芹菜素对RAW264.7细胞增殖、分泌NO和吞噬功能的影响

为研究芹菜素(Apigenin,AP)对RAW264.7细胞增殖、分泌一氧化氮(nitrogen monoxidum,NO)和吞噬功能的影响,首先培养RAW264.7细胞至细胞对数生长期,然后MTT法检测不同浓度(25、50、100、150和200μmol/L)的AP对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激的RAW264.7细胞增殖的影响,再用Griess试剂盒检测上述浓度AP对LPS刺激的RAW264.7细胞分泌NO的影响,并用荧光微球检测其吞噬功能的变化.结果显示25-200 μmol/LAP显著抑制LPS刺激的RAW264.7细胞的增殖,并明显抑制LPS刺激的RAW264.7细胞分泌NO,同时明显抑制LPS刺激的RAW264.7细胞的吞噬功能(P<0.01),且呈剂量依赖关系.故在一定浓度范围内,AP显著抑制LPS刺激的RAW264.7细胞增殖、分泌NO和吞噬功能,故有望通过进一步研究将其开发成为免疫调节药物.     

藏红花花瓣粗多糖的体外抗氧化活性研究

采用水提醇沉法提取藏红花花瓣中的多糖,得率为3.75%.联合蒽酮-硫酸法和DNS法测得多糖纯度为68.34%.对粗多糖的体外抗氧化活性进行测定,结果表明,粗多糖具有一定的抗氧化活性,抗氧化能力指数(ORAC)值为0.572μmol TE/mg;其对ABTS+、DPPH和羟自由基具有一定的清除能力,半数清除浓度EC50分别为76.26μg/mL、165.5μg/mL和880.4μg/mL.     

葡萄籽粗多糖的体内外抗氧化作用

为了研究葡萄籽粗多糖(crude polysaccharides from grape seeds,GSCPs)体外抗氧化作用及对秀丽隐杆线虫的体内抗氧化作用,采用水提醇沉法提取GSCPs,检测GSCPs对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基和羟自由基的清除作用及对DNA氧化损伤的抑制作用;建立RAW 264.7巨噬细胞氧化损伤模型,在细胞水平探讨GSCPs的抗氧化能力;同时利用秀丽隐杆线虫研究GSCPs的体内抗氧化功能。体外实验结果表明:GSCPs可有效清除自由基,抑制DNA的氧化损伤,质量浓度为0.4mg/mL的GSCPs对DPPH自由基的清除率达84%,对羟自由基清除率为89%;GSCPs可以下调H₂O₂诱导的RAW 264.7巨噬细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,正向调节细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性,质量浓度为0.2mg/mL的GSCPs处理组可使细胞内SOD活性从H₂O₂处理组的81.1%升至96.3%,GSH-Px活性从H₂O₂处理组的92.1%升至99.6%。此外,GSCPs可延长秀丽隐杆线虫寿命,提高其对抗急性氧化应激的能力,有效清除秀丽隐杆线虫体内的ROS。质量浓度为0.8mg/mL GSCPs处理组秀丽隐杆线虫的平均寿命较对照组延长27.67%,将急性氧化应激的秀丽隐杆线虫平均存活时间延长33.58%,秀丽隐杆线虫体内ROS生成量较对照组可降低56.33%。因此,葡萄籽粗多糖在体内外均表现出良好的抗氧化性,可用于抗氧化功能产品的开发。     

红参多糖体外抗氧化的研究

目的:研究不同醇沉浓度提取的红参多糖的体外抗氧化能力,并用Vc作为阳性对照。方法:用紫外分光光度法研究红参多糖和Vc清除DPPH自由基和羟自由基的能力来评价其抗氧化活性。结果:80%醇沉的红参多糖对DPPH自由基、羟自由基清除效果最好,IC_(50)分别为0.81,0.44mg/mL;30%醇沉的红参多糖对DPPH自由基也有清除效果,但相对较弱,IC_(50)为12.74mg/mL;50%醇沉的红参多糖对羟自由基的清除效果最差。结论:红参多糖具有较强的抗氧化作用,其中80%醇沉红参多糖抗氧化作用最强。     

灰树花胞外多糖的分离纯化及免疫调节作用

通过对灰树花(Grifola frondosa)深层发酵的胞外多糖(EXGFP)进行分离纯化,研究其性质和免疫活性.灰树花胞外粗多糖经醇沉、酶–sevag脱蛋白和Sephadex G-100色谱柱分离得到纯化组分EXGFP-A.通过Sepharose 4B凝胶柱法和HPLC法鉴定EXGFP-A的纯度,结果表明EXGFP-A是均一多糖组分,纯度为92.68%,.理化性质实验结果表明,EXGFP-A是一种非淀粉类、不含糖醛酸及多酚类物质,含有α–D–葡萄糖苷键和吡喃糖环的中性多糖.MTT实验表明,当EXGFP-A质量浓度为80,μg/m L、作用48,h时,小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞增殖指数达到最大值,为137.5%,.吞噬活性实验结果证实EXGFP-A能够提高RAW264.7细胞对中性红的吞噬能力,扫描电子显微镜结果发现RAW264.7细胞经过EXGFP-A处理后,细胞表现出了明显的活化特征.     

扇贝多糖口服液制备工艺研究

本实验利用超声微波辅助热水浸提法提取扇贝瑶柱多糖,除蛋白后用所得多糖进行了免疫活性的研究,并探究扇贝多糖口服液的制备工艺.实验结果表明,扇贝多糖最佳提取工艺为微波功率650 W、微波提取时间15 min、温度50℃及液料比60∶1;细胞实验中扇贝多糖浓度在125-2000μg/mL范围内可以促进巨噬细胞RAW264.7吞噬中性红的能力,浓度在250-2000μg/mL范围内能促进巨噬细胞RAW264.7分泌NO且呈浓度依赖性;扇贝多糖口服液最佳调配配方为1.6%扇贝多糖、3%白砂糖、1%蜂蜜、0.07%柠檬酸.该制备工艺简单可靠,口服液品质尚佳.     

新疆芍药与窄叶芍药根中多糖含量测定及体外抗氧化活性的研究

为探讨新疆芍药和窄叶芍药根中多糖的含量并评价其多糖体外抗氧化活性。采用水提醇沉法提取多糖,用Sevage法除蛋白、活性碳脱色,并用苯酚-硫酸比色法测定多糖的含量;并采用1,1-二苯基-2-硝基苯肼自由基清除法(DPPH法)和2,2-联氮基-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐自由基清除法(ABTS法)对提取的多糖进行体外活性评价。结果显示:纯化后窄叶芍药和新疆芍药的多糖含量达0.82%和0.78%;窄叶芍药和新疆芍药多糖对DPPH自由基的IC50分别为0.07 mg/m L和0.13 mg/m L;而两者对ABTS自由基的IC50分别为0.075 mg/m L和0.096mg/m L。由此可知,本文建立的测定多糖含量的方法简便、准确、重现性好;且窄叶芍药和新疆芍药对清除DPPH与ABTS自由基均具有一定抗氧化活性。     

山茱萸多糖PFCA Ⅲ抗氧化性能研究

研究了山茱萸多糖PFCAⅢ的抗氧化性能。利用烘箱法研究多糖对油脂的抗氧化活性，结果表明水提山茱萸多糖PFCAⅢ可有效抑制植物油氧化；利用Fenton反应检测多糖PFCAⅢ对羟基自由基(·OH)的清除作用，当清除率达50%时所需浓度为430mg/L；通过邻苯三酚自氧化反应检测PFCAⅢ对超氧阴离子自由基(O₂^-·)的清除能力 ,当PFCAⅢ的添加浓度为100mg/L时清除率为21.5%。     

玉竹多糖的抗氧化作用研究

为研究玉竹多糖的体外抗氧化活性和清除自由基作用,采用体外化学体系研究玉竹多糖对超氧阴离子(O-2·)、羟自由基(·OH)、1,1-二苯基-2苦苯肼自由基(DPPH·)和过氧化氢(H2O2)的清除能力。结果表明:玉竹多糖对超氧阴离子(O-2·)、过氧化氢(H2O2)和1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH·)具有较强的清除能力,其EC50值分别为0.38 mg/mL(Vc为0.09 mg/mL)、0.65 mg/mL(Vc为0.70 mg/mL)和0.43 mg/mL(Vc为0.06 mg/mL);但对羟自由基(·OH)的清除能力较弱,其EC50值为14.7 mg/mL(Vc为0.34 mg/mL)。玉竹多糖具有较好的体外抗氧化活性。     

雪樱子粗多糖提取、纯化工艺及抗氧化活性研究

以雪樱子为原料,优化雪樱子粗多糖水提醇沉提取法及AB-8型树脂纯化工艺。并以维生素C作为对比,以羟自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力、DPPH自由基清除能力作为指标,对雪樱子粗多糖进行了体外抗氧化活性的测定。结果表明,雪樱子粗多糖的优化提取工艺为:醇沉乙醇体积分数80%、料液比(g/mL)1∶20、提取温度95℃、提取时间6h,粗多糖得率为(1.421±0.081)mg/g。雪樱子多糖优化纯化工艺为:上样液质量浓度1.00mg/mL,上样液pH值5,吸附速率2BV/h,乙醇洗脱剂体积分数25%,洗脱速率2BV/h,回收率为44.99%±1.23%。雪樱子粗多糖具有较好的体外抗氧化活性。研究结果为雪樱子多糖活性分析和功能性产品开发提供了技术支持。     

不同杀青方式制备桑叶茶的体外抗氧化作用研究

分析不同杀青方式制备桑叶茶的体外抗氧化作用及与多酚和黄酮类质量分数的相关性,结果显示:桑叶茶具有较好的体外抗氧化能力,微波杀青效果最好.沸水及不同乙醇质量浓度提取物均有一定体外抗氧化作用,其氧自由基吸收能力、还原力和清除DPPH自由基的IC50分别为764.9±102.9~1 437.4±96.3μmol/g,5.86±0.09~9.18±0.18和139.34±11.70~225.66±8.16.经与提取物中多酚和黄酮类质量分数相关性分析显示,仅DPPH自由基清除率的IC50与多酚呈显著负相关,r=-0.791 8(p0.05),表明在影响桑叶茶体外抗氧化活性中,还有其他抗氧化成分参与.     

银耳多糖的提取及其清除自由基作用

讨论了采用热水提取、乙醇沉淀、sevag法获得银耳多糖的方法.并在体外化学模拟系统反应中,观察该多糖消除羟自由基、超氧阴离子自由基以及防止油脂质氧化的性能.试验表明:银耳多糖清除羟自由基的作用明显,50%清除量为0.112 mg/m l,对超氧自由基的清除能力随着多糖浓度而升高,50%清除量为0.264 mg/m l,油脂抗氧化性能介于VE和VC之间.     

不同产地烟叶多糖体外抗氧化活性研究

为了系统了解不同产地烟叶多糖体外抗氧化活性的差异,文章对安徽泾县、宣州区、芜湖产地烟叶进行了多糖提取,并对所提取的多糖样品1(泾县)、样品2(宣州区)和样品3(芜湖)和抗坏血酸的体外抗氧化活性进行了测定。结果显示:3种烟叶多糖均呈现良好的·OH和DPPH自由基清除率和还原能力。就·OH清除率而言,多糖质量浓度低于4g/L时,其能力大小顺序为样品1样品2样品3;多糖质量浓度高于4g/L,样品1和样品2的清除能力显著高于样品3(P0.05)。样品3对DPPH自由基清除率和还原能力明显高于样品1和样品2。因此,不同产地烟叶多糖的体外抗氧化能力有显著差异(P0.05)。此外,3种烟叶多糖的·OH和DPPH自由基清除率和还原能力显著低于抗坏血酸(P0.05);3种烟叶多糖的·OH和DPPH自由基清除和还原能力在常温下下降缓慢,抗坏血酸则在相同条件下迅速衰减,与烟叶多糖形成鲜明对比,说明烟叶多糖具有比抗坏血酸更长效而稳定的抗氧化能力。该研究结果可为烟叶多糖在功能食品等领域的应用提供参考。     

树舌粗多糖清除自由基研究

目的:探讨树舌粗多糖体外清除自由基的效果。方法:实验采用水提醇沉的方法,以5%乙醇为梯度,分别得到树舌粗多糖80%、75%、70%、65%和60%的乙醇提取液,采用羟基自由基,使用可见分光光度计在510nm检测了树舌粗多糖的体外清除自由基的能力。结果:树舌粗多糖75%和60%的乙醇提取液具有清除自由基的能力,清除率与树舌粗多糖提取液的浓度有一定的量效关系。树舌粗多糖75%的乙醇提取液清除羟自由基的IC_(50)(IC_(50)半数抑制剂的浓度)为4.8625mg/mL,树舌粗多糖60%的乙醇提取液清除羟自由基的IC_(50)为6.4539mg/mL。     

金花茶叶醇提物对LPS导致RAW炎症的保护作用

考察金花茶叶醇提物对内毒素(LPS)刺激腹腔巨噬细胞(RAW264.7)后细胞炎症的保护作用.通过噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度金花茶叶醇提物作用下细胞的存活率;通过Griess法检测金花茶叶醇提物对LPS刺激后RAW264.7细胞NO释放量;通过酶联免疫吸附法检测炎症因子TNF-α,IL-1β,IL-6含量;通过蛋白免疫印迹法检测NF-κB p65的表达量.MTT结果显示,LPS及不同浓度的金花茶叶醇提物均未对细胞存活率产生明显影响(P0.05).3、10、30、100μmol/L的金花茶叶醇提物均可以明显减少LPS诱导的RAW264.7细胞NO的释放(P0.05).100μmol/L的金花茶叶醇提物可以明显减少LPS诱导的RAW264.7细胞IL-1β、IL-6和TNF-α的释放(P0.001).10、30、100μmol/L的金花茶叶醇提物均可以明显抑制LPS诱导的RAW264.7细胞NF-κB p65蛋白表达(P0.05).金花茶叶提取物对内毒素导致的腹腔巨噬细胞炎症具有一定的保护作用,其作用机制可能与NF-κB通路相关.     

多种体系中黄连素和NAC抗氧化活性的研究

采用硫代巴比妥酸比色法,彗星电泳,SDS-PAGE法检测了黄连素与NAC单独或联合时对脂质过氧化、DNA损伤、蛋白质氧化降解的保护;用邻苯三酚自氧化法、甲基紫法和DMPD·+法检测了二者对超氧阴离子、羟自由基和DMPD·+自由基的清除能力.结果表明,黄连素具有良好的抗氧化效果,且呈浓度依懒性.黄连素浓度为30μmol/L时对超氧阴离子清除率达到22.01%,150μmol/L时接近100%.在与NAC联合后,作用强于二者单独作用的效果,但稍低于二者单独作用的叠加.黄连素在清除羟自由基,浓度为10μmol/L时,清除率已达到95%,联合NAC作用后,却显示了负协同效应.相比而言黄连素对DMPD·+的清除能力较弱,黄连素浓度为80μmol/L时,对DMPD·+自由基的清除率为3.6%,而NAC与黄连素联用后,清除活性远高于两者的单独加和.以上结果均呈现出黄连素显著的抗氧化活性.     

玉米须多糖的提取、组成和生物活性研究

采用水提醇沉法、DEAE纤维素柱层析、交联葡聚糖凝胶柱层析提取并纯化得到一种玉米须多糖,利用DPPH、ABTS自由基清除实验、MTT法对人肝癌细胞Hep G-2抑制实验对该多糖的抗氧化能力和抑癌能力进行测定,利用高效液相凝胶色谱法(HPGPC)测定了该多糖的分子质量,通过红外吸收光谱法(IR)、薄层层析法、气质联用法(GC-MS)、核磁共振波谱法(NMR)对该多糖的单糖组成及结构进行了研究.结果表明,该多糖具有显著的抗氧化作用和抑癌能力,DPPH和ABTS自由基被清除50%时该多糖浓度分别为0.0312 mg/mL和0.1173mg/mL,当浓度为4mg/mL时,该多糖对人肝癌细胞的抑制率达18.3%.HPGPC结果表明该多糖分子量为44465Da.由结构分析结果推测,该多糖是一种由D-阿拉伯糖和D-半乳糖组成的β构型的多糖.     

苍耳子多糖的理化性质与生物学活性研究

文章采用热水、螯合剂、0.05 mol/L NaOH和1.00 mol/L NaOH溶剂从苍耳子中分别提取出WXP、CXP、BXP、AXP 4种多糖组分,并检测各种多糖组分的理化特性及生物学活性。化学组成分析结果表明,WXP、CXP、BXP、AXP的总糖质量分数、蛋白质质量分数、糖醛酸质量分数以及单糖组成均不相同,WXP、BXP、AXP由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖以及半乳糖组成,CXP由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖及葡萄糖组成,其组成比例均不相同。傅里叶变换红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy, FTIR)图谱表明,4种多糖组分均显示有典型的多糖官能团吸收峰,但相比于其他3种组分,CXP在860 cm^-1处显示出β-糖苷键的特征吸收峰。生物学活性研究表明,与CXP相比,WXP、BXP、AXP在体外抗氧化活性方面表现出更好的效果,当质量浓度为5.0 mg/mL时,AXP的DPPH自由基、羟基自由基以及ABTS自由基清除率分别达到92.7%、77.5%、99.9%;4种多糖组分通过抑制LPS诱导的RAW264....     

金线莲多糖提取工艺优化及其体外抗氧化活性研究

以人工培育金线莲为原料，通过单因素试验考察液固比、提取温度、提取时间、超声波功率、提取次数5个因素对金线莲多糖得率的影响，并在此基础上选取液固比、提取时间及超声波功率3个因素为自变量，金线莲多糖得率为考察指标，采用响应面分析试验设计方法建立回归模型，以优化金线莲多糖提取工艺条件。结果表明，金线莲多糖最优提取工艺条件为：液固比30∶1(mL/g)、提取时间40 min、超声波功率240 W、提取温度60℃、提取次数2次，在此条件下金线莲多糖得率为8.14%，与预测值8.19%的相对偏差为0.61%。体外抗氧化实验结果表明，金线莲多糖对O_2-·自由基和DPPH自由基的清除作用与浓度呈正相关，其对O_2-·自由基和DPPH自由基清除率IC₅₀分别为0.744 mg/mL、0.665 mg/mL。金线莲多糖和VC还原力随着质量浓度增加而增大，但VC还原力增加的速度均高于金线莲多糖，表明金线莲多糖具有体外抗氧化活性，但抗氧化能力弱于VC。     

翘鳞肉齿菌多糖的分离纯化及抗氧化活性的研究

为了分离纯化翘鳞肉齿菌多糖,解析其结构特征,并研究其抗氧化活性.运用DEAE-cellulose column进行柱层析分离纯化翘鳞肉齿菌多糖,高效凝胶渗透色谱(HPGPC)方法研究其均重分子量,通过红外光谱解析其结构特征,进一步研究其对羟基自由基(·OH)、1,1-二苯基-2-苦基肼自由基(DPPH-)和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(ABTS+)的清除作用,同时研究了翘鳞肉齿菌多糖在H2O2作用下对PC12细胞的保护能力.其结果显示从四川省小金县翘鳞肉齿菌子实体分离纯化得到一种水溶性杂多糖(SIKP-1)纯品,其重均分量约为2.0×104 Da.通过化学方法研究了不同质量浓度的翘鳞肉齿菌多糖(SIKP-1)抗氧化活性,结果表明:当SIKP-1质量浓度为0.1mg/mL时,其对DPPH-自由基的清除率可达到40.63%;当SIKP-1质量浓度达到0.32mg/mL时,对·OH自由基的清除率可达到51.61%;当SIKP-1的质量浓度为3mg/mL时,对ABTS+自由基的清除率可达69.75%;在细胞生物学实验中,结果显示在用终质量浓度为0.5,1,2 mg/mL的SIKP-1处理下,PC12能免于H2O2的损伤,随着剂量的增加其存活率越高,分别为15.89%,27.60%,29.36%.综上试验结果显示,翘鳞肉齿菌多糖(SIKP-1)具有显著的抗氧化功能,因此可以作为一种理想的抗氧化剂资源.