家蚕抗菌肽CM4组分杀菌机理的激光共聚焦显微镜观察

报道了家蚕抗菌肽对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌的杀菌作用,用抗菌肽处理大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,与对照组相比,它们的OD值随时间明显下降,平板培养克隆数减少,以荧光素FTIC标记抗菌肽作用于大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌等细菌,用激光共聚焦扫描显微镜观察,发现抗菌肽迅速包围菌体,密集于细胞膜,损伤膜的完整性,出现大小不等的孔洞,菌体断裂,最后死亡,说明细菌结构是抗菌肽CM4攻击的首要靶位点。     

猪血中抗菌肽类物质的分离纯化和抗菌活性研究

利用酶解、脱色等技术,从新鲜猪血中分离提取抗菌肽,再经SephadexG-100凝胶层析纯化,收集各组分并检测其抗菌活性。采用琼脂糖弥散法检测猪血抗菌肽对大肠杆菌O88、金黄色葡萄球菌ACTT25923株、绿脓杆菌ACTT27853株、鸡巴氏杆菌、鸡致病性沙门氏菌自然分离株等5种细菌的作用;同时,采用扫描电镜观察了猪血抗菌肽与上述金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌共同培养20min后细菌形态结构的改变。结果表明,猪血抗菌肽对以上各种细菌均有不同程度的抑杀作用;扫描电镜观察发现,经抗菌肽作用20min后,这两种细菌的形态结构均发生了明显的改变,表现为细菌干瘪、皱缩、表面粗糙不平、分裂繁殖停止。这表明猪血抗菌肽不仅对供试细菌的形态结构有明显的损伤作用,同时还影响细菌的生长繁殖。     

大肠杆菌诱导黄粉虫产生抗菌肽的提取及抑菌活性的测定

为了探究大肠杆菌对黄粉虫抗菌肽的诱导效果,采用不同方法处理的大肠杆菌诱导黄粉虫产生抗菌肽,经过诱导的黄粉虫于12、24、36、48、60、72 h时,分别粗提其中的抗菌肽,测定其浓度和抑菌活性,同时,统计了大肠杆菌诱导的黄粉虫体内细菌含量。结果表明:经诱导各个时间点的黄粉虫抗菌肽浓度均显著高于未诱导的黄粉虫组(P0.05),且在诱导48 h时产生的抗菌肽浓度最高,大肠杆菌和灭活大肠杆菌诱导黄粉虫产生的抗菌肽对3种细菌的抑菌直径均显著大于未诱导组,且对大肠杆菌抑菌力高于金黄色葡萄球菌和沙门氏菌(P0.05),大肠杆菌诱导48 h后的黄粉虫中细菌含量为9.5×10~4 CFU/g,低于国家规定标准饲料中细菌总数最低值2×10~6 CFU/g。提示,用大肠杆菌诱导黄粉虫能刺激黄粉虫产生高表达量的抗菌肽,并对大肠杆菌具有较强的抗菌性能且具有一定的安全性。     

虎杖中大黄素的分离及抗菌活性的初步研究

采用pH梯度法提取虎杖中的大黄素，波谱分析鉴定其结构，然后用滤纸扩散法及薄层色谱自显影生物技术研究其对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、绿脓杆菌、草分枝杆菌的抗菌效果．结果显示：大黄素对这5种细菌均有抑制作用，其在薄层色谱板上最小的抑菌量分别是：金黄色葡萄球菌为2．35μg；大肠杆菌为75μg；枯草芽孢杆菌为4．7μg；绿脓杆菌为4．7μg；草分枝杆菌为18．8μg．     

沙葱多糖的体外抑菌试验研究

采用琼脂扩散法比较了沙葱多糖(SCSP)、沙葱鲜汁及黄芪多糖(HQSP)在体外对大肠杆菌、痢疾志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、绿脓杆菌、普通变形杆菌的抑菌作用.结果表明20 mg/mL和40 mg/mL的SCSP对以上6种细菌均有一定的抑制作用,但两者之间的作用效果无显著性差异(P>0.05),SCSP对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果较为明显,最大抑菌圈直径分别为13.3 mm、9.9 mm;HQSP对以上6种细菌均无任何抑制作用;沙葱鲜汁的抑菌效果最为显著,对6种细菌均有较强的抑制作用,抑菌圈直径均≥8 mm,尤其对肠道细菌痢疾志贺氏菌的抑菌效果更为显著,最大抑菌圈直径为21.2 mm.     

蛇含委陵菜提取物抑菌作用的研究

用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇对蛇含全草95%乙醇提取物进行分段萃取,采用大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、枯草杆菌、藤黄微球菌作为受试菌,测定各萃取部分的抑菌活性.结果表明,乙酸乙酯萃取物具有良好的抑菌活性,特别对金黄色葡萄球菌的抑制效果显著,最小抑菌浓度(MIC)≤0.33mg/mL.     

鹅掌楸树叶和树皮提取物的抑菌活性研究

林源生物活性物质的研究和利用是森林资源利用的重要方面。为研究重要的药源植物鹅掌楸属植物树皮及树叶提取物的抑菌活性,用琼脂稀释法检测鹅掌楸属不同种间和种内树皮及叶片提取物对大肠杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌和粪链球菌的抑菌反应。结果表明:鹅掌楸属3个树种的树皮和树叶提取物对大肠杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌和粪链球菌有明显的抑菌效果; 树皮提取物对大肠杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌及粪链球菌的最低抑菌质量浓度(MIC)分别为5.12、0.64、0.64 和0.64 mg/mL; 树叶提取物的MIC分别为40.96、2.56、2.56和2.56 mg/mL。鹅掌楸属树种不同部位的提取物抑菌效果有明显差别,树皮提取物抑菌效果强于树叶提取物,但不同种间提取物的抑菌效果差异不显著。     

抗菌肽Lc-NKlysin-1a的抗菌稳定性及其抗菌机理

Lc-NKlysin-1是从海洋鱼类——大黄鱼(Larimichthys crocea)中获得的抗菌肽,为进一步优化该抗菌肽和研究其结构与功能的关系,本文截取了其N末端的12个氨基酸残基,设计并合成了抗菌肽Lc-NKlysin-1a,同时,通过琼脂板打孔法,对其抗菌活性,不同温度、pH值、盐浓度等对其抗菌活性的影响,其溶血活性,最低抑菌质量浓度,其抗菌特征等进行了研究,并在扫描电镜下观察了其对细菌形态结构的影响.结果表明:抗菌肽LcNKlysin-1a对革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌)和革兰氏阴性菌(大肠杆菌、副溶血弧菌、铜绿假单胞菌、抗链霉素大肠杆菌)均具有抗菌活性;但对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和抗链霉素大肠杆菌的抗菌活性最好,其最低抑菌质量浓度(MIC)在15.62531.25μg·mL~(-1)之间;相对于Lc-NKlysin-1,Lc-NKlysin-1a的抗菌活性明显增强;Lc-NKlysin-1a在15.62531.25μg·mL~(-1)时,其溶血率为3.80%7.37%,溶血活性较低;Lc-NKlysin-1a对温度、pH和盐等具有良好的耐受性,且稳定性高.此外,通过扫描电镜还观察到,抗菌肽Lc-NKlysin-1a作用于细菌后细菌的形态发生了明显改变,其细胞膜出现了褶皱和塌陷的现象,最终导致了内溶物外泻而死亡.改造后的抗菌肽其相对分子质量小,活性高,稳定性强,更易于被开发成抗菌肽类药物.     

海洋噬菌蛭弧菌对对虾病原菌及其他细菌的寄生作用

用宿主双层琼脂平板法，测定海洋噬菌蛭弧菌对２５株对虾病原菌和大肠杆菌、枯草杆菌、绿脓杆菌及金黄色葡萄球菌的寄生作用，结果表明噬菌蛭弧菌菌株不同寄生的范围不同，但所有供试寄主细菌都能被某些蛭弧菌寄生，形成清晰的噬斑．用相差显微镜和电镜观察蛭弧菌的形态及噬菌过程     

薇甘菊提取物抑菌作用的初步研究

以薇甘菊（Mikania micrantha）提取物乙酸乙酯部分对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌进行抑菌试验.结果表明,薇甘菊提取物乙酸乙酯部分能有效地抑制细菌的生长,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度分别为5 %、10 %.     

韭菜汁分离提取物的抑菌作用研究

用D-101大孔树脂吸附层析法对韭菜汁进行初步分离,对韭菜原汁及其分离成分进行平板法体外抑菌实验.结果表明,韭菜汁对大肠杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌等4种供试菌都有抑制作用;大孔树脂分段分离成分中,蒸馏水洗脱成分对供试菌无抑菌能力,50%乙醇洗脱前段对供4种试菌均有较强的抑菌作用,95%乙醇洗脱段对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌有抑制作用.     

兔圆小囊组织中抗菌肽类物质的分离纯化及抗菌活性研究

成年健康家兔,经腹腔注射猪大肠杆菌刺激后,取圆小囊组织以捣碎机捣碎,沸水浴处理后,以5％乙酸提取,调整pH值后,经SephadexG100凝胶柱过滤层析,收集各组分并用琼脂糖弥散法检测各组分的抗菌活性,获得纯化的抗菌肽类物质。纯化物经Tricine SDS-PAGE,银染后分析为一条蛋白带,分子量约为7000Da左右,经超滤分析,纯化物的分子量大于3000Da。抗菌肽粗提物和纯化物经体外抗菌实验,对大肠杆菌（078）、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌均表现出较强的抗菌活性。     

亚洲飞蝗抗菌肽的提取及其部分理化特性的研究

为了研究大肠杆菌、葡萄球菌以及混合菌(大肠杆菌和葡萄球菌)对亚洲飞蝗抗菌肽的诱导效果及其部分理化特性,本试验采用浓度为1×108CFU/m L的大肠杆菌、葡萄球菌、混合菌分别诱导亚洲飞蝗幼虫,诱导24 h后粗提抗菌肽,用考马斯亮蓝法测定抗菌肽提取液的浓度,并对其热稳定性、反复冻融稳定性及不同p H对其活性的影响进行了研究。结果显示:用细菌诱导的亚洲飞蝗幼虫产生抗菌肽的浓度均显著高于未诱导的亚洲飞蝗组(P0.05),并且具有较好的热稳定性(100℃时,抑菌率为82.65%)和耐受酸碱的稳定性(p H 1-7时,抑菌率均在92.97%以上)以及反复冻融与低温保存性(冻融6次以内的抗菌肽与未经冻融组差异不显著(P0.05))。     

新型胆酸缩氨基硫脲衍生物的合成与抗菌活性研究

通过甾酮与取代氨基硫脲缩合,合成了一系列新型的胆酸缩氨基硫脲衍生物.其结构均经1H NMR,IR,ESI-MS及元素分析所证实.此外,所有目标化合物都进行了对金黄色葡萄球菌,枯草芽孢杆菌,绿脓杆菌,大肠杆菌的抗菌活性测试.化合物4b,4g和4h对绿脓杆菌和大肠杆菌都具有良好的抑制效果.     

蝇蛆抗菌肽对小鼠金黄色葡萄球菌性乳腺炎治疗效果的研究

目的研究蝇蛆抗菌肽对小鼠金黄色葡萄球菌性乳腺炎的治疗效果。方法本试验采用金黄色葡萄球菌诱导蝇蛆,从蝇蛆中提取抗菌肽并用于治疗金黄色葡萄球菌性乳腺炎。采用分娩后6～8 d的BALB/C雌鼠120只,随机分组:空白对照组、生理盐水治疗组、抗生素治疗组和抗菌肽治疗组,每组30只。空白对照组不做处理,另外3组用金黄色葡萄球菌感染小鼠建立小鼠乳腺炎模型,建模成功后,各试验组使用相对应的药物连续治疗7 d,并于第3、5、7天每组分别断颈处死10只小鼠,观察小鼠乳腺病理组织及HE染色切片,测定小鼠乳腺组织中TNF-α含量和金黄色葡萄球菌数量。结果经过金黄色葡萄球菌诱导产生的抗菌肽浓度显著高于未诱导组(P0.05)、对金黄色葡萄球菌具有较强的抑菌活性、对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为1.5 mg/L,蝇蛆抗菌肽可显著抑制小鼠乳腺组织中金黄色葡萄球菌的生长(P0.05)、降低乳腺组织的损伤和极显著下调TNF-α的含量(P0.01)。结论蝇蛆抗菌肽对小鼠金黄色葡萄球菌性乳腺炎治疗有一定治疗效果。     

负载黄酮类药物细菌纤维素的抑菌效果的研究

为了探究负载黄酮类药物细菌纤维素的抑菌效果,实验采用平板划线法与涂布平板法,分离提纯得到大肠杆菌与金黄色葡萄球菌的单菌落进行培养;抑菌实验方法为抑菌圈法,用负载黄酮类似物的细菌纤维素膜放置在涂布好实验细菌的培养基中培养得抑菌圈。研究表明:负载黄酮类药物(槲皮素、桑色素及黄芩素)细菌纤维素膜对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有良好的抑菌效果。     

猪小肠抗菌肽的提取及部分生物学活性研究

将新鲜猪小肠超声破碎,经高温处理、乙酸浸提后,再经Sephadex G100和Sephadex G25凝胶柱过滤层析,收集各组分并用琼脂糖弥散法检测各组分的抗菌活性。收集具有抗菌活性的组分,经Tricine SDS-PAGE,考马斯亮蓝染色后分析为一条蛋白带,分子量约为5972Da左右,得到电泳纯的猪小肠抗菌肽。该抗菌肽对大肠杆菌C84008株、金黄色葡萄球菌ATCC25923株、绿脓杆菌ATCC27853株均表现出较强的抗菌活性;并能灭活鸡传染性支气管炎病毒。     

红花羊蹄甲抑菌活性的研究

红花羊蹄甲花提取物对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和土壤中的一些细菌均有抑菌效果,随着羊蹄甲花提取物浓度的增加,其对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌的抑茵作用增强,呈一定的剂量依赖性.在同等浓度下羊蹄甲花提取物对金黄色葡萄球菌的抑菌效果最好,抑菌圈可达13.0mm,其次是枯草芽孢杆菌,抑茵圈可达到9.0mm,然后是大肠杆菌,抑茵圈为7.4mm.最后找出羊蹄甲花对这些细菌的最低抑茵浓度.红花羊蹄甲花提取物对米曲霉、黑曲霉无抑菌效果.     

凤尾蕨体外抑菌活性研究

研究凤尾蕨不同提取物及萃取物对细菌和真菌的活性作用;将凤尾蕨不同溶剂提取物利用倍比稀释法测定其体外抑菌活性,并对具有抑菌活性的提取物用系统溶剂法进行萃取,测定萃取物的抑菌活性;结果表明,50%的乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、痢疾杆菌有一定的抑菌活性,其乙酸乙酯萃取物对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和痢疾杆菌有较强的抑制作用,其氯仿层也对痢疾杆菌有较强的抑制作用。     

北豆根生物碱抑菌作用的微量量热法研究

从中药北豆根中提取北豆根生物碱.应用微量量热仪分别测定了不同浓度的北豆根生物碱对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌代谢作用的热功率—时间曲线,运用Logistic方程计算出细菌的生长速率常数,建立了生长速率常数与药物浓度间的关系,进而确定了最佳抑菌浓度.北豆根生物碱对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌的最佳抑菌浓度分别为0.7977mg/mL、0.2089mg/mL、0.1129mg/mL.通过对三个最佳抑菌浓度数据的比较,可知北豆根生物碱对三种细菌抑制效果为:枯草杆菌金黄色葡萄球菌大肠杆菌.