兔出血症病毒分子生物学研究进展

兔出血症 (Ｒａｂｂｉｔｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃｄｉｓｅａｓｅ ,ＲＨＤ)是由兔出血症病毒 (Ｒａｂｂｉｔｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ ,ＲＨＤＶ)引起的一种急性、致死性传染病 ,对易感兔致病率可达 90 % ,病死率可高达 10 0 % ,是对兔的一种毁灭性传染病。该病于 1984年在我国江苏省首次爆发 ,随后蔓延至亚、欧、非以及中美洲等地区的一些国家 ,给养兔业造成巨大的经济损失。感染后的兔出现的临床症状是 :体温升高、呼吸速率加快、食欲减退并不爱活动。在临死前表现为神经共济失调 ,发狂并大声尖叫。少数受到感染的兔…     

血凝及血凝抑制试验的应用

血凝及血凝抑制试验是病毒学研究常用的检测方法之一,该方法操作简单,但是有许多人为因素可能导致结果不准确,笔者根据长期应用该实验的经验对血凝试验及血凝抑制试验的特点、应用范围、影响因素、常见错误及试验中应注意的问题做了概述.     

血凝抑制试验的影响因素

在长期从事血凝抑制试验的过程中,发现有诸多因素影响实验结果,这些因素分别是红细胞浓度,抗原浓度,环境温度,抗原抗体作用时间及生理盐水的PH值,消除这些因素的影响,可提高实验的准确性。     

血凝抑制试验的影响因素

在长期从事血凝抑制试验的过程中，发现有诸多因素影响实验结果，这些因素分别是红细胞浓度，抗原浓度，环境温度，抗原抗体作用时间及生理盐水的PH值，消除这些因素的影响，可提高实验的准确性。     

实验性兔出血症病理形态学动态观察

本试验应用光镜、电镜技术,对人工感染兔出血症病毒(RHDV)的成年兔、30～40日龄幼兔以及自然感染死亡病例的各种组织器官进行了病理形态学动态观察。结果表明,成年兔对本病毒易感,表现出与自然病例相似的典型变化,而30～40日龄幼兔则易感性低,缺乏特征病变。在患兔的肝细胞中观察到病毒粒子呈散在或聚集成包涵体样存在于核内及胞浆中,佐证本病毒为DNA病毒。     

醛化猪红细胞在犬细小病毒血凝和血凝抑制试验中的应用

本文试验摸索了猪红细胞(PRBC)用戊二醛醛化的条件,并将新鲜PRBC与醛化PRBC在犬细小病毒HA和HI试验中作了对比。结果发现:用5％PRBC与5％戊二醛,按4:1的比例,在16—18℃作用1.5h或用5％PRBC与2％戊二醛,按5:1的比例,在4℃作用2.5h后的PRBC对犬细小病毒均保持有一定的血疑敏感性。在4℃冰箱中保存6个月,仍可用于犬细小病毒HA和HI试验。因此,可减少试验时的采血次数。     

慢性兔出血症的研究

对北京和河北等地的一些獭兔养殖场发生的以瘫痪为主要症状的慢性型兔出血症进行了研究。结果表明 ,自然感染病例和人工感染病例的临床症状、病理学变化和血清学特性相似 ,通过分析这些獭兔养殖场慢性型兔出血症发生的原因 ,提出了诊断和防治措施     

微量血凝抑制试验监测技术在鸡新城疫防治中的应用

本文介绍了用微量血凝抑制试验方法监测鸡血清中鸡新城疫（ND）抗体效价在防治该病中三个方面的应用，为临床合理免疫、科学预防提供了依据。     

鸡传染性支气管炎HA抗原的制备及HI试验方法的建立

用１０％Ａ型魏氏梭菌滤液处理１００倍浓缩ＩＢＶ Ｍ４１株病毒液,成功地制备了ＩＢＶ ＨＡ抗原,效价为１：６４￣１：１０２４。用该抗原建立了ＩＢＶ ＨＩ试验方法。抗原在４℃保存,５个月效价不变;加入０．１％的甲醛及１／万的硫柳汞使抗原效价下降１￣２个滴度。对ＳＰＦ鸡血清、Ｍ４１阳性血清、其它鸡病标准阳性血清以及疫苗免疫试验鸡只血清的ＩＢＶ ＨＩ抗体监测结果证明,该方法操作简便、快速、敏感性高、特异性     

Beagle犬免疫血清Ⅰ型腺病毒抗体检测

目的为Beagle犬犬传染性肝炎(ICH)的预防制定合适的免疫程序提供依据。方法采用间接血凝抑制实验对24头Beagle犬(雌雄各半,20日龄～14周龄)注苗前后120份Beagle犬血清I型犬腺病毒血凝抑制抗体(HI)进行检测。结果注苗前20日龄仔犬血清母源性HI抗体效价为1:8～1∶32(平均1∶20),35日龄仔犬血清母源HI效价下降为1∶2～1∶8(平均1∶5);首免后2w(56日龄)血清HI效价上升为1∶8～1∶32(平均1∶14),二免后3w(77日龄)血清HI抗体效价上升为1∶32～1∶128(平均1∶45),三免后3w(98日龄)血清HI抗体效价继续上升为1∶64～1∶256(平均1∶79)。结论预防Beagle犬犬传染性肝炎(ICH)建议使用FiveStar犬五联弱毒疫苗,首免为35～40日龄,每间隔3w进行二免和三免加强。     

家兔性别与体温变化对热原检测结果的影响

目的对普通级家兔的体温变化范围、雌雄家兔间体温变化的差异进行统计,分析家兔性别是否对热原检测结果产生影响。方法按照中国生物制品规程(2000年版)中对热原检测的规定,对实验家兔体温进行测定。结果预检体温结果显示雌性家兔平均体温较雄性家兔体温偏高约0.4℃,且存在显著性差异(P<0.05)。在检测实验中由雌性体温波动导致检测结果为复试的与由雄性体温波动引起需复试的比例约为6∶1。结论雌性家兔在基础体温和体温波动幅度上都高于雄性家兔,且稳定性较雄性差。雌性家兔更易导致检测结果出现偏差。     

兔葡萄球菌病的诊断和药敏试验

目的对家兔发病死亡的原因进行诊断。方法对病死家兔进行剖检观察,并进行细菌分离培养与生化鉴定、PCR检测和药敏试验。结果通过对病死家兔进行剖检观察、细菌分离培养、生化鉴定、血清学试验、PCR检测和药敏试验,确诊病死家兔是金黄色葡萄球菌感染引起的细菌性疾病。药敏试验结果表明,分离菌株对青霉素、氨苄西林、万古霉素等抗生素敏感,而对头孢他啶、呋喃妥因已产生耐药性。结论为金黄色葡萄球菌病原鉴定与疾病诊断提供了科学依据。     

凝固酶测定试验鉴定葡萄球菌的影响因素

目的 探讨玻片法和试管法检测大酶的影响因素方法。方法 按标准方法操作比较两种血浆（人血浆和兔血浆）及三种抗凝剂（ＥＤＴＡ－Ｎａ２，ＥＤＴＡ－Ｋ２，柠檬酸钠）对结果的影响。结果 使用柠檬酸钠和ＥＤＴＡ－Ｎａ２抗凝的兔血浆和人血浆，８株金黄色葡萄球菌均产生葡萄球菌凝固酶和聚集因子，而其它２６株葡萄球菌包括表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、腐生葡萄球菌和人葡萄球菌不产生葡萄球菌凝固酶和聚集因子。结论 柠檬酸钠     

鼠源单抗3G1单链抗体基因的构建及序列分析

利用Rr—PCR方法，从分泌抗汉滩病毒mAb的杂交瘤细胞系3Gl中扩增出抗体VH和VL基因，通过PCR方法获得1inker—VL基因，进而利用加端PCR技术，在扩增出的单抗体VH和1inker—VL基因两端加上限制性酶切位点，分别克隆入pUCl8中并测序．3Gl VH基因长360bp，编码120个氨基酸；VL基因长324bp，编码108个氨基酸．在pUCl8载体中将VH和1inker—VL基因连接成ScFv基因．     

大小鼠主要病毒血清抗体检测结果与分析

目的评估清洁级大鼠、小鼠的微生物学质量。方法参照国家标准GB／T 14926-2001,依据单纯随机抽样 原则从相关单位生产繁殖群采集样品,检测主要病毒血清抗体水平。结果检测31只大鼠,其中仙台病毒(SV)和 汉坦病毒(HV)抗体阳性率均为0;检测280只小鼠,其中25只小鼠肝炎病毒(MHV)抗体阳性,10只小鼠仙台病 毒(SV)抗体阳性,1只小鼠鼠痘病毒(Ect)抗体阳性。结论清洁级小鼠的病毒监测工作及质量控制需加强。     

824例儿童腹泻病原分析

目的：探讨儿童腹泻的病原检验结果,以此为基础进行儿童腹泻的病原分析并提出治疗意见.方法 ：对内蒙古民族大学附属医院824例腹泻患儿的病原检验结果进行回顾性分析,总结常见病原体.结果：所有患儿中,病毒感染率为45.75%,主要感染病毒为轮状病毒和腺病毒;细菌感染率为12.38%,主要感染细菌为沙门菌和志贺杆菌.结论：导致儿童腹泻的主要病原为病毒,且以轮状病毒感染为主,次要病原为细菌感染,因此,临床治疗时需要根据检验所得出的患者的实际情况进行治疗.     

火菇素抗体探针的制备与高灵敏度的火菇素定性技术的建立

从金针菇子实体浸提液中提取了抗癌活性物质火菇素 ,将纯化的火菇素用Freund佐剂乳化后注射到新西兰白兔体内 ,经数次加强免疫后采血并分离了抗血清 ,应用免疫学方法检测与硝酸纤维素滤膜上抗原蛋白相结合的抗体探针 ,检测极限可达 2 0 - 4 0pg的抗原信号