鲍鱼性腺小肽的制备及抗氧化活性的初步研究

以雄性皱纹盘鲍性腺为原料,建立了蛋白酶酶解制备抗氧化活性蛋白肽的工艺条件.分别对木瓜蛋白酶和中性蛋白酶进行单因素研究,并以二者的复合酶为工具酶进行响应面分析.结果显示,雄性鲍鱼性腺的最优酶解条件为木瓜蛋白酶与中性蛋白酶的比例为1∶4、pH=6.6、酶解温度为53.7℃、酶解时间为70.4 min.高效液相色谱(HPLC)分析结果表明,酶解液中多肽的分子质量主要分布在1 ku以下.制备的酶解液具有较强的清除自由基效果,清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)的EC50值为6.8 mg/mL,还原力的AC0.5值为12.87 mg/mL.     

印度块菌粗多糖的提取及抗氧化活性研究

采用正交试验研究了热水浸提法提取印度块菌(Tuberindicum Cooke&Massee)子实体粗多糖(TICP)的最优工艺,根据方差分析结果确定了热水浸提法的最优工艺为:料液比1∶15,提取时间120 min,提取温度100℃,提取2次,多糖提取率为6.790 2%.用95%乙醇对粗多糖进行醇沉,然后利用总抗氧化能力(T-AOC)测定法、羟基自由基(OH.)清除法、铁离子螯合能力及测定还原能力等方法对上述印度块菌粗多糖的抗氧化活性进行评价,结果显示块菌粗多糖对羟基自由基的清除活性最高,其EC50值为0.26 mg/mL,其次为还原能力和铁离子螯合能力,其EC50值分别为1.15 mg/mL、2.80 mg/mL,同时块菌粗多糖具有较好的总抗氧化能力(T-AOC),当浓度为20 mg/mL时,其总抗氧化能力为72.06 U/mL.     

不同提取方法对姬菇多糖抗氧化活性的影响

本研究采用传统水提法、超声波提取法、超声波辅助水提法、酸提法、碱提法、超声波辅助酸提法和超声波辅助碱提法7种方法提取姬菇多糖,测定还原力、羟自由基(·OH)清除率、超氧阴离子自由基(O_2~-·)清除能力、DPPH自由基清除力作为体外抗氧化作用的评价指标,并与Vc对照.结果表明酸法提取多糖得率最高,可达6.58%.总体来看,超声波辅助水提法所得姬菇多糖的抗氧化活性最好,多糖浓度为10 mg·m L~(-1)时其还原力达到2.18,·OH清除率为95.56%;多糖浓度为1 mg·m L~(-1)时,O_2~-·的清除率达到62.35%;多糖浓度为2 mg·m L~(-1)时,对DPPH自由基的清除率达到80.32%.超声波辅助碱提法所得多糖的抗氧化活性也较好,而超声波辅助酸提法所得多糖的抗氧化活性最差.由此可见,采用超声波辅助水提法所得多糖有利于姬菇多糖生物活性方面的研究.     

紫苏籽抗氧化肽的制备工艺研究

采用碱提酸沉法从紫苏籽粕中提取蛋白质,进行蛋白酶筛选,发现紫苏籽蛋白经碱性蛋白酶酶解后有最好的抗氧化活性和水解度(DH).在单因素试验的基础上,采取响应面分析方法,并建立数学模型,确定最佳酶解工艺.试验结果表明:各因素影响紫苏籽粗蛋白酶解液DPPH自由基清除率的主次顺序是:加酶量酶解时间pH值,最佳条件是:加酶量3 000 U·g~(-1),酶解时间5.00 h,pH值9.80,温度50℃,此时DPPH自由基清除率为73.64%,说明紫苏籽蛋白质酶解多肽拥有很高的抗氧化活性.     

正交实验优化虎眼万年青多糖提取工艺及抗氧化活性评价

本文对虎眼万年青粗多糖的提取工艺及体外抗氧化活性进行了研究。通过单因素试验考察了溶剂原料比、提取温度、提取次数及提取时间对粗多糖提取得率的影响。采用正交试验(L9(34))优化得到最佳提取工艺参数:溶剂原料比20 mL.g-1,提取温度90℃,提取时间3h,提取4次。并通过对有机自由基、羟基自由基和超氧自由基的清除活性评价粗多糖体外抗氧化活性,结果显示得到的粗多糖具有很高抗氧化活性,可以探索作为天然抗氧化剂应用于药品或功能食品。     

复合酶法提取蕨麻多糖及其抗氧化活性研究

确定了复合酶(纤维素酶、果胶酶、中性蛋白酶)提取蕨麻多糖的最佳工艺,并对其体外抗氧化活性进行初步研究.在单因素试验的基础上,设计L9 (33)正交实验和L9(34)正交实验,分别得出复合酶的最佳配比和复合酶法提取蕨麻多糖的最佳提取工艺条件;采用清除·OH(羟基)自由基模型和O2-·(超氧阴离子)自由基模型评价了蕨麻多糖的抗氧化能力.结果表明:复合酶的最佳配比为:纤维素酶2.0％,木瓜蛋白酶1.0％,果胶酶2.0％;最佳工艺条件为∶料液比为1∶30、pH值为4.5,温度为45℃,酶解时间为60min,此时蕨麻多糖的提取率最大为8.12％,同时验证性实验也表明优化得到的提取工艺稳定可靠;蕨麻多糖对羟基自由基和超氧阴离子都具有较强的清除作用,并与浓度呈一定依赖关系,且对羟自由基的清除能力要比超氧阴离子自由基的清除能力强.     

花生分离蛋白复合酶水解工艺优化研究

探讨了超声波辅助前处理对花生分离蛋白复合酶解的影响,比较了碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶等六种蛋白酶解物清除DPPH自由基的效果,确定碱性蛋白酶和胰蛋白酶较佳的复合比例为8∶2.在此基础上,开展响应面优化试验,以DPPH自由基清除率和水解度为指标,探讨复合酶与风味蛋白酶酶解的较佳工艺参数,并分析DPPH清除率和水解度相关性.实验结果表明,复合蛋白酶制备花生分离蛋白抗氧化肽的较佳酶解工艺为pH 8.5,温度49.36℃,酶添加量(E/S,质量分数m/m)3.40%,酶解时间203.59 min.     

尖吻蝮蛇毒不同蛋白酶水解物的制备及抗氧化活性研究

【目的】研究尖吻蝮(Deinagkistrodon acutus)蛇毒的不同蛋白酶水解产物的制备及抗氧化活性。【方法】分别用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶水解尖吻蝮蛇毒,以水解物的水解度、清除自由基活性、金属离子螯合能力和总还原力作为抗氧化活性比较指标来选出最佳水解蛋白酶,并比较该蛋白酶水解物在超滤后得到的不同分子量组分的抗氧化活性大小。【结果】碱性蛋白酶水解物的清除DPPH自由基活性、亚铁离子螯合能力和总还原力均为最佳;该酶解物经超滤得到的3个组分中,分子量为3～10kDa的组分对DPPH自由基和羟基自由基清除能力最强,分子量大于10kDa的组分的亚铁离子螯合能力和总还原力最强。【结论】尖吻蝮蛇毒的不同蛋白酶水解物均具有抗氧化活性,其中用碱性蛋白酶水解物抗氧化活性较强。     

藏红花花瓣粗多糖的体外抗氧化活性研究

采用水提醇沉法提取藏红花花瓣中的多糖,得率为3.75%.联合蒽酮-硫酸法和DNS法测得多糖纯度为68.34%.对粗多糖的体外抗氧化活性进行测定,结果表明,粗多糖具有一定的抗氧化活性,抗氧化能力指数(ORAC)值为0.572μmol TE/mg;其对ABTS+、DPPH和羟自由基具有一定的清除能力,半数清除浓度EC50分别为76.26μg/mL、165.5μg/mL和880.4μg/mL.     

文蛤蛋白水解制备抗氧化活性肽的研究

以文蛤蛋白为原料,通过蛋白酶水解制备抗氧化活性肽.利用体外清除DPPH活性评价酶解产物的抗氧化活性,采用超滤、葡聚糖凝胶柱层析和HPLC对相应的活性肽进行分离纯化,通过HPLC-MS进行结构鉴定.结果表明:木瓜蛋白酶水解产物的DPPH清除活性明显高于碱性蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶和复合蛋白酶,产物质量浓度为1 mg·mL-1时,DPPH清除率为55.74%;以DPPH清除率为筛选指标,对木瓜蛋白酶酶解产物进行逐级分离,得到4个具有抗氧化活性的目的肽段,氨基酸序列分别为LNFNLEKSR(1120.3 u)、SWLRPR(814.4 u)、RIGNIISQY(1063.3 u)和LNFNLEK(877.2 u).     

纤维素酶辅助提取茶多糖的工艺研究

以茉莉花茶为原料,通过添加冠突散囊菌(俗称"金花")发酵液制备了"金花"茉莉花茶;采用纤维素酶辅助提取"金花"茉莉花茶中的茶多糖(teapolysaccharide,TPS),并通过单因素和正交试验研究酶解时间、酶解温度、酶添加量对"金花"茉莉花茶中茶多糖提取效率的影响,获得了最佳提取工艺条件;进一步用1,2-二苯基-2-苦肼基(DPPH)考察了"金花"茉莉花中的茶多糖对DPPH自由基的清除作用.结果表明:当酶解时间为120 min,酶解温度为50℃和酶添加量为3%时,从"金花"茉莉花茶中提取茶多糖的效率最高,达104.25 mg/g;在抗氧化活性方面,相对于从茉莉花茶中提取的茶多糖,从"金花"茉莉花茶中提取的茶多糖对DPPH表现出了更好的清除作用.     

十种微藻粗多糖的抑菌作用及海水小球藻粗多糖的抗氧化活性

采用滤纸扩散法研究10种微藻粗多糖对细菌和真菌的抑菌作用,对抑菌作用明显的微藻粗多糖提取物,进一步研究其抗氧化活性.结果表明:10种微藻粗多糖提取物中,海水小球藻(Marine chlorella vulgaris)的粗多糖提取物抑菌能力最好,其粗多糖提取物对大肠杆菌(Escherichia coli)、藤黄八叠球菌(Micrococcus luteus)、假丝酵母(Monilia albican)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的抑菌圈直径分别达13.0、8.0、11.0、10.0,mm.进一步研究其抗氧化活性,1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除能力最高为61.2%,,超氧阴离子清除能力最高达到74.47%,,羟基自由基清除能力最大为75.37%,,抗脂质过氧化能力最高达74.32%,.     

酶解时间对罗非鱼鱼皮胶原蛋白酶解物抗氧化活性的影响

为了探究酶解时间对罗非鱼鱼皮胶原蛋白酶解物抗氧化活性的影响,采用酸法提取罗非鱼鱼皮胶原蛋白,胃蛋白酶酶解3、6、9、12和24 h制备酶解物,进行紫外光谱扫描,水解度测定,以DPPH·、·OH和O2?·清除率为指标评价抗氧化活性.结果表明:最大紫外吸收峰相似,水解度与酶解时间呈正相关;9 h酶解物对三种自由基清除效果最...     

酶解鲭鱼罐头蒸煮液制备生物活性肽

以鲭鱼罐头蒸煮液为研究对象,从风味蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶中筛得最佳酶为风味蛋白酶,通过单因素实验和正交试验确定风味蛋白酶的最佳酶解工艺为:5 g底物(即5 m L蒸煮液)、加酶量28.6 mg/m L、时间5 h、p H值6.0、温度50℃.按最佳工艺条件酶解,并经小分子电泳分析,证明蒸煮液主要蛋白被风味蛋白酶高效酶解;所得生物活性肽酶解液具有较好的抗氧化活性,其DPPH自由基清除活性的IC50值为31.35 mg/m L;羟自由基清除活性的IC50值为9.807 mg/m L;还原力的IC50值为7.019 mg/m L.     

海洋微藻裂壶藻发酵液胞外多糖的制备及活性研究

使用乙醇沉淀法从海洋微藻裂壶藻Schizochytrium sp.TIO1101的发酵液中提取胞外多糖,再经732阳离子交换树脂分离得到酸性多糖、弱碱性多糖和碱性多糖三种主要的多糖组分,并分别测定其还原力活性、DPPH自由基清除活性和羟基自由基清除活性等抗氧化活性和抗菌活性.结果表明,弱碱性多糖具有最高的抗氧化活性.抑...     

龙井茶叶多糖的再认识及其结合物的抗氧化活性研究

对龙井茶叶多糖及其结合物的抗氧化和清除自由基活性开展研究。采用水提醇沉法提取龙井茶叶多糖,经除蛋白和纯化后得到精制多糖(LP),将LP在三氟乙酸条件下水解完全,经C18柱层析分离后得到水洗脱部分(LP-HCW)和甲醇洗脱部分(LP-HCM),利用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法和普鲁士蓝法测定LP、LP-HCM和LP-HCW的清除自由基和抗氧化能力。结果显示:LP、LP-HCM和LP-HCW的DPPH自由基清除率分别为38.49%,59.48%和24.81%;还原力指数分别为0.062,0.036和0.030。实验证明:龙井茶叶多糖及其结合物均有较强的药理作用,具有清除自由基和抗氧化活性。     

新疆芍药与窄叶芍药根中多糖含量测定及体外抗氧化活性的研究

为探讨新疆芍药和窄叶芍药根中多糖的含量并评价其多糖体外抗氧化活性。采用水提醇沉法提取多糖,用Sevage法除蛋白、活性碳脱色,并用苯酚-硫酸比色法测定多糖的含量;并采用1,1-二苯基-2-硝基苯肼自由基清除法(DPPH法)和2,2-联氮基-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐自由基清除法(ABTS法)对提取的多糖进行体外活性评价。结果显示:纯化后窄叶芍药和新疆芍药的多糖含量达0.82%和0.78%;窄叶芍药和新疆芍药多糖对DPPH自由基的IC50分别为0.07 mg/m L和0.13 mg/m L;而两者对ABTS自由基的IC50分别为0.075 mg/m L和0.096mg/m L。由此可知,本文建立的测定多糖含量的方法简便、准确、重现性好;且窄叶芍药和新疆芍药对清除DPPH与ABTS自由基均具有一定抗氧化活性。     

红景天多糖的提取及体外抗氧化活性研究

目的优化红景天多糖的制备工艺,并系统评价红景天多糖清除自由基的能力.方法采用正交设计方法优化红景天多糖提取工艺,以多糖提率为考察指标,比较不同固液比、提取温度、提取时间、提取次数对多糖提取效果的影响;通过反复冻融、透析及酶-sevag联合脱蛋白法,纯化制备红景天多糖(RSP);采用苯酚-硫酸法、红外色谱仪及紫外-可见分光光度计对红景天多糖的基本理化性质进行表征;利用体外抗氧化模型评价红景天多糖对1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH·)、羟基自由基(·OH)和超氧阴离子(O_2~-·)自由基的清除能力.结果红景天多糖的最佳提取条件固液比为1∶20,提取温度为90℃,提取时间为3 h,提取次数3次.此外,红景天多糖对DPPH·和·OH具有较好的清除能力.结论成功确立红景天多糖的最佳提取工艺,红景天多糖具有一定的抗氧化作用.     

开口箭多糖含量测定及生物学活性研究

采用水提醇沉法提取开口箭多糖,三氯乙酸法除蛋白,蒽酮-硫酸法测定多糖含量。在体外抗氧化模拟条件下研究开口箭粗多糖对羟自由基(.OH)、过氧化氢(H2O2)和二苯代苦味酰肼基自由基(DPPH.)的清除作用,细胞培养板液体稀释法测定开口箭多糖的抑菌作用。研究结果表明:开口箭多糖含量为3.7%,粗多糖具有一定的清除.OH、H2O2和DPPH.能力,其中对H2O2具有较强的清除作用。与Vc为对照,开口箭多糖的抗氧化能力不同程度的弱于Vc。开口箭多糖对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、枯草芽胞杆菌和白假丝酵母菌4种供试菌株均有较好的抑制作用,且粗多糖的抑菌杀菌作用强于去蛋白多糖。研究表明,开口箭多糖具有很好的抗氧化活性和较强的抑菌杀菌活性。     

复合酶法优化毛竹笋壳多糖提取工艺及其抗氧化活性研究

为研究复合酶法提取毛竹笋壳多糖的最优工艺,在单因素试验的基础上,以多糖得率为响应值,利用响应面优化法对酶添加量、酶解时间和酶解温度进行优化,以确定其最佳工艺条件。用Sevag试剂法对提取的多糖进行纯化,并对其单糖组成、抗氧化活性进行研究。结果表明,复合酶法提取毛竹笋壳多糖的最优工艺参数为:复合酶添加量1.6%,酶解时间105 min,酶解温度51℃。在最优条件下多糖得率为1.98%,与模型预测值的相对误差为2.94%。主要单糖组分半乳糖醛酸、半乳糖、木糖、阿拉伯糖的摩尔比为15.35∶32.82∶6.45∶39.13。采用体外抗氧化体系评价毛竹笋壳多糖的抗氧化效果,发现其具有良好的抗氧化活性,清除DPPH自由基和羟自由基的能力均表现出一定剂量效应。