凡纳对虾体内ACP、AKP酶的细胞化学定位

运用电镜酶细胞化学技术对凡纳对虾体内肝脏(L)、肌肉(M)、心脏(H)和复眼(E)等四种组织的酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)进行了细胞化学定位,并与感染病毒的凡纳对虾四种组织中ACP、AKP的细胞化学定位进行比较.结果显示,在健康的对虾体内,ACP依次出现在各组织中的溶酶体、细胞核、细胞内膜、线粒体、内质网以及肝脏组织中的部分脂滴周围及微绒毛中AKP依次出现在各组织中的细胞膜、细胞核、溶酶体、内质网以及肝脏组织中的脂滴周围及微绒毛中.感染病毒后,对虾体内组织细胞出现了明显的病理变化,各组织细胞内均出现大量的髓样小体;各组织中ACP,AKP的超微细胞化学定位也发生了明显的规律性变化,表现为相应细胞器内ACP,AKP酶活性均减弱或消失,并在多数组织的细胞质中检测到ACP,AKP酶活性的高电子密度颗粒,且大量出现的髓样小体均呈阳性反应.     

饲料中添加铜对凡纳滨对虾血细胞中酶活的影响

通过在凡纳滨对虾的饵料中添加不同浓度的铜,研究其对血细胞中酶活的影响.试验结果表明,饵料中添加铜的含量对凡纳滨对虾酚氧化酶及超氧化物歧化酶都有一定影响,当基础饵料中添加30~45mg·kg-1铜时,二者的活力最高.当饵料铜过量时对超氧化物歧化酶活力的影响比对酚氧化酶的影响显著.     

长毛对虾碱性磷酸酶功能基因的研究

用对－氯汞苯甲酸修饰该酶分子中的巯基、酶活力不受影响，说明该酶不是“巯基酶”。用Ｎ溴代琥珀酰亚胺修饰酶后，活力完全丧失，修饰后的酶在２７５ｎｍ处的紫外吸收峰完全消失，３４０ｎｍ处荧光发射峰也逐渐下降至完全淬灭，说明色氨酸基是酶活性必需基团之一。     

蝇蛆提高对虾抗杆状病毒感染能力的初步研究1

室内试验表明,投饲蝇蛆起始时间至少需在病毒侵袭前10 d,对对虾起始死亡时间和50%,90%死亡时间才有明显的延缓,分别较对照组延长1.76,3.04,4.1倍;蝇蛆可以显著提高对虾的抗杆状病毒感染能力,激活对虾的酚氧化酶系统.田间试验表明,投喂有蝇蛆的虾池,存活时间平均为64 d,不投喂蝇蛆的对虾,存活时间平均为33.5 d.1993年投喂蝇蛆的虾池平均每天死虾数小于存池量的0.023%,1994年平均每天死虾数占存池数的0.015% ,经PCR检测证实,1993,1994 年对虾中杆状病毒病变的个体仅占1.15%.     

长毛对虾碱性磷酸酶功能基团的研究

用对－氯汞苯甲酸修饰该酶分子中的巯基，酶活力不受影响，说明该酶不是“巯基酶”．用Ｎ溴代琥珀酰亚胺修饰酶后，活力完全丧失，修饰后的酶在２７５ｎｍ处的紫外吸收峰完全消失，３４０ｎｍ处荧光发射峰也逐渐下降至完全淬灭，说明色氨酸残基是酶活性必需基因之一．用甲醛、醋酸酐修饰氨基，溴代乙酸修饰咪唑基也可以使酶活力完全丧失，说明赖氨酸残基及组氨酸残基也是酶活性功能基因．用乙酰丙酮修饰精氨酸残基，酶活力下降了５０％，精氨酸残基可能与维系酶分子构象有关．     

乳链球菌SB900肽聚糖对中国对虾免疫功能的影响

利用注射法研究了乳链球菌ＳＢ９００肽聚糖对中国对虾内环境的影响．研究结果表明ＬＡＢＰＧ经肌肉注射后可激活中国对虾体内的细胞防御体系，对对虾血淋巴中的抗菌、溶菌、酚氧化酶和超氧化物歧化酶几种免疫相关因子具有不同程度的诱导作用．体外实验表明ＬＡＢＰＧ对酚氧化酶原具有一定的激活作用．表明利用ＰＧ提高对虾免疫系统的功能是一条可行的途径．     

蝇蛆提高对虾抗杆状病毒感染能力的初步研究

室内试验表明，投饲蝇蛆起始时间至少需在病毒侵袭前10d，对对虾起始死亡时间和50％，90％死亡时间才有明显的延缓，分别较对照组延长1．76，3．04，4．1倍；蝇蛆可以显著提高对虾的抗杆状病毒感染能力，激活对虾的酚氧化酶系统。田间试验表明，投喂有蝇蛆的虾池，存在时间平均为64d，不投喂蝇蛆的对虾，存活时间平均为33.5d。1993年投喂蝇蛆的虾池平均每天死虾数小于存池量的0．023％，1994年平均每天死虾数占存池数的0．015％，经PCR检测证实，1993，1994年对虾中杆状病毒病变的个体仅占1．15％。     

中国对虾杆状病毒病的初步研究

１９９３～１９９５年中国对虾发生暴发性流行病,经对患病对虾作组织病理学研究和电镜观察,发现此病以消化系统病变更为严重,肝胰腺,胃及肠道上皮层发生变性和坏死,上皮细胞破坏,细胞核肿大;结缔组织发生水肿,血淋巴细胞浸润,在电镜下,病变组织的细胞核内充满一种杆状病毒,大小为２６０～３１０ｎｍ×９０～１１０ｎｍ外被双层囊膜,不形成包涵体,纯化的病毒经负染后在电镜下见到的大多数是病毒核衣壳,大小为２８６ｎｍ     

3种淡水育珠蚌碱性磷酸酶（ALP）比较酶学的初步研究

分别从三角帆蚌、褶纹冠蚌、背角无齿蚌的外套膜中部分提取了一种碱性磷酸酶，并对这３种来源的ＡＬＰ进行了比活力和动力学性质的比较研究，经过相同提纯步骤后，外套膜ＡＬＰ比活顺序是褶纹冠蚌＞背角无齿蚌＞三角帆蚌；三角帆蚌ＡＬＰ作用于底物磷酸苯二钠的最适ｐＨ值为９．４０，最适温度为３７℃，米氏常数Ｋｍ为０．５３ｍ ｍｏｌ／Ｌ；褶纹冠蚌ＡＬＰ的最适ｐＨ值为９．１２，最适温度为４０℃，米氏常数Ｋｍ为１．７２ｍ     

长毛对虾酸性磷酸酶的纯化与性质

分别从健康和患病长毛对虾（Ｐｅｎａｅｕｓｐｅｎｉｃｉｌａｔｕｓ）肌肉提取一种酸性磷酸酶（ＡＣ－Ｐａｅ，ＥＣ．３．１．３．２．），进一步用硫酸铵分级分离，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００柱纯化，经聚丙烯酰胺凝胶电泳，并于ＢｅｃｋｍａｎＤＵ－８Ｂ紫外分光光度计扫描为单一区带酶液。该酶紫外吸峰在２８０ｎｍ处，荧光激发峰在２８４ｎｍ处，发射峰在３４７ｎｍ处。酶的分子量为７３０００道尔顿，等电点为４．７酶水解对硝基苯磷酸二钠（ＰＵＰＰ）最适ｐＨ为４．５，最适温度４０℃。健康虾与病虾酶的活化能分别为４１．０３ｋＪ／ｍｏｌ·Ｌ和４５．７８ｋＪ／ｍｏｌ·Ｌ，米多常数ｋｍ值分别为０．８０×１０－４ｍｏｌ／Ｌ和１．４３×１０－４ｍｏｌ／Ｌ。重金属离子Ｃｕ２＋，Ｈｇ２＋，有机溶剂甲醇，乙醇，乙二醇等对ＡＣＰａｓｅ有明显的抑制作用。     

中国对虾血淋巴抗菌活力的测定

采用溶藻胶弧菌、副溶血弧菌、哈维氏维菌、嗜水气单胞菌对中国对虾血浆样品、血细胞溶解物（ＨＬＳ）样品的抗菌活力进行了测定。表明中国对虾血浆样品对四种细菌均表现出一定的抗菌活力。其中,三种弧菌活细胞数在孵育１ｈ时呈现最低;嗜水气单胞菌活细胞数在孵育４ｈ时最少,在三种弧菌中,血浆样品对哈维氏弧菌表现出的抗菌活力最强,而对副溶血弧菌表现出的抗菌活力最弱。血细胞溶解物样品对三种弧菌几乎没有表现出抗菌活力;嗜     

吲哚乙酸氧化酶和过氧化物酶关系的同工酶研究

用细胞质雄性不育系小麦和普通小麦中国麦与鄂恩１号为材料，用Ｄａｖｉｓ和Ｒｅｉｓｆｅｌｄ不连续聚丙烯酰胺垂直析以凝胶电泳技术进行吲哚乙酸氧化酶和阴、阳离子过氧化物酶同工酶分析，并用ＳＣ９１０型双波段薄层扫描仪进行扫描，记录其谱带数及强弱，结果表明阳离子过氧化物酶同工酶谱与ＩＡＡ－氧化酶同工酶谱十分相似，而阴离子过氧化物酶酶谱相差甚远，由此表明具有吲哚乙酸氧化酶活性位点的过氧化物酶，应主要是阳离子过氧     

铜离子对淇河鲫肝胰脏中3种酶活性影响的研究

本文研究了不同浓度铜离子暴露处理及暴露解除后淇河鲫(Qihe crucian carp)肝胰脏中酸性磷酸酶(ACP),碱性磷酸酶(AKP)和过氧化氢酶(CAT)活性的变化。结果表明:铜离子暴露处理后,随铜离子浓度的升高,与对照组相比,ACP和AKP的活性先升后降,而CAT活性均极显著下降(p<0.01);暴露解除后,3种酶活性在12天内均恢复正常;肝胰脏中的CAT对铜离子比较敏感,因而可作为对铜离子污染的环境指示。     

中国对虾球形病毒的初步研究

用电子显微镜对中国对虾进行病毒的检测，发现一种新的球形病毒，这种病毒直径约80－100nm，具有包涵体，形态上有两种电子密度，球形病毒数量较多，分布在细胞质中，细胞核中没有发现，主要侵染对虾的肠、鳃、肌肉、肝胰腺等组织；宿主细胞的病理变化表现为内质网水种，线粒体内嵴肿胀及局部溶解，酶原颗粒和粘蛋白原变性等；球形病毒与杆状病毒混合感染是对虾爆发流行病的主要病因。     

过氧化物酶催化酚类聚合反应诱导纳米硅球的形成

在高等植物体中硅沉积的部位总伴随着多酚化合物的积累和较高的过氧化物酶活性.为了验证多酚氧化聚合物对硅沉积的诱导作用,避免其他因素的干扰,进行了体外模拟试验,利用过氧化物酶催化酚类化合物在硅酸溶液中的聚合研究硅沉淀的形成.发现,过氧化物酶催化形成的酚类聚合物能够诱导纳米形态的硅沉淀的形成.这些球形的纳米硅颗粒与前人报道的硅藻蛋白诱导产生的纳米硅球十分相似.酚的种类以及酚和硅的浓度影响硅球的大小.进一步的试验表明,多酚聚合物引起的硅沉淀过程具有酚饱和效应和硅饱和效应,当反应液中可溶性硅的摩尔浓度与酚的摩尔浓度之比达到1:1时,硅的沉积量最大,而低于或高于这个比值硅的沉积量都将减少.     

植物材料中的过氧化物酶细胞化学技术

过氧化物酶细胞化学技术广泛应用于植物细胞学、植物病理学等领域.但由于植物材料本身的特殊性,使得此技术的应用受到不同程度的限制.本文在自己工作及前人研究的基础上,针对过氧化物酶电镜定位的原理、实验程序进行了探讨和改良.     

中国对虾配合饵料化学评价法的研究

本文对中国对虾配合饵料营养价值的化学评价法进行了研究。评价内容包括必需氨基酸指数(EAAI)、蛋白价(PS)、必需氨基酸比例和必需氨基酸供求比。通过各种分析结果及实际投喂试验的比较,认为利用几个化学指标综合评价,能反映饵料的营养价值,而且具有显著的应用价值,方法较简单,省工省时。