比色法快速测定糖化酶活力新方法

本文介绍比色法测定糖化酶活力新方法。糖化酶水解淀粉产生葡萄糖，生成的葡萄糖与３，５—二硝基水杨酸钠盐（ＤＮＳ）作用，发生颜色改变，颜色变化的多少与葡萄糖含量成正比。因此糖化酶水解液与ＤＮＳ反应后，在５５０ｎｍ处测定吸光度，由吸光度看出葡萄糖含量，并计算出糖化酶的活力。比色法简单、快速，准确度和标准法相当，是仪器分析测定糖化酶活力的理想方法。     

DNS法测定小麦分蘖节中糖的含量

首次应用３．５—二硝基水杨酸比色法（ＤＮＳ法）测定了小麦分蘖节中糖的含量。试验结果表明，在碱性条件下，糖的浓度在０～７２μｇ／２５ｍＬ范围内符合比尔定律，该方法用于小麦分蘖节中糖的分析，测定结果与蒽酮比色法测定结果基本相同。且方法简单、快速、准确     

DNS法测定纤维素酶活力最适条件研究

鉴于纤维素酶研究和生产中,纤维素酶活力测定和酶活力单位的表示方法很不统一的现象,本文研究和分析了３,５－二硝基水杨酸法测定羧甲基纤维素酶糖化力的实验条件,如：温度、ｐＨ、酶促反应时间、ＤＮＳ显色时间、波长等．实验表明：在５０℃,ｐＨ４．６条件下酶促反应时间５ｍｉｎ,ＤＮＳ显色５ｍｉｎ,于４９０ｎｍ处测定ＯＤ值比较适宜．     

葡萄糖酸比色测定方法的研究

本文论述了在实验室常规条件下，用比色法规定葡萄糖酸含量的新方法。葡萄糖酸浓度在0～5mmol／L范围内符合比耳定律，标准曲线相关系数γ达到0．99。回收试验中两种不同标准添加量回收率能达90％以上．用此方法规定的样品中，葡萄糖酸含量的结果与用离子色谱法测定的结果相近。此方法简便，易操作，需时短。     

绿色木霉纤维素酶酶活力的研究

探讨不同碳源、氮源、无机盐等因素对绿色木零纤维素酶活力的影响，利用滤纸酶活测定法和DNS比色法测定样品中的葡萄糖含量，间接求出酶总活力．得到的最终优化结果为：磷酸二氢钾789．65mg、氯化钴0．80mg、硫酸镁68．25mg、硫酸亚铁0．80mg、硫酸锰0．80mg、麦麸0．58g、稻草粉0．56g、尿素0．57g、硫酸铵0．23g，所测酶活比原培养基提高8％．     

酿造用黑曲霉及诱变和野生根霉菌种保藏方法的探索

本文对酿造工业使用的产葡萄糖淀粉酶的几种野生和诱变根霉及黑曲霉菌种的保藏方法进行了探讨。研究表明:经7年保存的麦麸曲室温和低温(4℃)、马铃薯葡萄糖琼脂斜面石腊油封存低温保藏方法保藏菌种全部存活,室温保藏菌种糖化酶活力显著降低,而低温保藏菌种糖化酶活力虽也降低,但仍不失为工业上菌种保藏的一种有效方法。     

泸型大曲中根霉固态发酵产糖化酶条件研究

对泸型大曲中根霉菌株固态发酵产糖化酶的条件进行了研究。以糖化酶活力为评价指标,设计单因素实验,研究培养基水分含量、培养时间、培养温度对根霉产糖化酶的影响,在此基础上,利用Box-Benhnken Design的方法,对根霉菌株固态发酵产糖化酶的条件进行优化,结果显示泸型大曲中根霉菌株固态发酵产糖化酶的优化条件为培养温度29℃,培养基水分含量53%,培养时间164h,糖化酶的酶活力为2 194.44 U/g。     

脱脂咖啡渣中甘露聚糖含量的测定

以Ｄ－ 甘露糖为标准，ＤＮＳ作显色剂，用分光光度法间接测定脱脂咖啡渣中甘露聚糖的含量．结果表明：它在４９２ ｎｍ 处有最大吸收峰，测定标准回收率高，相对误差小，重现性好．该法操作简单，效果良好，适用于测定各种类型脱脂咖啡渣中甘露聚糖的含量．     

红曲霉固态发酵产糖化酶及酸性蛋白酶条件的优化

从8株红曲霉中筛选出红曲霉MQ7作为高产糖化酶和酸性蛋白酶的供试菌株,采用固态发酵方法测定在不同发酵温度、底物料液比、大米和麸皮比例条件下的产酶情况.利用正交实验优化固态发酵产酶过程,确定该菌株产酶最佳发酵条件为:发酵温度30,℃,底物料液比(g∶mL)20∶25,大米麸皮比例(g∶g)17∶3.在此条件下,糖化酶活力达1,641.69,U/g,酸性蛋白酶活力达151.09,U/g.同时研究了NaCl含量对红曲霉酶活力的抑制作用,当NaCl质量分数达到18.92%时,红曲霉MQ7产糖化酶活力下降64.8%,酸性蛋白酶活力下降85.6%.     

新型葡萄糖氧化酶电极与毛细管电泳的联用

采用浸涂法将1－二茂铁基乙胺和壳聚糖修饰到铂电极表面，与葡萄糖氧化酶溶液作用后用戊二醛交联，制备壳聚糖固定化葡萄糖化酶生物传感器，测定葡萄糖在传感器上的伏安曲，采用恒电位安培检测法，葡萄糖浓度在0.002-4.0mmol/L范围内与响应电流成线性关系，响应时间短，由于二茂铁衍生物和葡萄糖氧化酶通过包埋，键合等作用固定于壳聚糖膜,中不易从电极表面流失，电极稳定性较好，同时尝试将该电有与毛细管电泳联用，成功用于人血清中葡萄糖的测定。     

“温度、pH对酶促反应速度的影响”实验的改进

以糖化酶为材料，设计了一个“温度、pH对酶促反应速度的影响”的定量实验，采用硫代硫酸钠滴定法精确测定不同条件下的糖化酶活力单位，代替原来的碘液法定性检测唾液淀粉酶对淀粉的水解程度，实验结果准确，方法易操作。学生能在一次实验课的时间内做出酶的温度、pH曲线，加深对理论知识的理解。     

二硝基番木鳖碱在汞电极上的电化学行为及其应用

在０．０２ｍｏｌ·Ｌ－１ＨＡｃ－ＮａＡｃ，ｐＨ４．０的底液中，二硝基番木鳖碱（ＤＮＳ）在汞电极上有一不可逆线性扫描还原峰，（ｖｓ．饱和Ａｇ／ＡｇＣｌ电极）。该峰具有明显吸附性。当ＤＮＳ浓度较小，扫描较快，搅拌富集时间较长时，电极反应完全为吸附态的ＤＮＳ的还原所控制，吸附型体为ＤＮＳ中性分子。测得ＤＮＳ在汞电极上的饱和吸附量为２．７５×１Ｏ－１１ｍｏｌ·ｃｍ－２，每个ＤＮＳ分子所占电极面积为６．０４ｎｍ２。探讨了吸附伏安法测定ＤＮＳ的最佳条件。可将非电活性的番木鳖碱硝化转化为ＤＮＳ，然后用吸附伏安法对番木鳖碱进行间接测定。     

PVA固定化葡萄糖氧化酶电极的研制及应用——血清中葡萄糖含量的测定

本文报道了用聚乙烯醇(PVA)固定葡萄糖氧化酶(GOD)并制成酶电极,对膜的导电性能进行试验,在葡萄糖含量为2×10-5-1×10-3M的试验范围内,响应电流的变化与浓度成线性关系。用此电极以安培法测定血清中葡萄糖含量并与邻甲苯胺比色法、GOD-过氧化物酶比色法进行比较,结果较为满意。     

无需供热的谷物生产酒精法

无需供热的谷物生产酒精的方法是用葡萄糖糖化酶和 a-淀粉酶等微生物糖化酶直接糖化谷物、大米,就可制作酒精,这一成果已在日本试制成功。例如:用2斤大米放入3000升水中,用5公斤葡萄糖糖化酶     

磁固相萃取与纳米金比色法联合检测蛋清中的溶菌酶

溶菌酶（LZ）在医药和工业方面有非常重要的应用,因此检测LZ的技术受到越来越多的关注. 我们建立了基于柠檬酸根包覆的纳米金（AuNPs）比色法对LZ进行快速测定. 当有LZ存在时,由于LZ与AuNPs的相互作用导致分散性良好的AuNPs发生聚集,从而使AuNPs溶液的颜色由红色变为蓝色. AuNPs溶液在625 nm和525 nm的吸光度比率（A625/A525）与LZ浓度在10-100 nM范围内有很好的线性相关关系,因此LZ的含量可以通过裸眼观测AuNPs溶液的颜色变化或用紫外可见分光光度计进行快速测定,LZ的最低检测限为10 nM. 我们将所建立的AuNPs比色法与磁固相萃取技术相结合对蛋清中LZ的含量进行了测定.     

葡萄糖酶电极的制备和测试

以自制的铂电极为基础,制备了葡萄糖酶电极,并测试了淀粉-糖化酶水解液中的葡萄糖,测定的范围为2×10~(-6)～5×10~(-3)mol/L。     

茯神质量标准提升研究

目的:完善和提高茯神质量标准。方法:根据药典方法测定茯神的显微鉴别、水分、总灰分、浸出物,新增薄层色谱鉴别,采用蒽酮比色法测定茯神中多糖的含量,以葡萄糖为对照品。结果:茯神薄层色谱法简单、分离度好,多糖含量的测定方法简单快捷准确。结论:试验结果可为茯神药材的贵州地方标准的提升提供参考。     

重组草酸青霉生淀粉糖化酶的酶学特性鉴定

【目的】了解在毕赤酵母中表达的来源于草酸青霉(Penicillium oxalicum)GXU20的重组生淀粉糖化酶的酶学特性。【方法】用3,5-二硝基水杨酸法测定pH值、温度、金属离子和化学试剂对纯化的重组生淀粉糖化酶的活力的影响,同时测定酶的底物特异性、酶对生淀粉的吸附能力以及酶对不同生淀粉的水解效率等,用高效液相色谱法对该酶水解生木薯淀粉的产物进行分析鉴定,用扫描电子显微镜观察重组酶对不同生淀粉颗粒的水解方式。【结果】重组生淀粉糖化酶rPoGA15A的最适pH值为4.5,最适温度为65℃,在pH值为2.0~10.0时,重组酶具有较好的pH耐受性,温度小于50℃时,酶的稳定性好。除Ag~+、Cu~(2+)和SDS之外,其他大部分金属离子和化学试剂对重组酶的酶活力影响不大。重组生淀粉糖化酶对大米和玉米生淀粉的活性较高,对木薯和马铃薯生淀粉的活性次之,重组生淀粉糖化酶rPoGA15A对不同生淀粉的吸附能力与其对相应不同生淀粉的水解活性大小呈正相关。扫描电子显微镜观察表明重组生淀粉糖化酶对不同生淀粉颗粒的降解作用明显,水解方式各有特点。高效液相色谱分析表明该重组生淀粉糖化酶水解生木薯淀粉的产物仅有葡萄糖。重组生淀粉糖化酶rPoGA15A在40℃下对大米和玉米生淀粉水解72h后水解率分别达到86.5%和71.9%。【结论】重组生淀粉糖化酶具有广泛的pH耐受性,对生淀粉具有高水解活性,在生淀粉的水解和生料同步糖化发酵生产酒精中有一定的应用潜力。     

关于蒸馏酒及配制酒中甲醇分析方法的探讨

甲醇含量是制备白酒时最主要的控制指标，在用亚硫酸品红比色法测定甲醇含量时，应严格控制浓度与显色时间等因素以取得最佳测定结果。     

麸曲糖化酶活力测定方法探讨

糖化酶活力是制曲过程中的一个重要指标。建立了3,5-二硝基水杨酸(DNS)结合连续流动化学分析仪(API)检测麸曲糖化酶活力的方法。结果表明:通过t检验,次碘酸盐法、DNS法和DNS优化法测定糖化酶活力均无显著性系统误差,DNS优化法的误差值最低为13.1 U/g,RSD值为1.97%。通过F-检验双样本方差分析,DNS优化法较快速滴定法、DNS法测定麸曲糖化酶活力的精密度均有显著性提高,且具有简便、快捷的特点。