性化的Atri模型方程，描述非洲爪蟾(Xenopus Laevis)卵母细胞内钙波的生成和演化。在忽略细胞边界影响的近似下，得到了爪蟾卵母细胞内螺旋钙波和靶波的解析解。对于远离细胞中心的渐近情形，对应的螺旋波为Archimede型。由此得到的波速、波长和周期均与实验和数值模拟结果吻合。并指出IP3R失活常数必须大于2．43s，才能产生胞内周期钙波。     

野木瓜注射液对爪蟾坐骨神经传导的影响

野木瓜注射液（Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎｓｔａｕｎｔｏｎｉａｅ，ＩＳ）涂布于脊爪蟾（ＸｅｎｏｐｕｓＬａｅｖｉｓ）坐骨神经４ｍｍ长的一段上．电刺激跗部皮肤，记录半膜肌肌电．１０％ＩＳ使肌电的潜伏期和问期分别延长（１．５１±１．１５）ｍｓ和（２６．６±１６．１）ｍｓ（Ｐ＜０．０１，ｎ＝９）；５０％ＩＳ则使潜伏期延长（２．８４±２．１８）ｍｓ和幅度下降到原来的０．２１±０．２６（Ｐ＜０．０１，ｎ＝７）．ＩＳ对神经传导的阻滞作用是量效关系，给药８ｍｉｎ后电刺激坐骨神经干能使已受５０％ＩＳ影响而刺激跗部皮肤几乎不再引起肌电的半膜肌产生同对照一样的肌电．这表明在给药期内５０％ＩＳ主要阻滞传入纤维的传导，而不影响传出纤维的功能．     

唑草酮对斑马鱼和非洲爪蟾的急性毒性评价

为了探究除草剂唑草酮对鱼类和两栖类生物的环境毒性效应。在实验室模拟试验系统内,利用斑马鱼和非洲爪蟾蝌蚪测试了95%唑草酮原药的急性毒性,并评价其毒性等级。结果显示,95%唑草酮原药对斑马鱼、非洲爪蟾的急性毒性96 h-LC₅₀分别为4.40 mg/L、7.14 mg/L,毒性等级均为中等。95%唑草酮原药对两种试验生物均具有中等毒性,表明唑草酮暴露后可能引起造成鱼类和两栖类生物的毒性危害,在两栖类生物丰富或自然保护区域应避免使用。产品于使用后应注意加强田水管理,避免溢入水体;同时应避免器具、外包装直接接触水体,以减轻鱼类和两栖类生物的暴露风险。     

三丁基锡对热带爪蟾蝌蚪甲调基因mRNA表达的影响

用三丁基锡( TBT)对热带爪蟾(Xenopus tropicalis)NF51阶段蝌蚪进行48 h和96 h暴露.结果显示,50 ng·L-1和200 ng·L-1 TBTCl暴露对胚胎的存活率没有影响.50 ng·L-1TBTCl暴露组TRβ和DI 3 mRNA在蝌蚪尾巴中的表达比对照组增加了1～2.3倍.200 ...     

模式生物——爪蟾在生物医学上的应用

随着生物医学的发展，模式生物——爪蟾研究系统在生物医学研究领域的应用越来越广泛.与其他模式生物相比，模式生物——爪蟾具有许多不可比拟的优点，适合建立多种人类疾病模型进行疾病发病机制和治疗等相关研究；还可以结合生物信息学分析进行高通量药物筛选及药物开发等研究；另外在发育生物学和基因功能研究方面也发挥重要作用.因此，爪蟾已经成为生物医学研究中的一种重要的模式生物，在医学基础及临床研究和药物筛选等研究领域中占有非常重要的地位.文中综述了爪蟾作为模式生物在生物医学研究中发挥的作用.     

运用热带爪蟾胚胎检测黑臭河道底泥的生态毒性

2010年9月~12月,在温州山下河（S）和九山外河（J）先后采集底泥样品5次.将热带爪蟾胚胎（NF10—NF11）暴露于1〖DK〗∶4底泥提取液（第1—4次）和间隙水（第5次）中48 h,观测其发育状况.结果表明,山下河S1样点连续5次的底泥样品均导致胚胎全部死亡,表现出很强的毒性.暴露于山下河底泥提取液的胚胎体长均显著短于空白对照组,而暴露于九山外河底泥提取液的胚胎体长仅第3次显著短于空白对照组.暴露于山下河底泥提取液的胚胎畸形率均高于暴露于九山外河底泥提取液的,尤其在第4次检测中,暴露于S2-S4底泥提取液的胚胎畸形率均高达100%,而九山外河最高仅为70%（J2）和40%（J1）.热带爪蟾胚胎直接暴露于所有采样点的山下河底泥间隙水均全部死亡.由此可见,山下河的整体毒性高于九山外河,底泥间隙水毒性高于底泥提取液.本研究表明,温州市典型的黑臭河道底泥对爪蟾胚胎的发育均有不同程度的影响,具有明显的生态毒性.同时,运用爪蟾胚胎可以有效地检测底泥的毒性效应,而且对不同河流和采样点的毒性评价具有较好的区分度.     

全氟辛磺酸对于爪蟾的甲状腺激素干扰效应

运用两栖类变态实验(AMA)研究了全氟辛磺酸(PFOS)对于非洲爪蟾(Xenopus laevis)蝌蚪的生长、变态和甲状腺组织结构的影响.结果显示,与对照组相比,7d后,10,50和250μg.L-1PFOS暴露组蝌蚪的后肢长分别减小了17%,11%和18%,蝌蚪的发育延缓了1~2个阶段;19d后,10,50和250μg.L-1PFOS组蝌蚪的体重分别增加了17%,10%和20%,体长分别增加了5%,4%和6%,而10μg.L-1和250μg.L-1PFOS组蝌蚪的后肢长分别减小了12%和13%;暴露组甲状腺组织结构出现滤泡数目减少、上皮细胞增生、胶质减少甚至滤泡溶通等现象.结论是,在本实验浓度下,PFOS对于非洲爪蟾的蝌蚪生长有促进作用,对于变态发育过程却有抑制作用.参照AMA的方法,可以判断PFOS为抗甲状腺激素干扰物.     

Application of Xenopus laevis in ecotoxicology (I)—Introduction and quality control of laboratory animal

The aim of the series of papers is to discuss the application of Xenopus laevis, as model animal in biology, in ecotoxicology. X. laevis as model animal is wildly used in biological study and has provided a lot of relating data because of many advantages, such as living in water and being easily maintained, laying eggs in the whole year, and externally fertilizing and developing. Embryos and larvae of X. laevis like other amphibians are directly exposed in the aquatic environment and sensitive to pollutants. In addition, sex differentiation and sex organ development of X. laevis are sensitive to sex hormones and endocrine disruptors with sex hormone activities, which enable X. laevis to be used in studies on sex hormone disruption and reproductive toxicity of endocrine disruptors. Metamorphic development of X. laevis is very sensitive to thyroid hormones and thyroid disruptors, which enables X. laevis to be used for evaluating thyroid disruptors. Also, X. laevis ecotoxicology can be linked with amphibian population declines and malformed frog occurrence, being one of the hotspots in ecology. Thus, more and more laboratories have introduced X. laevis to ecotoxicological study. The quality of laboratory animals correlates with scientificity and reliability of results from animal experiments. It is especially important for toxicology. Quality control of X. laevis involving several factors such as water and food is discussed in this paper.     

三丁基锡对非洲爪蟾甲状腺组织结构的影响

幼龄非洲爪蟾（Xenopus laevis）暴露于低浓度三丁基锡（25 ng&;#8226;L^-1TBTCl）中2个月,运用组织学切片的方法观测甲状腺组织结构的变化.结果表明,TBT暴露1个月能引起爪蟾甲状腺滤泡胶质减少甚至空泡化,暴露2个月后,甲状腺滤泡的变形率也显著增加,相对甲状腺横截面积和滤泡面积仅为平行对照的35.3%和45.6%,而滤泡数目没有明显变化.空白组和暴露组均未观察到明显的滤泡上皮增厚或肥大等现象.由此可见,甲状腺萎缩是由于滤泡面积减小而不是滤泡数目减少所引起的;滤泡中胶质的减少和变形等与常见的滤泡上皮代偿性增生或肥大无关.所用低浓度的TBT能对爪蟾甲状腺组织结构造成严重损伤,TBT可以被认定为一种环境甲状腺激素干扰物.     

理县湍蛙的年龄结构初探

用骨龄学方法对50只理县湍蛙(雌蛙30只和雄蛙20只)的年龄结构与身体大小的关系进行了初步研究.结果表明骨龄学方法对理县湍蛙的年龄鉴定非常有效,个体的趾骨切片均有明显的年轮线(LAGs).雌蛙的平均年龄为4.7±1.6岁,年龄范围为2-9岁,雄蛙的平均年龄为3.8±1.2岁,年龄范围为3-7岁.雌蛙明显长于雄蛙,雌蛙体长为68.9±4.2mm,体长范围为60.40-74.88 mm,雄蛙体长为50.7±4.3 mm,体长范围为42.1-56.3 mm.     

热带爪蟾胚胎对三丁基锡致畸作用响应的敏感时期

采用200 ng·L-1氯化三丁基锡对热带爪蟾(Xenopus tropicalis)胚胎进行第1天、第2天、第3天和3d全暴露实验.结果表明,第3天和3d全暴露组胚胎的存活率比对照组分别降低了10％和20％,第2天、第3天和3d全暴露组的体长分别减少了30％、20％和39％.暴露组胚胎畸形率均在90％以上,畸形类型主...     

长白山林区中国林蛙体内寄生虫感染情况调查

通过解剖镜检分析了长白山地区中国林蛙寄生虫的感染情况.结果表明:长白山林区中国林蛙寄生虫为线虫3种(Rhabdia bufonis、Cosmocercella sp、Oswaldocru sp)、吸虫3种(Rowsbiella tineri、Pelystoma integerimrn、Pelystoma ocellatrm),分别隶属5科5属;其主要感染肺线虫Rhabdia bufonis和肠道寄生虫Oswaldocru sp,感染率和感染强度分别为56.66%、4.87和67.33%、9.25;不同种类寄生虫在长白山林区林蛙体内分布有一定规律,不同种类寄生在适宜自身的生态环境中,表现出寄生部位及感染寄生虫的专一性;长白山林区林蛙寄生虫的感染率和强度随年龄增加而增大,不同地点中国林蛙的寄生虫感染率及感染强度普遍较高,不同地点不同种类寄生虫的感染率及强度存在差异;雌、雄林蛙体内寄生虫感染情况差异不显著(P>0.05).     

聚乙烯醇生物相容性的研究

甲醛和戊二醛与聚乙烯醇(PVA)形成缩醛化聚乙烯醇膜，再将肝素键合到聚乙烯醇上形成肝素化聚乙烯醇膜(H—PVA)，生物相容性测试表明，涂层具有显著的抗凝血性和良好的组织相容性；在血液凝固实验中导管凝血时间可达到3h，而空白组(医用聚氯乙烯)凝血时间在lh以内；活性部分凝血时间(APTT)试验表明接枝肝素后的缩醛化聚乙烯醇中没有肝素游离到血液中；在成纤维细胞的增殖试验表明细胞生长情况良好。     

Meso(4-磺基苯)卟啉(TPPS4)的极谱行为研究

研究了TPPS4的极谱伏安行为,结果表明:在底液为pH=7.18的NaH2PO4-Na2HPO4缓冲液中,TPPS4在-0.67V(vs.SCE)处有一个稳定而灵敏的还原峰,其峰电流与TPPS4浓度在1×10-7～9×10-6mol/L范围内有良好的线性关系(相关系数r=0.9983,0.9999),检测限LOD为3×10-8mol/L.标准回收率在96.17%～102.3%之间,精密度较好,RSD为0.56%(n=5),可望用于定量分析.此外,还对电极反应的机理进行了探讨.另外,通过研究峰电流与扫描速度的关系,可以定性地判断TPPS4与各种环糊精包结能力的大小.