咔唑分光光度法测定硫酸软骨素

硫酸软骨素在硫酸溶液中加热水解生成等摩尔数的葡萄糖醛酸,与咔唑溶液发生缩合反应生成紫红色化合物,经分光光度法测定其最大吸收波长为520 nm,线性范围为0～0.30 g/L（r=0.9998）,回收率为99.10% ,相对标准偏差为0.91% .     

化学酶法对硫酸软骨素类多糖的定量分析

硫酸软骨素(chondroitin sulfate, CS)类多糖是一类具有多种临床治疗作用的糖胺聚糖。在硫酸软骨素裂解酶作用下，软骨素中葡糖醛酸和N-乙酰半乳糖胺之间的糖苷键发生断裂，可生成不饱和二糖。微生物发酵生产软骨素过程中，多糖定量往往需经过多次纯化以及使用昂贵的仪器进行检测，过程繁琐。文章研究偶联了专一性的酶解法与蒽酮-硫酸法，快速测定复杂培养液中的软骨素类多糖质量浓度。该方法通过超滤去除单糖等小分子杂质后，将多糖用专一性硫酸软骨素裂解酶分解为寡糖，再通过超滤去除大分子杂质，得到的寡糖过滤液使用蒽酮-硫酸法快速测定多糖质量浓度。该多糖定量方法可以选择不同特异性的裂解酶，适用于复杂培养液中其他多糖的快速定量分析。     

硫酸软骨素测定方法的研究进展

硫酸软骨素的测定方法按其测定指标主要分为软骨素二糖、氨基己糖、葡萄糖醛酸、硫酸基和阴性基团5类.比较这5种指标认为:软骨素二糖是硫酸软骨素的组成单位,与硫酸软骨素含量的相关性最高;氨基己糖和葡萄糖醛酸是组成软骨素二糖的单糖,与硫酸软骨素含量的相关性较高;硫酸基受软骨素二糖硫酸化程度影响大,与硫酸软骨素含量相关性低;阳离子染料对硫酸软骨素分子上阴性基团的选择专一性不强,阴性基团与硫酸软骨素含量的相关性很低.从准确度看,以软骨素二糖为测定指标的高效液相色谱法准确度最高,适于质量控制和微量分析;分别以氨基己糖和葡萄糖醛酸为测定基础的Elson-Morgan法和咔唑法准确度相对较高,适于一般分析;而以硫酸基和阴性基团为基础的方法准确度相对偏低.     

硫酸软骨素生产技术

硫酸软骨素是从动物的软骨、喉骨、鼻骨、气管和骨健等组织中提取的珍贵制药原料。它主要用于治疗风湿病、关节炎、偏头痛、神经痛、腰痛、老年肩痛。四肢麻木等病症,并可与其它物质调制成化妆品,用于皮肤健美等,也可与另外一些药物配伍成复方眼药水,用于治疗角膜炎、角膜损伤等眼病．目前,软骨素除供应国内药品市场外,在国际市场上需求量很大。硫酸软骨素与透明质酸、肝素同为粘多糖类物质,不仅生产方法和设备相近,而且互为副产品。在生产肝素钢时用离子交换柱层析法可以极其方便地分离得到透明质酸和硫酸软骨素。因此,在猪小肠生…     

硫酸软骨素快速测定方法的研究

利用硫酸软骨素与氯化十六烷基吡啶结合生成稳定乳浊液 ,建立了硫酸软骨素含量的快速测定方法。在波长 680nm处测定硫酸软骨素在 0～ 6.2 5× 10 - 2 g/L范围内具有良好的线性关系 ,r=0 .9998,方法回收率为 98.4 9% ,RSD为 1.11%。该测定方法与氨基己糖法相比简便快速 ,重现性好     

硫酸软骨素粉制备方法的改进

介绍了用动物软骨制备硫酸软骨素粉的工艺改进方法,提出了用稀碱液捣碎提取、胰酶消化、乙醇沉淀后直接离心分离的工艺操作技术．结果表明,该方法可缩短制备周期,提高了硫酸软骨素的得率、纯度和生产效率．     

猪鼻软骨硫酸软骨素双酶法提取工艺研究

以猪鼻软骨为原料,用双酶法提取硫酸软骨素。用酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、2号酶、脂肪酶分别与胰酶组合提取硫酸软骨素,分析不同种类酶对硫酸软骨素提取的影响。通过正交试验得到的最佳提取工艺为：料液比1：1.5,第1类酶使用碱性蛋白酶,用量为2.5%,第2类酶（胰酶）用量为1.2%,成品收率达到16.740%。     

硫酸软骨素对应激性胃溃疡模型小鼠的影响

观察了硫酸软骨素对应激性胃溃疡模型小鼠的疗效，以不同剂量浓度（100mg／kg、200mg／kg、300mg／kg）的经稀碱-酶解法从鸡胸软骨中提取硫酸软骨素，灌喂以饥饿与紧张双重作用下建立小鼠活动-紧张溃疡模型．结果发现，对照组小鼠生长状况良好，没有出现胃溃疡，模型组小鼠溃疡状况最严重，与模型组小鼠相比，药物组小鼠的胃溃疡指数明显降低，各药物组之间以及药物组与模型组的溃疡指数差异达到极显著水平（P〈0．01）．     

硫酸软骨素提取工艺优化及抑菌活性研究

实验以硫酸软骨素得率为指标选择超声波提取时间、碱质量浓度、碱性蛋白酶添加量和胰蛋白酶添加量4个因素结合响应曲面优化设计最佳提取方案,并选取大肠杆菌、枯草芽孢杆菌进行抑菌实验,采用平板计数法,确定其抑菌效果以及最低抑菌浓度.研究结果显示,超声波辅助碱-双酶法提取硫酸软骨素的最佳工艺条件为:料液比为1∶15(g/m L),碱添加量为30 g/L,提取温度50℃,超声时间为40.6 min、碱性蛋白酶添加量为3.01‰、胰蛋白酶添加量为3.53‰,硫酸软骨素得率为18.88%.抑菌实验表明硫酸软骨素对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌有抑制作用,最低抑菌浓度均为200 mg/m L.     

硫酸软骨素提取方法研究

系统介绍了采用降解法提取硫酸软骨素的方法——中性盐法、碱提取法、酶提取法、超声波法和乙酸抽提法的工艺路线及其优缺点.     

硫酸软骨素酶的分离纯化及部分性质

通过细胞破碎、硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose FF和Sephacryl S-200柱层析，首次从粘质沙雷氏菌中提取出硫酸软骨素酶.纯化倍数11.46,比活为81.23 U/mg蛋白.提取液经PAGE和SDS-PAGE检测，呈现一条带.该酶相对分子质量为71.2 KD,亚基分子质量为35 KD,该酶为2个相同亚基组成.等电点为7.19，最适pH值7.5，最适温度为40 ℃，以4-硫酸软骨素为底物测得Km值为3.98×10^-4 mol/L.     

硫酸软骨素A介导的恶性疟原虫感染的红细胞粘附

对硫酸软骨素的粘附机制进行了初步探讨。研究表明,恶性疟原虫感染的红细胞可粘附于各种器官的微血管内皮细胞,这种粘附被认为是红细胞膜表面分子与内皮细胞表面分子间配体－受体相互作用的结果,ＣＳＡ为内皮细胞表面感染的红细胞的粘附受体和恶性疟原虫红细胞膜蛋白１的配体。     

反相高效液相色谱法测定硫酸软骨素的含量

硫酸软骨素是从生物体内提取出来的一种天然药物 .本文采用反相高效液相色谱法 ,利用外标法定量 ,测定了硫酸软骨素的含量 .色谱柱为ZORBAX—ODS( 4 .6mm× 150mm ) ,流动相为水∶甲醇∶0 .0 1mol/磷酸盐缓冲液 ( pH4 ) =4 70∶2 0∶10 ,检测波长 2 0 0nm ,平均回收率为 98.2 6% ,RSD为1.0 5% (n =5) .本法具有快速、简便、灵敏、准确等优点     

驴软骨硫酸软骨素提取工艺的优化

采用二次通用旋转组合设计对碱液提取中的4个关键因素进行优化,采用正交实验对酶解过程中4个关键因素进行优化。在此优化条件下,硫酸软骨素的产率达到33.6%,含量达到13.53%。此工艺可以有效提高产品的产率和含量,达到优化目的。     

硫酸软骨素生产新工艺

提出了双酶生产硫酸软骨素的新工艺,使质量稳定和得率提高。与传统生产法相比,得率可提高1％－2％,产品洁白,生产周期缩短1／3,生产成本降低5％。     

硫酸软骨素裂解酶ABC产生菌的筛选及酶学性质的初步研究

从成都市井研县生猪屠宰厂等地采集的样品中筛选出一株高产、稳定的硫酸软骨素裂解酶ABC产生菌株GT38，初步鉴定为彭氏变形杆菌(P．penneri)，其酶活力单位高达112U／L．酶学性质经初步研究表明：该酶的最适反应pH值为7．0，最适反应温度为30℃，在pH值6～8之间较稳定，温度在30℃～45℃较稳定，金属离子对酶活力影响不大．     

CS结构修饰及其与AA相互作用的空间位阻效应

为从分子水平探讨硫酸化多糖与小分子相互作用机理,本文采用氯磺酸-吡啶法(Wolfrom法)对硫酸软骨素(CS)进行结构修饰,制得了不同硫取代度的CS样品.应用光谱法研究了天青A(AA)与CS相互作用的吸收光谱,考察了硫取代度对CS抗凝血活性及AA与CS相互作用的影响,应用建立的酸性多糖与生物探针相互作用数学模型,测得AA与不同硫取代度的CS最大结合数分别为151,215,211和204,认为AA与CS相互作用具有空间位阻效应.     

硫酸软骨素(CSB)基质对碳酸钙结晶的影响

根据生物矿化原理,通过CO2的缓慢扩散,用硫酸软骨素(CSB)作为碳酸钙结晶的有效调控剂,与富集在有机/无机界面钙离子的结合,合成了不同形貌的碳酸钙。讨论了CSB基质的浓度,时间,pH对产物的晶型及形貌的影响,研究表明相对于其他因素,CSB的浓度对碳酸钙晶型的生长和形貌的取向具有一定的调控作用。     

美国生物学博士Richard W．Mc Laughlin来我校作学术报告

6月3日下午三点，来自美国明尼苏达州Mayo Clinic的Richard W．Mc Laughlin博士在生命科学学院生物楼给广大师生作了一场题为“硫酸软骨素A形成稳定的寡聚中间体可能会加速轻链淀粉状蛋白病对心脏的损伤”的学术报告会．报告会中，Richard W．Mc Laughlin博士精彩幽默的讲学赢得了广大师生的满堂喝彩．这场跨国界的学术报告会，拓展了师生们的知识面，使师生们更深刻地认识到了生命科学研究任务的艰巨性，也在一定程度上坚定了生科院广大师生“做人要自强不息，读生物就要考研读博”的信念．     

构建软骨支架的天然生物材料

关节软骨的自我修复能力有限,发生损伤后须进行修复或置换,然而传统的治疗方法难以达到理想的效果,组织工程技术为此难题带来了曙光。在组织工程三要素(种子细胞、支架材料、信号分子)中,支架材料起着至关重要的作用。对关节软骨支架材料进行了综述,重点介绍了软骨组织中天然存在的Ⅱ型胶原蛋白、透明质酸和硫酸软骨素3种生物材料,并就目前组织工程支架材料存在的问题和未来发展方向进行了讨论。