涡虫成体干细胞研究进展

干细胞研究是当代生命科学研究的重点和热点之一,涡虫因具有结构简单、再生速度快、基因与脊椎动物同源性高等特点而成为研究再生的良好动物模型.涡虫的这种再生能力与其体内具有被称为neoblasts的多能干细胞群有关.文中结合近几年的研究成果从neoblasts与涡虫的再生关系、neoblasts的分子标记及研究方法3个方面进行综述,以促进neoblasts的研究.     

诱导性多能干细胞的研究概况

诱导性多能干细胞（induced pluripotent stem cells,iPS细胞）是通过在分化的体细胞中表达特定的几个转录因子,以诱导体细胞的重编程而获得的可不断自我更新且具有多向分化潜能的细胞。诱导性多能干细胞具有获取方便、能向各类细胞分化及无限增殖等特性。本文就诱导性多能干细胞的产生、制备技术的优化及应用前景等方面作一概述。     

N,N二甲基甲酰胺对东亚三角涡虫的毒性效应

目的 研究水体中二甲基甲酰胺(DMF)对东亚三角涡虫的毒性作用.方法 急性毒性实验检测DMF对涡虫形态、死亡率的影响；抗氧化酶活力测定实验检测DMF对涡虫体内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力的影响；彗星实验检测DMF对涡虫DNA的损伤.结果 随着DMF浓度的增加和...     

诱导性多能干细胞研究及应用

诱导性多能干细胞（iPS细胞）是通过向体细胞中导入Oct4,Sox2,c-myc和KU4等基因,使体细胞重编程获得具有胚胎干细胞样特性的多能干细胞．iPS细胞的产生可谓干细胞领域的新里程碑．近两年,iPS细胞的研究突飞猛进,文中结合最新的研究结果,综述了iPS细胞的研究现状、进展,如新的iPS细胞诱导方法的建立、诱导iPS细胞产生效率的提高、iPS细胞的定向诱导分化及其在疾病模型治疗中的作用等．针对iPS细胞研究领域存在的问题,包括如何提高iPS细胞生成的效率、解决其临床应用的安全性、iPS细胞重编程的机制等进行了讨论,为今后进一步开展iPS细胞的研究提供了帮助．     

诱导性多能干细胞研究及应用

诱导性多能干细胞(iPS细胞)是通过向体细胞中导入Oct4,Sox2,c-myc 和 Klf4 等基因,使体细胞重编程获得具有胚胎干细胞样特性的多能干细胞.iPS细胞的产生可谓干细胞领域的新里程碑.近两年,iPS细胞的研究突飞猛进,文中结合最新的研究结果,综述了iPS细胞的研究现状、进展,如新的iPS细胞诱导方法的建立、诱导iPS细胞产生效率的提高、iPS细胞的定向诱导分化及其在疾病模型治疗中的作用等.针对iPS细胞研究领域存在的问题,包括如何提高iPS细胞生成的效率、解决其临床应用的安全性、iPS细胞重编程的机制等进行了讨论,为今后进一步开展iPS细胞的研究提供了帮助.     

日本三角涡虫肠上皮的超微结构

用透射电镜镜研究了日本三角涡虫(Dugesiajaponica)肠上皮的超微结构,结果表明:肠上皮由两类细胞构成,一类为电子密度高深染的细胞,另一类为电子密度低浅染的细胞;深染的细胞没有突向肠腔,内有大小不一的未着色和深染的囊泡;浅染的细胞游离面呈不规则样突向肠腔,也含有很多大小不一的未着色和浅染的囊泡;浅染的细胞中可...     

东亚三角涡虫新基因Dj_UF-1功能分析

为进一步完善东亚三角涡虫(Dujesia japonica)基因数据信息,对东亚三角涡虫新基因Dj_UF-1进行生物信息学分析和表达水平检测.分析结果显示,该基因包含450bp的开放阅读框,编码149个氨基酸,Dj_UF-1蛋白分子量为17 179.8D,等电点为8.03.蛋白质三级结构预测发现Dj_UF-1与LYNX 1相似度较高.实时定量PCR结果表明,Dj_UF-1基因在东亚三角涡虫头部的表达量高于其在尾部的表达量.推测Dj_UF-1基因是东亚三角涡虫神经系统相关基因,Dj_UF-1为类LYNX 1蛋白.     

一种三维测量和检验枪弹痕迹的方法

枪弹痕迹是典型的立体痕迹，但在传统检验过程中由于设备等因素的限制通常不能充分利用立体痕迹中所包含的全部信息。随着近年来三维扫描技术的发展，立体痕迹已经可以数据化，这为新检验方法的出现提供了基础。本文利用激光扫描共聚焦显微镜采集了射击弹头弹壳上立体痕迹的三维数据，并在此基础上提出了一种对其进行三维测量及检验的方法。这种方法相对于传统方法而言使用了更多立体痕迹中的信息，同时由于检验过程的全程数字化，在理论上也具有更高的可靠性。如果一些相关的技术性问题得以解决，这种测量检验方法的应用前景将十分广阔。     

中国淡水三角涡虫种群间的亲缘关系分析

利用RAPD分子标记技术对中国8个产地淡水三角涡虫种群进行亲缘关系分析．筛选出13个合适的随机引物对8产地涡虫种群基因组进行PCR扩增,共产生137个扩增片段,平均每个引物扩增出10．5个片段,片段大小在3002000bp之间．不同涡虫种群间遗传距离变化较大,种群间最大遗传距离为0．4818,最小遗传距离为0．0876,平均遗传距离为0．3845;UPGMA法聚类分析表明：8产地涡虫种群可聚为3个聚类群,其中贵州遵义凤凰山和江苏太湖东山岛的涡虫种群间亲缘关系最近,安徽合肥龙泉山的涡虫种群与其他产地种群的亲缘关系最远．本研究表明上述8产地三角涡虫种群有明显的遗传分化,且种群间的亲缘关系与地理距离没有显著相关性．     

日本三角涡虫单克隆群体的繁殖技术

日本三角涡虫是扁形动物门涡虫纲的代表动物,其独特的结构和极强的再生能力在研究胚胎发育和细胞分化中受到重视。但作为实验材料其个体较小,要取得足够量的组织存在困难,是研究工作中存在的问题。由于涡虫在受伤或被截断后,可以依赖体内的副胚层干细胞完整再生,因此,利用人工切割和饲养的方法可以培养大量的单克隆涡虫品系。研究目的在于建立涡虫单克隆群体的养殖体系标准,为后续的基因组和蛋白质组研究工作提供了依据。     

诱导性多能干细胞的发展及前景展望

近年来,通过转入特定基因诱导体细胞重编程成为多能干细胞（iPS细胞）的研究成果引起了生命科学领域新的轰动。将完全分化的细胞重编程。不经过胚胎逆转为多能干细胞状态,这种方法相对容易操作,比较稳定,在生物学基础研究和临床应用方面都具有潜在的实用价值。与胚胎干细胞（ESC）相似,iPS细胞对于生物制药品种的更新和产生等十分有益。iPS细胞的产生对解决长期以来干细胞研究领域的伦理问题和免疫排斥问题具有十分重要的意义。然而,目前iPS技术仍然存在致癌性、效率低、病毒载体欠安全以及移植后存活率低等一系列问题。本文从iPS细胞的发展、获得、存在的问题以及发展前景4个方面进行了介绍。     

温度对日本三角涡虫眼点再生速度的影响

将耳突后切割去头的日本三角涡虫(Dugesia japonica)分别置于16℃、18℃、20℃、22℃、24℃、26℃和28℃条件下培养,在体视显微镜下观察不同温度条件下眼点的再生情况,发现日本三角涡虫眼点再生的最适温度是22℃.通过石蜡切片对22℃培养的涡虫眼点的再生情况进行组织学研究,结果表明:涡虫去头培养第3d新生组织基部分化出视色素细胞团,随着再生进程视杯逐渐变大.     

诱导肿瘤细胞HeLa为多能性干细胞的研究

将携带4种转录因子的逆转录病毒共同感染HeLa细胞,感染后的细胞铺到滋养层细胞MEF上培养,细胞长出类似胚胎干细胞的克隆团,这种克隆团可以扩增,并进一步诱导分化为神经元,同时免疫荧光检测细胞分化不同天数后Pax6,Sox1和βⅢ-tubulin的表达.结果表明,肿瘤细胞HeLa在Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4等4种转录因子的作用下成功重编程为多能干细胞,同时可进一步分化为神经元.     

激光扫描共聚焦显微镜实验技术与应用

该文从激光扫描共聚焦显微镜的工作原理、主要功能、样品制备方法和仪器使用管理等方面阐述了激光扫描共聚焦显微镜技术及其应用,帮助实验工作者了解和掌握该技术,使他们能够熟练使用该仪器进行科学实践与研究。     

河南两产地日本三角涡虫的染色体和核型多样性分析

利用空气干燥法对采自河南省桐柏县西小河和三里岔村两产地日本三角涡虫(Dugesia japonica)的染色体和核型进行了研究,结果表明:日本三角涡虫西小河种群的体细胞中染色体数目以16条为主,少数为24条和25条,分别占86.67%、6.07%和7.26%,染色体基数为8,为2倍体、3倍体和3倍性非整倍体的混合体,核...     

硬度试验过程中试样表面质量的获取方法

通过定量分析不同粒度水砂纸磨光后在钢试样表面造成的表面质量差异,找到适合不同硬度试验需要的表面质量的具体获取方法。     

涡虫整体原位杂交方法的优化改良

从原位杂交样品的预处理、固定液选择、杂交温度和时长选择、封闭时长等方面对日本三角涡虫整体原位杂交技术进行优化改良。实验表明,采用 NAC 处理 10 min、w=4%的多聚甲醛溶液固定、56oС 杂交 48 h 以及封闭 3 h 的改良方法可获得高特异性、低背景且着色清晰的实验结果。     

甲基对硫磷诱发大鼠肝细胞内钙浓度升高的初步机制研究

应用激光扫描共聚焦显微镜观察甲基对硫磷(M ETHYLPARATH ION,MP)对正常大鼠肝细胞株(BRL)内游离钙浓度([CA2 ]I)的影响。实验结果表明,在正常生理盐溶液(N-PSS)中,MP能引起细胞内的钙升高,并呈浓度依赖性;在无钙生理盐溶液(0 CA2 -PSS)中,400 PMOL/L MP不显著改变细胞内的钙浓度。用不同的非选择性阳离子通道阻断剂(300ΜMOL/L GD3 ,2 MMOL/L SR2 ,2 MMOL/L N I2 )作用于由MP引起的钙升高时,发现均能有效地抑制钙升高,其中N I2 的抑制效果最为明显。同时MP引起的钙升高的时程远远大于ATP的作用。以上结果显示,MP对BRL细胞胞内的CA2 具有升高作用,此作用可能是MP激活非选择性阳离子通道,并最终导致细胞膜上的其它钙离子通道开放。     

西班牙科学家用头发培育出多能干细胞

诱导式多能干细胞具备人体胚胎细胞和成熟细胞两种干细胞在医学应用方面的优点，但是其培育过程却十分困难且低效。巴塞罗那再生医学中心的科学家采用新方法，用一根头发就可以获得诱导式多能干细胞，将这种细胞培育过程效率提高了100倍，而且这种多能干细胞的增殖能力和发育的多样性与胚胎细胞不相上下。     

鲇脑垂体发生形态学的光镜和激光扫描共聚焦显微观察

应用光镜和激光扫描共聚焦显微镜时鲇脑垂体发生形态学进行观察：鲇脑垂体由两个不同部位的胚胎细胞形成,原始口腔背壁外呸层分离出来的细胞构成腺垂体的前外侧部(RPD)和中外侧部(PPD),从间脑腹面漏斗体分离出来的细胞卡构成腺垂体中间部(PI)及神经垂体．3d龄仔鱼脑垂体的形态业已建成,属前后型．5d龄仔鱼脑垂体可区分出神经垂体及腺垂体,腺垂体可区分出RPD、PPD、和PI3个区域,并开始出现毛细血管．此时,PPD内的生长激素(GH)细胞已经分化．11d龄稚鱼脑垂体中除PPD内GH细胞已分化外,未见其它促激素分泌细胞分化．15d龄稚鱼脑垂体PPD内的促肾上腺皮质素(ACTH)细胞及催乳激素(PRL)细胞已分化．20d龄稚鱼脑垂体内各种激素分泌细胞完全分化．11d龄以前仔鱼脑垂体属前后型,15d龄和20d龄的稚鱼脑垂体内RPD、PPD和P13部分呈直状排列．性成熟鲇脑垂体结构旱背腹型．