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1.
米曲霉(Aspergillus oryzae)植酸酶的分离纯化及性质研究 总被引:5,自引:0,他引:5
从5株霉菌中筛选出1株产胞外植酸酶最高的菌株(Aspcrgillusoryxae;简称霉菌3号)。经发酵,硫酸铵分级沉淀,Sephadex G—100凝胶过滤、SE—Sephadex G—50层析和电泳分离,获得2种植酸同工酶.此两种酶的分子量为40000d,等电点分别为4.5和4.8,最适pH为2.7和5.6,最适温度为50℃,K_m值为50μmol/L。SDS、Fe_~(2+)对酶活力无影响;Mn~(2+)、Ca~(2+)、Mg~(2+)有激活作用;Cu~(2+)有抑制作用。 相似文献
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为了解米曲霉纤维素酶在物料分解过程中的作用,从米曲霉沪酿3.042成曲中提取粗酶液,利用DNS法分析了粗酶液中外切酶、内切酶及β-葡萄糖苷酶的活力.用刚果红染色法确定了沪酿3.042成曲粗酶液中含有4种内切型纤维素酶,分别称为Cx酶Ⅰ,Cx酶Ⅱ,Cx酶Ⅲ和Cx酶Ⅳ.经DEAE-Cellulose-52离子交换层析,0.15,0.20,0.25,0.30mol/L NaCl洗脱峰均测得内切型纤维素酶活性,制备电泳纯化得到4个内切型纤维素酶组分,SDS-PAGE结果显示,Cx酶Ⅰ,Cx酶Ⅱ,Cx酶Ⅲ为单体酶,分子质量分别为31 800,34 000,26 000u,Cx酶Ⅳ含有4个亚基,分子质量分别为14 000,23 600,26 000,33 500u.粗酶液中内切型纤维素酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH值为4.0. 相似文献
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宇佐美曲霉Y—26纤维素酶的纯化及酶学性质 总被引:13,自引:1,他引:12
从宇佐美曲霉 (A .usamii)固态发酵物中提取纤维素酶。粗酶液经硫酸铵盐析除去大量杂蛋白 ,然后通过 2次SephadexG - 2 0 0柱层析纤维素酶中CMC酶 ,提纯倍数可达 5 72。酶学研究表明 ,纤维素酶中CMC酶最适作用温度为 6 0℃ ,最适作用pH为 4.0 ,30~ 6 0℃区间酶活力较稳定 ,在pH为 3 .0~ 5 .0范围内 ,5 0℃保温 30min ,能保持 90 %的酶活力。红外光谱分析表明 ,纤维素酶在O—H ,N—H ,C—H ,CO有吸收带。CMC酶的Km、vmax 值分别为 0 10 g/ml、0 40mg/(ml·min)。 相似文献
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米曲霉β—半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖 总被引:7,自引:0,他引:7
归莉琼 《华东理工大学学报(自然科学版)》1998,24(4):422-426
研究了温度、PH酶量和起始乳糖浓度对低聚半乳糖合成的影响,发现乳糖水解为单糖和合成低聚糖所需的最佳条件并不相同; 相似文献
6.
在米曲霉最佳的自溶条件下,对其自溶过程中重要的细胞物质及酶进行了测定,结果自溶液中测出17种氨基酸酸,总氨基酸释放率为68.79%,核酸释放率为50.00%,糖的释放率为24.58%,酸性蛋白酶活性高,而5’-磷酸二酯酶活性较低。 相似文献
7.
借助电子显微镜对自溶的米曲霉菌丝细胞的结构进行观察.结果发现,自溶开始后,菌丝细胞发生质壁分离,核及各种细胞器被破坏,质膜破裂,细胞壁上出现孔隙,细胞物质通过孔隙释放出来 相似文献
8.
分离筛选脱菜籽饼中芥子甙毒素菌株的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
周斌 《云南大学学报(自然科学版)》1996,18(2):122-125
从菜籽饼中分离得到降解芥子甙的多种微生物70多株,应用各种选择实验,筛选出发酵性能好、脱毒能力强、生长旺盛的菌类,经鉴定它们是白色球拟酵母(Torulopsiscandida),华根霉(Rhizopuschinensis),总状毛霉(Mucoruacemosus),米曲霉(Aspergillusoryzae).采用多批不同组合的小型发酵试验,送检测定结果平均脱毒率为80%,ITC,OZT的含量符合饲用标准,发酵后粗蛋白略有升高,且安全无毒 相似文献
9.
米曲霉固体发酵生产中性蛋白酶产酶条件研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为探讨米曲霉固体发酵生产中性蛋白酶的产酶条件,以米曲霉Y10为试验菌株,研究了产中性蛋白酶活力较高的固体培养基配方.结果表明:米曲霉产中性蛋白酶的适宜培养条件为:m(麸皮)∶m(酵母粉)∶m(乳糖)∶m(水)=9∶1∶1∶9,pH值为7.0,接种量为每克培养基接种1.8×108个孢子,最佳培养温度为30℃,最佳培养时间为72h.在此培养条件下,最高酶活力达4286.1U/g. 相似文献
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米曲霉是我国传统酱油生产用关键菌种.关于米曲霉菌株选育的研究主要包括,高产蛋白酶菌株选育技术研究、酶学特性研究、产酶影响因素研究等方面.高产蛋白酶菌株的选育为研究重点.虽然,研究均显示经过改良的菌株性能超过了原始出发菌株,但是成果仍然局限于实验室理论分析.我国科研人员仍需努力,加强对米曲霉菌株在工业化生产中实际应用效果的研究. 相似文献
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徐德峰;赵海锋;赵谋明 《华南理工大学学报(自然科学版)》2010,38(9)
为提高菌丝原生质体的释放量和活力,分别考查了培养基碳源、菌龄、酶浓度、酶解时间及再生培养基种类对Aspergillus oryzae和Aspergillus niger 原生质体释放和再生的影响,并研究了两亲本原生质体的非对称灭活参数。结果表明:(1)以MPY液体培养基为菌丝培养基,按105个孢子/ml培养基的接种量接入新鲜孢子悬液,30 ℃/100 rpm分别振荡培养18和21 h,总浓度15 mg/ml的复合酶液(溶壁酶:蜗牛酶:纤维素酶=1:1:1)按1 g湿菌丝球/10 mL酶液的比例,于30 ℃/70 rpm条件下酶解2.5 h,然后以高渗豆汁固体培养基为再生培养基,在上述制备工艺参数下两亲本原生质体的释放量和再生率均可达到107个/ml和30%以上;(2)通过灭活曲线确定A. oryzae HN3042原生质体于15 W紫光灯垂直距离13 cm处照射15 min,A. niger CICC2377原生质体于65 ℃水浴10 min,此灭活剂量可使99%以上双亲原生质体非对称失活。 相似文献
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Lipase preparation from Aspergillus oryzae could act on ester bonds on the surface of poly (ethylene terephthalate) fibers and a possible hydrolytic product mono (2-hydroxyethyl) terephthalate was released. After the iipase modification, there were more carboxyi groups on the treated poly (ethylene terephthalate) fabric surface that resulted in binding with more cationic dyes. Increased hydrophilicity and antistatic ability of poly (ethylene terephthalate) samples were found based on moisture regain, water contact angle and static half decay time. 相似文献
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丝状真菌米曲霉外源基因表达系统的构建 总被引:1,自引:1,他引:0
以米曲霉Aspergillus oryzae RIB40的基因组DNA为模板,PCR扩增得到启动子、终止子、筛选标记基因等表达元件,依次连接到载体pUC119上,构建了米曲霉的重组表达载体pNMA. 将米赫根毛霉脂肪酶基因(RML)连接于pNMA的启动子下,得到表达载体pNMA-RML,通过ApaI酶切线性化转化米曲霉宿主菌A.oryzae niaD300,得到整合型的阳性转化子A.oryzae ONL1. 其培养7天的培养液上清在以三丁酸甘油酯为底物的平板上形成清晰的水解透明圈,碱滴定法酶活测定表明培养液酶活可达2.5 U/mL,培养液上清的SDS-PAGE图谱在32.5 kDa处有RML的特征条带. 以上结果表明RML已经在米曲霉中成功表达,同时证明所构建的米曲霉外源基因表达系统是有效的. 相似文献
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使用硫酸铵分级沉淀、CM -SephadexC - 5 0弱阳离子、POROSPE疏水层析和POROSHQ2 0强阴离子交换分离技术 ,从黑曲酶发酵的果胶酶粗品中纯化出一种电泳纯的果胶酶 .经SDS -PAGE电泳测定其相对分子量约 41.8kD ,最适pH和最适温度分别为 5 .0和 36℃ . 相似文献
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Aspergillus sp.1-13菌株β-木糖苷酶的提纯和部分性质 总被引:1,自引:0,他引:1
关宏 《齐齐哈尔大学学报(自然科学版)》2002,18(2):7-9
通过80 %饱和度硫酸铵沉淀、DEAE -SephadexA -50离子交换柱层析和SephadexG -100凝胶过滤柱层析等方法从Aspergillussp .1 -13菌株的白酒丢糟固体培养物的抽提液中分离纯化到一种 β-木糖苷酶。通过SDS -PAGE分析测定其分子量为110.9KD。该酶最适反应pH值为3.2~3.8之间,最适反应温度为70℃。该酶具有较宽的 pH稳定性 ,并且在60℃以下较稳定。 相似文献