粘红酵母产L-苯丙氨酸解氨酶发酵条件的优化研究

一、前言 L-苯丙氨酸有生理活性,是人体和各种动物所必需的.另外L-苯丙氨酸又是合成一些抗癌药物的中间体.最近10年来,L-苯丙氨酸最重要的用途是合成二肽甜味剂阿斯巴甜.     

纳滤膜对氨基酸的分离研究

选择NTR7450膜对L-苯丙氨酸和L-天冬氨酸水溶液进行了纳滤分离过程研究,讨论了不同pH下氨基酸的透过特性.在pH=5～8时,NTR7450膜对L-苯丙氨酸和L-天冬氨酸的截留率分别为0和90%.根据实验结果进行了模拟计算.结果表明,通过调节pH值,L-苯丙氨酸和L-天冬氨酸可以被有效地分离.     

酶法转化体系中L-苯丙氨酸的络合萃取

L-苯丙氨酸的分离提取对于促进酶法制备工艺的产业化进程具有重要价值。利用络合萃取分配系数、分离选择性高的特点，对苯丙酮酸酶法制备，L-苯丙氨酸转化体系中，L-苯丙氨酸的络合萃取进行了研究。以二(2-乙基己基)磷酸为萃取剂，研究了水相平衡pH、萃取剂浓度和稀释剂的种类对分配系数的影响；并利用D2EHPA-正辛醇体系对酶法制备，L-苯丙氨酸的转化液进行了络合萃取研究，经4次萃取和1次反萃，L-苯丙氨酸的萃取率达到98．15％；经1次反萃，L-苯丙氨酸的收率达94．33％。     

HPLC法测定D-氨基葡萄糖盐酸盐中的L-苯丙氨酸杂质

建立了HPLC直接测定L-苯丙氨酸（L-Phe）的方法.利用L-苯丙氨酸具有紫外吸收这一特征,选用210 nm的检测波长,L-苯丙氨酸在0.058 4-0.525 6μg范围内呈显著的直线线性关系,相关系数为0.999 5.样品的加标回收率为98.9%,该法的检出限为0.109μg/mL.     

L-谷氨酸对L-苯丙氨酸的热力学及晶型转化的影响

采用静态法测定了L-谷氨酸对L-苯丙氨酸热力学的影响,并应用常用的方程进行了拟合。结果表明,L-谷氨酸的加入增大了L-苯丙氨酸在水中的溶解度。考察了L-谷氨酸对L-苯丙氨酸晶型转化过程的影响,L-谷氨酸的加入可抑制其晶型转化。同时,应用Langmuir模型对晶型转化数据进行了拟合,拟合结果良好,可用于相关数据预测。     

溶解性有机质对黑炭吸附和解吸苯并[a]芘的影响

通过静态吸附实验,研究了3种不同类型的溶解性有机质（L-苯丙氨酸、蛋白胨和柠檬酸）对苯并[a]芘（BaP）在黑炭表面吸附解吸的影响.结果表明,3种溶解性有机质的存在均会增加BaP在黑炭表面吸附的非线性程度.L苯丙氨酸和蛋白胨的存在均可以抑制BaP在黑炭表面的吸附,同时促进了BaP的解吸,这主要取决于L-苯丙氨酸和蛋白胨对BaP的增溶作用.但是由于BaP可以分配到黑炭表面吸附态的蛋白胨中,在相同添加浓度下,L-苯丙氨酸对BaP吸附的抑制作用更强.与L-苯丙氨酸和蛋白胨相反,柠檬酸的存在增加了BaP在黑炭表面的吸附并减小了吸附过程的可逆性,这主要是由于吸附在黑炭表面的柠檬酸对BaP的吸附作用.当柠檬酸的浓度从0 mg· L-1增加到50和100 mg·L-1时,BaP的吸附能力参数Kd值（在ce=100 μg·L-1下）分别从119 268 mL·g-1升高到134 877和180 639mL·g-1,解吸滞后指数H分别从0.44减小到0.41和0.39.本研究为预测多环芳烃在溶解性有机质污染的环境中的分布特征和最终归趋提供了理论依据.     

L-酪氨酸和L-苯丙氨酸双组分吸附平衡研究

研究了L-酪氨酸和L-苯丙氨酸在732树脂上的单组分和双组分吸附平衡.对单组分吸附,分别采用Fre-undlich和Langmuir模型拟合吸附平衡数据.对双组分吸附平衡,扩展的Freundlich模型的预测精度明显优于IAS和LCA模型,而后2者的精度相当.双组分吸附行为表明,L-苯丙氨酸在该双组分吸附系统中是强吸附质.所得到的模型为双组分竞争吸附动力学过程的数学建模与数值模拟研究提供参考.     

L-脯氨酰-L-苯丙氨酸催化的直接不对称Mannich反应研究

报道了L-脯氨酰-L-苯丙氨酸和L-脯氨酰-L-苯丙氨酸/对甲苯磺酸在DMSO中0℃催化硝基苯甲醛、丙酮与4-甲氧基苯胺一锅三组分的不对称Mannich反应。以L-脯氨酰-L-苯丙氨酸和L-脯氨酰-L-苯丙氨酸/对甲苯磺酸为催化剂,产物收率分别为56%和61%,ee值分别为98%和99%。实验得出低温有利于提高反应的对映选择性,4-甲氧基苯胺是最好的胺组分,催化剂对醛的结构要求苛刻。     

两相体系中胰酶拆分DL-苯丙氨酸

将DL-苯丙氨酸与甲醇酯化得DL-苯丙氨酸甲酯盐酸盐,在甲苯/水两相体系中用碳酸氢钠中和DL-苯丙氨酸甲酯盐酸盐得游离DL-苯丙氨酸甲酯,在甲苯/水两相体系中用胰酶拆分DL-苯丙氨酸甲酯得到L-苯丙氨酸和D-苯丙氨酸甲酯,取得了各步反应的最优条件,并将D-苯丙氨酸甲酯外消旋得到DL-苯丙氨酸甲酯继续用于拆分。拆分摩尔收率为61.4%,所得L-苯丙氨酸粗品纯度为92.2%,重结晶后为98.6%,［α］     

聚L-苯丙氨酸修饰电极测定尿酸

用循环伏安法制备聚L-苯丙氨酸修饰玻碳电极,研究尿酸在聚L-苯丙氨酸修饰电极上的电化学行为,建立循环伏安法测定尿酸的新方法.在pH 4.0的磷酸盐缓冲溶液中,尿酸在聚L-苯丙氨酸修饰玻碳电极上出现一氧化峰,峰电位为Epa=+638 mV(相对于Ag/AgCl电极),氧化峰电流与尿酸浓度在5.00×10-7～5.00×10-5 mol/L范围内成线性关系,检测限:1.0×10 -7 mol/L.对1.0×10 -5 mol/L UA溶液平行测20次,其相对标准偏差为3.1%.用于尿液中尿酸的测定,结果满意.