青钱柳离体胚的培养及快速繁殖

以青钱柳离体胚为材料,采用正交试验设计对影响其萌发、快速成苗的各种因素进行研究,并进行了诱导增殖试验.结果表明,基本培养基种类是影响青钱柳离体胚萌发和成苗最关键的因素.离体胚萌发的最佳培养基组合为WPM GA3(10 mg/L) 蔗糖(30 g/L),萌发率可达100%;适宜成苗的培养基组合是WPM GA3(5 mg/L) 麦芽糖(30 g/L),培养60 d的无菌苗移栽成活率为100%;最适的增殖培养基为WPM 6-BA(0.5 mg/L),平均增殖系数为3.45.     

葡萄幼胚培养技术的研究(Ⅱ)——接种时间及处理方法对胚培养的影响

选用花后35￣60d的巨峰、里扎马特和无核白葡萄,取其幼胚接种于不同激素水平M S培养基上,进行胚培养,以研究接种时间及处理方法对胚培养的影响.结果表明对花后60d的里扎玛特和巨峰的幼胚进行胚培养,其发芽率和成苗率显著高于层积处理后催芽播种的种子的发芽率与出苗率.低温和横切处理能有效地促进葡萄幼胚的萌发.花后60d的巨峰和里扎马特的发育率和成苗率最高;花后60d的无核白的幼胚发育率最高,花后50d的幼胚成苗率最高.     

无核白葡萄胚挽救机理的研究

选用无核白葡萄在开花后35￣60d,取其胚接种在含有GA3+IAA+6-BA的不同激素水平MS培养基上,进行胚挽救,以探讨研究无核葡萄的胚挽救机理.结果表明无核白在开花后50d胚挽救效果最好.在附加GA30.5mg.L-1+IAA1.5mg.L-1+6-BA 0.5mg.L-1的MS培养基上得到了84%的发育率和31.9%的成苗率(50d);开花后60d的发育率最高,得到了100%的发育率,却未得到成苗,说明在胚挽救中幼胚的不同部位其发育与败育过程不同步.对无核葡萄胚挽救适期的确定依据提出了新的见解.     

巨峰葡萄胚培养技术的研究

选用巨峰葡萄在花后35～60 d,取其胚接种在含有GA3I、AA、6-BA的不同激素水平MS培养基上进行胚挽救,以研究葡萄的幼胚培养技术.结果表明,巨峰葡萄在花后60 d效果最好.在附加GA30.5 mg/LI、AA1.0 mg/L、6-BA0.5 mg/L的最佳培养基上得到了(76.0±16.7)%的发育率和(69.1±13.1)%的成苗率.     

以红宝石无核葡萄为亲本胚挽救育种技术的研究

为了提高无核葡萄胚挽救中幼胚的成苗率,对以红宝石无核葡萄为母本,巨玫瑰、玫瑰香和希姆劳特葡萄为父本的杂交胚珠进行胚挽救,分析不同父本、取样时间和培养基对杂交胚珠胚挽救效果的影响.结果表明,在胚的离体培养中,以巨玫瑰葡萄作父本更有利于胚的发育和萌发,红宝石无核×巨玫瑰、红宝石无核×希姆劳特和红宝石无核×玫瑰香杂交胚珠的最佳取样时期均为授粉后61 d,相应的胚萌发率分别为20.55%、6.56%和9.60%.分析不同发育培养基和萌发培养基对胚挽救效果的影响,适合红宝石无核×希姆劳特和红宝石无核×玫瑰香杂交胚发育的为N1培养基(Nitsch+1.5 mol/L IAA+0.5 mol/L 6-BA+0.5 mol/L GA3+60 g/L蔗糖+5 g/L琼脂+1 g/L活性炭,pH值为5.8),胚发育率分别为8.00%和13.92%.适合胚萌发成苗的为W1培养基(WPM+0.2 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖+5 g/L琼脂+1.5 g/L活性炭,pH值为5.8).通过根尖染色体倍性鉴定,确定红宝石无核×巨玫瑰的9株杂交幼苗中,4株为三倍体幼苗,5株为二倍体幼苗.     

葡萄幼胚培养技术的研究(Ⅰ)——激素对胚培养的影响及培养基的筛选

选用巨峰、里扎马特和无核白葡萄的幼胚接种在附加了GA3、IAA、6-BA等的不同激素水平的MS培养基上进行培养,结果表明花后60d的巨峰和花后50d的无核白的幼胚在附加GA30.5mg.L-1、IAA2.0mg.L-1、6-BA0.5mg.L-1的培养基上分别得到了44.0±8.9%和96.0±8.9%的发育率与31.9±6.4%和37.5%的成苗率;花后60d的里扎马特幼胚在附加GA30.5mg.L-1、IAA0.5mg.L-1、6-BA0.5mg.L-1的培养基上得到了76.0±8.9%的发育率和63.5±5.5%的成苗率.筛选出了适合不同品种的最佳胚培养、萌发以及成苗培养基,为葡萄新品种的选育提供了新的方法与技术依据.     

珙桐未成熟胚的萌发及植株再生的研究

为了建立珙桐的再生体系,试验以珙桐未成熟胚为外植体,获得了再生植株。采用正交设计和极差分析法对影响未成熟胚再生植株的四种主要因素α-萘乙酸(α-Naphthaleneacetic acid,NAA)、噻苯隆(Thidiazuron,TDZ)、赤霉素(gibberellic acid,GA)和活性炭(active carbon,AC)进行了研究。结果表明:胚萌发的最佳培养基组合为WPM+0.09mg/L NAA+0.6mg/L TDZ+0.9 mg/L GA+0.8g/LAC,芽诱导率为71.43%;萌发胚芽分化及生根的最佳培养基组合为WPM培养基+0.1mg/L NAA+3mg/L TDZ+6mg/L GA+1.2g/LAC,再生率为50%。AC能促进下胚轴变绿和子叶变绿,NAA、GA对解除胚的形态后熟有重要作用。GA和TDZ在芽分化及生根过程中起主导作用。     

红宝石无核和希姆劳特葡萄杂交胚挽救技术研究

为了优化无核葡萄杂交胚的离体培养条件,分别以种子败育型无核品种红宝石无核和希姆劳特为父、母本杂交和自交胚珠的材料,进行亲本基因型、取样时期、发育培养基、萌发培养基对无核葡萄胚挽救效果影响的研究.结果显示:红宝石无核与希姆劳特正反交时,以红宝石无核作母本时杂交胚的发育率和萌发率均高于以希姆劳特作母本的杂交胚;红宝石无核自交胚的发育率和萌发率高于希姆劳特自交胚;红宝石无核×希姆劳特杂交胚珠和红宝石无核自交胚珠的最佳取样时期均为授粉后61 d,希姆劳特×红宝石无核杂交胚珠和希姆劳特自交胚珠的最佳取样时期均为授粉后54 d.适合于红宝石无核×希姆劳特和希姆劳特×红宝石无核杂交胚发育的培养基为:Nitsch+1.5 mol/L IAA+0.5 mol/L 6-BA+0.5 mol/L GA3+60 g/L蔗糖+5 g/L琼脂+1 g/L活性炭,胚发育率分别为8.40%和8.30%;适于红宝石无核×希姆劳特和希姆劳特×红宝石无核杂交胚萌发的培养基为:WPM+0.2 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖+5 g/L琼脂+1.5g/L活性炭,萌发率分别为7.32%和6.12%.     

里扎马特葡萄胚培养技术的研究

选用里扎马特葡萄在花后35～60 d,取其胚接种在含有GA3、IAA、6-BA的不同激素水平MS培养基上,进行胚培养,以研究里扎马特葡萄的胚培养技术.结果表明,里扎马特葡萄胚在花后60 d培养效果最好,在附加GA30.5 mg/L、IAA1.5 mg/L的MS培养基上得到了(84.0±8.9)%的发育率和(76.7±2.9)%的成苗率(p<0.01).     

营养成分对‘安陆1号’银杏胚离体培养成苗的影响

以‘安陆1号’品种银杏胚为材料,探讨基本培养基及外源添加物对银杏胚离体萌发成苗的影响.结果表明:‘安陆1号’银杏胚在基本培养基N6中最易萌发成苗,其成苗率达到36.7%; N6中加入适宜添加物椰子乳、活性炭、水解酪蛋白和银杏胚乳汁均能更有效促进胚萌发和成苗;其中0.5 g/L水解酪蛋白的促进效果最好,银杏胚离体萌发的成苗率达到92.8%,平均株高达到4.1 cm,且幼苗健康粗壮,为‘安陆1号’银杏胚的离体萌发成苗提供了技术可能.     

不同浓度GA3对萝卜和玉米种子发芽率及幼苗生长的影响

为了研究微生物代谢产物赤霉素GA3对萝卜和玉米种子发芽率及幼苗生长的影响,采用不同浓度的GA3对萝卜、玉米种子及幼苗进行处理,研究结果表明:GA3浓度为10～40mg/L时对萝卜的发芽率和幼苗生长有促进作用,其中20mg/L时发芽率最大,为84%;10mg/L时对幼苗生长促进效果最好.5～40mg/L时对玉米幼苗高度有促进作用,其中30mg/L时对玉米幼苗高度的促进作用最大,5～10mg/L时对玉米幼苗地上部分干鲜重促进作用最大,20mg/L时对玉米幼苗根部干鲜重促进作用最大.结论:适当浓度的GA3对提高萝卜种子发芽率有促进作用;10～40mg/L的GA3处理后的萝卜和玉米幼苗均表现为促进生长.     

不同外源激素处理对长白松种子发芽能力的影响

选用不同浓度吲哚丁酸、萘乙酸及赤霉素浸种1,2 h,对长白松种子进行预处理,以清水浸种2 h为对照,试验分析预处理后长白松种子的萌发状况.结果表明:长白松种子经不同外源激素处理后发芽率、发芽势明显提高.其中,以100 mg/L的IBA浸种2 h长白松种子的发芽效果最好,发芽率为53.66%,发芽势为12.33%,发芽指数为38.15.     

三裂叶瓜木萌动芽快速繁殖的研究

以三裂叶瓜木的萌动芽为材料,进行了萌动芽的生长、生长芽的生根、试管苗的生根继代增殖、移栽和定植的研究,建立起三裂叶瓜木的快速繁殖技术.结果证明:1/2MS+ZT 0.3 mg/L+GA30.8 mg/L+IAA 0.1～0.3 mg/L是萌动芽生长培养的理想培养基;1/4MS+ABT 2号1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L是试管苗生根培养和试管苗生根继代增殖培养的理想培养基.试管苗移栽成活率为93.7%,定植成活率为97.9%,定植的试管苗保持了三裂叶瓜木的所有植物学性状.     

碳源对不同产地香樟体细胞胚胎发生及植株再生的影响

【目的】 探究渗透调节物质种类及其不同浓度对香樟体细胞胚胎发生及植株再生的影响,为提高香樟体胚诱导率、优化体细胞胚胎发生体系奠定理论基础。【方法】 以7月初在湖南省郴州、长沙、娄底及怀化市采集的香樟(Cinnamomum camphora L.)的未成熟合子胚为试验材料,分析不同碳源种类、浓度及组合方式对香樟体胚诱导、芽萌发、生根等方面的影响。【结果】 适合香樟的体胚诱导培养基为MS+1.0 mg/L的6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)+0.3 mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)+1.0 mg/L 链霉素+15 g/L 蔗糖+30 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂+700 mg/L水解酪蛋白;增殖培养基为MS+15 g/L 蔗糖+30 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂+700 mg/L 水解酪蛋白;芽萌发培养基为MS+0.1 mg/L 苯基噻二唑基脲(TDZ)+0.5 mg/L 萘乙酸(NAA)+0.1 mg/L 吲哚丁酸(IBA)+15 g/L 蔗糖+15 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂;生根培养基为MS+1.0 mg/L IBA+15 g/L 蔗糖+15 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂。【结论】 经过改良,添加15 g/L蔗糖和30 g/L山梨醇的组合碳源,香樟体胚的诱导率明显提高;添加15 g/L蔗糖和15 g/L山梨醇的组合碳源处理的新植株生根条数多、主根明显,生长状况更优。     

芒萁组培技术体系的优化

【目的】芒萁(Dicranopteris pedate)是尾矿及酸性边坡修复的优良植物。优化芒萁组培技术,提高组培效率,可为困难立地修复提供大量芒萁孢子体。【方法】以芒萁孢子为外植体,研究外植体收集时间、消毒时间与孢子萌发率的关系;通过改变培养基中无机盐浓度、蔗糖浓度及植物生长调节剂类型及浓度,研究孢子萌发、原叶体增殖、孢子体生成3个过程的最佳培养基配方。【结果】春季2—4月采集的芒萁孢子萌发活性最强;孢子诱导萌发最佳处理为DKW+5%(质量分数) NaClO消毒15 s,萌发率97.15%,20 d原叶体可见;原叶体最佳增殖培养基为1/2 MS+蔗糖5 g/L+6-BA 0.5 mg/L+KT 0.5 mg/L,30 d质量增殖倍数为7.28;孢子体诱导生成最佳培养基为1/2 MS+蔗糖30 g/L+NAA 1.0 mg/L,第8天孢子体即可产生,生成率53.33%。【结论】芒萁孢子活性与生长区域、生成月份存在关联性,广州地区3月的孢子活性最强;在幼孢子体的瓶苗生成率较低的情况下,研发原叶体绿色球状体(prothallus green globular body, PGGB)高效增殖...