耐高温耐高酒度醋酸菌选育研究

从高温季节发酵良好的醋醅中,分离筛选出N 9、F17两株醋酸菌,在培养温度35℃,培养基酒度6%(V/V)条件下,产酸量均高于A S1.41号.以N 9、F17为出发菌株,经紫外线、硫酸二乙酯逐级诱变,分别获得编号为HN 15、HF6两株耐高温耐高酒度醋酸菌株.在培养温度40℃,培养基酒度12%(V/V)条件下,HN 15酒精转化率为75%,HF6酒精转化率为70%.     

产纤溶酶菌株根霉12#的诱变育种

以产纤溶酶的华根霉12＃为出发菌株,对其进行紫外线-氯化锂复合诱变,筛选到74株制霉素抗性突变株。所有抗性突变株经进一步固体发酵筛选,获得了4株稳定高产纤溶酶的正突变株,其纤溶酶产量分别比出发菌株提高32.9%、21.5%、22.3%和18.0%。     

一株强抗镉成团肠杆菌的分离鉴定

从北京市远郊东三岔地区一处废弃的铅锌尾矿中筛选到一株强高度抗镉的细菌.通过细菌形态学观察、Biolog快速鉴定、部分16SrDNA序列分析,鉴定此菌株为成团肠杆菌(Pantoea agglomerans).抗性研究表明该菌株具极强的抗镉能力,最小抑制浓度(MIC)达2 000mg/L,具有很高的应用价值.     

生物表面活性剂产生菌的筛选及鉴定

从大庆油田采集的原油样品中筛选出一株产表面活性剂的菌株HD-322-2,根据形态特征、生理生化性质和16S rDNA序列分析对菌株进行鉴定,并运用红外光谱法和排油圈法对产物进行分析。菌株HD-322-2的16S rDNA序列与枯草芽孢杆菌的相似性达到98%,生理生化性质分析的结果亦与枯草芽孢杆菌相同,认定该菌株属于枯草芽孢杆菌。红外光谱分析结果表明:菌株HD-322-2产生的生物表面活性剂的主要成分为脂肽。该菌株具有较强的排油和降黏能力。     

一株好氧反硝化菌的筛选鉴定及其系统发育分析

从稳定运行的序列间歇式活性污泥(SBR)反应器中分离纯化得到一株好氧反硝化菌(实验室命名为CFY1),对菌株CFY1进行了形态观察、生理生化鉴定及16S r DNA基因序列分析,并对其好氧条件下的反硝化能力进行了考察。结果表明,菌株CFY1的菌落呈圆形,乳黄色,半透明,表面光滑,边缘不整齐,菌体细胞为短杆状,无芽孢,革兰氏染色呈阴性;氧化酶反应呈阳性,具有分解葡萄糖和淀粉以及还原硝酸盐的能力;菌株CFY1的16S r DNA序列经BLAST分析,与Gen Bank中施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)具有98.9%同源性,结合该菌株的形态和生理生化特征,可基本确定菌株为施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri),NCBI Gen Bank登录号为KC253270;在摇床转速150 r·min-1、培养温度30℃及p H值7.2的培养条件下,24 h内能将113.6 mg·L-1的NO3--N降解为0 mg·L-1。     

假单胞菌Y5-11的分离筛选及比较基因组学研究

菌株Y5-11是从哈尔滨周边地区地下水中分离的一株假单胞菌,具有较高的自养脱氮能力。菌株Y5-11的16S rRNA基因序列与模式菌Pseudomonas koreensis Ps 9-14^T高度同源(99.72%)。获得了菌株Y5-11的全基因组序列,采用比较基因组学分析了菌株Y5-11的碳源利用和脂肪酸含量特征,对菌株的生理生化特征进行了系统研究,发现菌株Y5-11与模式菌Pseudomonas koreensis Ps 9-14^T在碳源利用上较为接近,但两株菌株在生长温度和硝酸盐还原方面存在差异。菌株Y5-11有17个特有基因,其在脂肪酸种类及含量上与其他菌株相比,存在明显的特异性,主要脂肪酸为C16:0和C17:0 cyclo,含量分别为19.37%和21.09%。通过以上研究,确定了菌株Y5-11的分类地位和生物学特征,为菌株Y5-11的进一步应用提供了生物学参考依据。     

化合物{[Cd（2，2’-bipy）2]2V4O12}·H2O的水热合成及其结构表征

利用水热技术,以钒酸盐、二价过渡金属化合物及含N的螯合配体为起始反应物,合成了异核簇化合物{[Cd（2,2’-bipy）2]2V4O12}·H2O．分子式为：C40H34Cd2N8O13V4．晶胞参数为：orthorhombic,Ibca,a=16．0479 A,b=17．0273 A,c=33．5371 A,Z=2．化合物的结构可描述为[V4O12]^4-环以共价作用同两个[Cd（2,2’-bipy）2]^2＋相连,[V4O12]^4-环为椅式构象．     

化合物{[Cd（2，2’-bipy）2]2V4O12}·H2O的水热合成及其结构表征

利用水热技术，以钒酸盐、二价过渡金属化合物及含N的螯合配体为起始反应物，合成了异核簇化合物{[Cd（2，2’-bipy）2]2V4O12}·H2O．分子式为：C40H34Cd2N8O13V4．晶胞参数为：orthorhombic，Ibca,a=16．0479 A，b=17．0273 A，c=33．5371 A，Z=2．化合物的结构可描述为[V4O12]^4-环以共价作用同两个[Cd（2，2’-bipy）2]^2＋相连，[V4O12]^4-环为椅式构象．     

井冈霉素菌种自然选育及产素能力研究

采用自然选育方法对井冈霉素生产菌株(Streptomyces hygroscopicus var.Jinggangensis Yen)进行筛选,获得了遗传性能稳定的高产菌株,考察了碳源、有机氮源对菌种产素能力的影响.结果表明:采用C:N为1:0.45～1:0.57,固形物含量在12%左右的培养基配方,井冈霉素生产菌产素能力高,易过滤,滤液清澈.     

一株饮用水净化细菌的分离鉴定及安全性评价

从松花江哈尔滨段饮用水水源地中分离获得一株饮用水净化细菌ZXY30,对水样处理24h后,UV254、TOC、CODMn三种指标的去除率分别达到19.16%、25.38%和20.69%。经过菌株形态特征、生理生化以及16SrRNA序列同源性分析,鉴定该菌株为恶臭假单孢菌(Pesudomonas putida)。小鼠急性毒性实验证明,该菌株不具有相关毒性,为丰富生物强化方法净化饮用水技术提供菌种储备。     

从废旧报纸中分离高产纤维素酶菌种的鉴定和研究

目前,造纸行业是对森林资源消耗最大的产业,每年用于造纸消耗的木材数量巨大．以预处理的废报纸浆为原料,在一定条件下筛选产纤维素酶菌株,应用于废纸纸浆脱墨研究,考察了浓度、时间、温度对废报纸中分离高产纤维素酶菌种的影响,并采用简单染色、革兰氏染色和刚果平板法进行菌株鉴定．结果表明,以报纸为唯一营养源,进行摇床培养,从培养液中分离纯化出一株短杆状具有芽孢的革兰氏阳性菌．以羧甲基纤维素钠为唯一碳源,最终筛选出具有高产能力的产纤维素酶菌株,命名为QQ1128.1．提取16S rDNA,经PCR扩增和序列测序后,构建系统发育树,鉴定细菌QQ1128.1为芽孢杆菌属的一个新种．获得的脱墨菌种能够提高再生资源的有效利用,实现国家生态文明建设．     

低温高效苯酚降解菌的筛选及降解特性的研究

利用微生物学的方法,从哈尔滨工业大学下水道活性污泥中筛选出一株可降解苯酚的优势菌株,此菌株可利用苯酚作为唯一碳源和能源.通过对这种菌株在不同温度、pH,以及不同苯酚浓度下的生长和苯酚降解情况的考察,确定了这种菌株的最适生长温度为10℃,最适pH为7.5,最大可降解苯酚浓度为3000 mg/L并且具有较强的苯酚降解能力,在10℃、pH值为7.5、装液量为50 mL、接种量15%、摇床振荡速度160 r/min的条件下,反应48 h后可使500 mg/L的苯酚降解率达98%以上.     

反硝化细菌Y39-6的基因组及生理生化特征研究

菌株Y39-6是从哈尔滨周边地区地下水中分离的一株假单胞菌，具有异养反硝化和自养脱氮能力，由于假单胞菌属内的菌种鉴定存在复杂性，对菌株Y39-6的具体分类仍有争议。通过获得菌株Y39-6的全基因组序列，进行比较基因组学分析，分析了菌株的碳源利用和脂肪酸含量特征，对菌株的生理生化特征进行了系统研究。发现菌株Y39-6与模式菌Pseudomonas veronii CIP 104663T的基因组相似性更高，G+C的含量接近，共有基因数量最多，为368个，碳源利用特征相似，可以确定菌株Y39-6属于Pseudomonas veronii菌种。菌株Y39-6有15个特有基因，主要脂肪酸为C16∶0和C17∶0 cyclo,含量分别为22.05%和21.25%,与Pseudomonas veronii菌种的其他菌株相比，存在明显的特异性。通过以上研究，确定了菌株Y39-6的分类地位和生物学特征，为菌株Y39-6的进一步应用提供了生物学参考依据。     

一株枯草芽胞杆菌的分离鉴定及其杀虫活性的研究

以从土壤中自行分离的219株芽胞杆菌中筛选的一株枯草芽胞杆菌菌株HX08为研究对象,通过菌落形态观察、扫描电镜、激光共聚焦显微镜等进行菌体形态观察以及16S rRNA基因同源性分析等一系列方法鉴定,该株细菌属枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis,命名为HX08,并将其16S rRNA基因序列提交上Genebank数据库,获得登陆号KF774302.通过生测发现,HX08菌株在60 h发酵时间段对棉铃虫的致死效果最好.对该菌株发酵液提取的活性蛋白进行初步研究,建立了HPLC技术分离体系,使用H2O做流动相,以0.5 mL/min流速洗脱,检测波长分别为215、254和280 nm,收集第15 mL收集管处即保留时间为31 min的2号峰粗分离物活性较高.切取SDS-PAGE胶上相对应活性峰目的蛋白质条带酶解,利用质谱(LTQ-MS)技术进行了分子特性分析,鉴定发现杀虫活性蛋白成分为草酸脱羧酶.     

快生型大豆根瘤菌(Rhizobium fredii)15067与褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)10006的16S rDNA分析

分别对快生型大豆根瘤菌(Rhizobium fredii)15067和褐球固氮菌(Azotobacter chroococ-cum)10006两个菌株进行了16S rDNA的全序列测定,将此全序列与已知相关的16S rDNA进行了比较及聚类分析,得到系统发育树状图.在系统发育树中,根瘤菌15067隶属于中华根瘤菌属,与Sinorhizobium xinjiangense IAM 14142,SinoRhizobium fredii SjzZ 4构成一个分支,其中与S.fredii SjzZ4的相似性最高,达99.72%;固氮菌10006处于固氮菌属分支中,其中和Azotobacter chroococcum AM12A,Azotobacter chroococcum的相似性均高达99.93%.为确定两株菌株的分类地位、进一步发掘和利用菌株的优良性状提供了参考依据.     

一株产淀粉酶中度嗜盐菌Nesterenkonia sp.DQ-1的分离鉴定

利用平板筛选法从大庆盐碱地土壤中筛选到一株产淀粉酶并能在广泛NaCl浓度范围(0～25%)和广泛pH值范围(pH值为6～10)生长的耐盐碱菌DQ-1,对其进行形态学、生理生化鉴定和16SrDNA序列分析,DQ-1呈球形,大小约为0.5～0.8μm,最适培养条件为:NaCl 3%,30℃,pH=7.5;同源性比对结果表明,该菌株与多种涅斯捷连科氏菌的16SrDNA序列同源性高达99%。结合生理生化指标,初步确定DQ-1菌株可能是耐盐涅斯捷连科氏菌属的一个亚种。DQ-1产生的淀粉酶最佳反应条件为NaCl 2%、pH值在7～7.5、温度40℃,酶在0～12%的NaCl中具有活性,在pH值为5～12不失活,说明DQ-1产生的淀粉酶是一种能广泛耐盐碱的极端酶。     

大熊猫粪便微生物多样性分析及纤维素降解产氢菌的筛选鉴定

利用宏基因组测序技术对大熊猫粪便微生物进行了多样性分析,发现大熊猫粪便样品中含有大量可以降解纤维素的厌氧微生物种类,如梭菌科、瘤胃菌科和毛螺菌科等,因此,将熊猫粪便样品作为降解纤维素微生物菌种分离的来源具有可行性。采用刚果红染色法从大熊猫粪便样品中筛选具有降解纤维素产氢能力的菌株,分离获得1株纤维素降解产氢菌株Cel10,根据菌株的形态和生理生化特征并结合分子生物学,鉴定菌株Cel10属于缓纤维梭菌(Clostridium lentocellum),其16S rDNA序列的同源性为98%。菌株Cel10在pH 4.0～8.0、温度25～50℃范围内可以利用纤维素进行生长,其最适pH 7.0,最适生长温度37℃。本文丰富了大熊猫肠道纤维素降解菌的种类,为木质纤维素类农产品加工废弃物的开发和综合利用提供了良好的菌种资源和科学依据。     

萘并冠醚配合物[K（N15C5）2]2[Cd（SCN）4]CH2CL2的合成与晶体结构表征

研究了萘并15冠5与CdCl2·2．5H2O,KSCN的反应,得到标题配合物[K（N15C5）2]2[Cd（SCN）4]CH2Cl2,并通过元素分析、红外光谱、X-射线单晶衍射对配合物进行了表征．配合物为单斜晶系,空间群P^-1,晶体学数据：a=15．521（2）A、b=15．617（3）A、c=20．582（3）A,α=73．528（3）°、β=80．355（3）°、γ-61．295（2）°,V=4193．6（12）A3,Z=4,Dcaled=1．411Mg／m3,F（000）=1848,R1=0．0579,wR2=0．1227,R1=0．1757,wR2=0．1708．标题配合物由两个[K（N15C5）2]＋配阳离子和一个[Cd（SCN）4]2-配阴离子组成．两个N15C5分子和钾离子通过10个K—O键形成夹心式配位结构,[Cd（sCN）4]2-中的Cd2＋与四个NCS基团中的四个N配位,形成变形四面体结构．配阳离子子[K（N15C5）2]＋与配阴离子[Cd（SCN）4]2-通过静电作用形成中性配合物．     

不同小麦基因型愈伤组织诱导和植株再生能力的变异性研究

该项研究考查了39个冬小麦(Triticam aestivum L)基因型组织培养应用的可能性。组织培养材料是12日龄未成熟种胚。愈伤组织诱发在每升含有1.0mg2.4—D的改性Mwrashige和Skooge培养基上进行,在每升含有0.5mg2.4—D的同一培养基上进行培养。然后转移到2.4—D含量0.1毫克/升培养基上诱发茎,在不含2.4—D培养基上形成整株小麦。本研究对小麦不同基因型的愈伤组织诱导、愈伤再生体形成、(继代培养以及对分培的反应和再生植株的能力几方面的变异性作了观察。在4次分培(90—125)后,有18种基因型具有再生能力。240天后有五种基因型的培养材料仍保持全能性。420天后ND7532和Roughrider的组织培养物仍具全能性。选系ND7532,愈伤体诱导,愈伤再生体形成百分率、离体培养下的生长速度和具有全能性的愈伤组织的比率,均高于其他基因型。如果选用适当的基因型材料,是肯定能够由未成熟种胚组织诱导出来小麦植株的。本研究的结果,由愈伤组织再生出532株,其中510株结实。看来栽培小麦对组织培养中的反应因材料的基因型而异,因而适于用做组织培养的好品系是可以鉴选出来的。由禾谷类作物体细胞和性细胞形成植株的技术,为作物改良开拓了新的发展领域。目前,主要禾谷类作物的细胞培养,已经取得了不同程度的成功。这些禾谷类作物包括玉米、燕麦、珍珠粟、高粱、水稻、大麦和小麦。尽管如此,从体细胞愈伤体(Calli)形成大量的期望再生植株是困雄的,只在玉米和燕麦上有过报导。由作物组织培养形成大量再生植株,是作物改良运用的前提。植株细胞可在体外培养,且其再生株可育,这是禾谷类作物细胞水平上选种是否成功所必须具备的两个条件。六倍体小麦(2n=6×7=42)的许多组织能迅速形成愈伤组织,但其茎分化率低,据最近报导,由未成熟种胚培养再生植株成功,并观察在被试小麦栽培种中,形成愈伤组织的能力有差异。我们相信,既然观察到在组织培养或原生质体培养中有种内变异的存在,只要对大量的基因型进行试验一定能鉴定选出适于用作组织培养的小麦栽培品种。本研究的目的是探讨冬小麦基因型对离体培养的各种反应及由愈伤组织诱发、培养和再生为植株的技术。     

MnOx TiO2催化氧化NO及其抗H2O和SO2性能研究

采用浸渍法制备了MnOxTiO2催化剂,考察了Mn的质量分数、焙烧温度等催化剂制备参数以及反应温度、空速、氧含量、进口NO浓度等操作条件对催化剂催化氧化NO活性的影响.研究发现,锰的的质量分数为20%,焙烧温度为300 ℃时,催化剂具有最佳催化氧化活性．在优化催化剂在最佳操作条件下,探讨了MnOxTiO2催化剂抗SO2和H2O毒化能力。进行抗硫抗水时实验时发现,反应气中加入H2O后,NO氧化率稳定在68%,能满足NOx高效吸收的要求,断水后活性能完全恢复．催化剂在SO2单独存在和SO2、H2O同时存在时,活性均明显下降,发生不可逆中毒．该催化剂有望用于基本不含SO2的燃气锅炉烟气和以NO为主的工业废气的催化氧化．