核桃楸皮甲醇提取液对SMMC-7721和SCG-7901抑制作用研究

目的：研究核桃楸皮的甲醇提取液对肿瘤细胞SMMC-7721（人肝癌）和SCG-7901（人胃癌）的增殖抑制作用。方法：MTT（噻唑蓝比色法）和紫外分光光度法相结合,以5-Fu（五氟尿嘧啶）为阳性对照药物,在560nm波长,紫外分光光度计,检测不同剂量的核桃楸甲醇提取液,对肿瘤细胞抑制作用的OD值,考察甲醇提取液对肿瘤细胞的24h抑制作用。结果：SMMC-7721,IC50=0.09977mg/mL;SCG-7901,IC50=0.12656mg/mL。     

树舌粗多糖对癌细胞SCG-7901和SMMC-7721增殖抑制作用的研究

目的:研究树舌粗多糖对癌细胞SCG-7901(人胃癌)和SMMC-7721(人肝癌)的增殖抑制作用。方法:采用MTT法(噻唑蓝比色法),以5-Fu(五氟尿嘧啶)为阳性对照药物,在490nm波长处检测不同剂量的树舌粗多糖提取液对癌细胞抑制作用的OD值,考察树舌粗多糖提取液对癌细胞24h的抑制作用。结果:树舌粗多糖50%乙醇提取液对SGC-7901和SMMC-7721的IC50(半抑制浓度)分别为017135mg/mL和020065mg/mL,树舌粗多糖30%乙醇提取液对SGC-7901和SMMC-7721的IC50分别为020465mg/mL和020924 mg/mL,树舌粗多糖对癌细胞SCG-7901和SMMC-7721的增殖具有明显的抑制作用,且24h内具有量效关系。     

黒参粗多糖抑制人胃和肝癌细胞增殖作用的研究

目的:研究黒参粗多糖对肿瘤细胞SCG-7901和SMMC-7721的增殖抑制作用。方法:采用MTT法(噻唑蓝比色法),以人参粗多糖为阳性对照药物,在490nm波长,检测不同剂量的黒参粗多糖提取液,对肿瘤细胞抑制作用的OD值,考察提取液对肿瘤细胞的24h抑制作用。结果:黒参粗多糖对SGC-7901和SMMC-7721的IC50(半抑制浓度)分别为014475mg/mL和015789mg/mL,黒参粗多糖对肿瘤细胞SCG-7901和SMMC-7721的增殖具有明显的抑制作用,且具有量效关系。     

核桃楸皮乙醇提取液对人肝癌细胞抑制作用的研究

探讨核桃楸皮乙醇提取液对人肝癌肿瘤细胞SMMC-7721的抑制作用。应用噻唑蓝比色法,以5-氟尿嘧啶组为阳性对照组,在490nm检测不同剂量的核桃楸皮乙醇提取物水溶液的OD值,考察核桃楸皮乙醇提取物水溶液对肝癌细胞SMMC-7721的24h和48h抑制作用。乙醇提取液IC50=0.0530mg/mL;5-FuIC50=0.0190mg/mL。     

核桃楸皮粗多糖抑制小鼠肝癌细胞H22研究

目标：研究核桃楸皮粗多糖体外抑制小鼠肝癌细胞的能力。方法：以1.5mL离心管为细胞培养容器,用MTT法在492nm检测抑制效果。结果：核桃楸皮粗多糖有较强的抑制H22增值的能力,IC50=0.04932mg/mL（粗多糖）;IC50=0.035273mg/mL（5-Fu）（IC50半数抑制剂的浓度）。     

核桃楸皮粗多糖清除自由基研究

我们采用羟基自由基和超氧阴离子分别检测了核桃楸皮粗多糖的体外清除自由基的能力.结果显示,核桃楸皮提取物有较强的清除自由基的能力,IC50分别为1.14688mg/mL,1.26825mg/mL(IC50半数抑制剂的浓度).     

核桃楸皮粗多糖的急性毒性实验研究

目的观察核桃楸皮粗多糖对小鼠的急性毒性。方法将5.4 mg/mL的核桃楸皮粗多糖溶液,分别按照40 mL/kg每天3次灌胃,20 mL/kg每天2次腹腔注射,给药1 d后,连续观察7 d。结果实验期间,小鼠的活动与饮食情况未见异常,未出现死亡。尸检各脏器无异常。小鼠的核桃楸皮粗多糖每天最大给药量：腹腔注射2.16 mg/10 g,灌胃6.48 mg/10 g。结论通过两种给药方法证明,核桃楸皮粗多糖对小鼠的毒性作用较低。     

紫杉醇对SMMC-7721肝癌细胞的增殖抑制

目的研究紫杉醇(PTX)对肝癌细胞SMMC-7721的生长抑制的作用。方法应用MTT法观察紫杉醇对SMMC-7721的生长抑制作用。结果紫杉醇对肝癌细胞SMMC-77211有明显的生长抑制作用,其IC50为21.6nmol/L。结论紫杉醇对SMMC-7721有明显的生长抑制作用。     

紫杉醇对SMMC-7721肝癌细胞的增殖抑制

目的 研究紫杉醇(PTX)对肝癌细胞SMMC-7721的生长抑制的作用.方法 应用MTT法观察紫杉醇对SMMC-7721的生长抑制作用.结果 紫杉醇对肝癌细胞SMMC-77211有明显的生长抑制作用,其IC50为21.6nmol/L.结论 紫杉醇对SMMC-7721有明显的生长抑制作用.     

紫杉醇对SMMC-7721肝癌细胞的增殖抑制

目的：研究紫杉醇（PTX）对肝癌细胞SMMC-7721的生长抑制的作用。方法应用MTT法观察紫杉醇对SMMC-7721的生长抑制作用。结果紫杉醇对肝癌细胞SMMC-77211有明显的生长抑制作用，其IC50为21.6nmol/L。结论紫杉醇对SMMC-7721有明显的生长抑制作用。     

硒矿区土壤中真菌的分离培养及抗肿瘤活性筛选

利用单菌落挑选与划线培养技术,从硒矿区土壤样品中分离纯化真菌。通过摇床发酵培养,提取制备发酵样品。采用MTT法,用MDA-MB-231细胞、Hela细胞、SMMC-7721细胞测试发酵样品的抗肿瘤活性。从采自湖北恩施全球唯一独立硒矿床区的6个不同土样中分离真菌73株。其中,对人宫颈癌Hela细胞的IC_(50)小于90μg/m L的菌株32株,对人乳腺癌MDA-MB-231细胞的IC_(50)小于90μg/m L的菌株13株,对人肝癌SMMC-7721细胞的IC_(50)小于90μg/m L的菌株9株。这些活性菌株为筛选抗肿瘤天然产物提供了良好的药源菌株。     

藏药抗肝癌活性研究

本实验采用快速溶剂萃取法制备收集100种常用藏药的环己烷、乙酸乙酯和甲醇提取物,并运用MTT法对两个肝癌细胞株HepG2和SMMC-7721进行各提取物的抗肝癌活性测试,同时选用L-02细胞来评价其体外毒性.抗肝癌活性结果显示100种常用藏药中17种藏药材有良好的抗肝癌活性,其IC50值均小于150 μg/mL,其中马兜铃、蓝翠雀花、甘青青兰、掌叶橐吾的乙酸乙酯提取物显示出显著的抗肝癌活性,其IC50值均小于50 μg/mL,但马兜铃乙酸乙酯提取物对正常肝细胞L-02显示出一定的毒性.在进一步的抗HepG2肝癌活性验证中,结果显示蓝翠雀花乙酸乙酯提取物和甘青青兰乙酸乙酯提取物具有显著的抗肝癌活性,两者在抗HepG2肝癌细胞株活性中皆显示出显著的时效和量效关系.运用倒置显微镜以及Hoechst 33258荧光染色法对经过蓝翠雀花乙酸乙酯提取物或甘青青兰乙酸乙酯提取物作用的HepG2细胞形态进行观察,结果提示蓝翠雀花和甘青青兰乙酸乙酯提取物可能是通过诱导HepG2细胞凋亡而显示抗癌活性.     

文殊兰弱碱性生物碱的抗肿瘤活性研究

研究文殊兰中弱碱性生物碱对不同肿瘤细胞的抑制作用,并筛选出敏感细胞株,观察凋亡形态;MCF-7细胞株、SMMC7721细胞株、SGC7901细胞株、HepG-2细胞株,MTT溶液,DMSO,Hoechst33258等;利用MTT法检测文殊兰弱碱性生物碱对上述肿瘤细胞的抑制作用以及Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡的形态学变化;文殊兰弱碱性生物碱对上述细胞株均有明显的抑制作用,对HepG-2细胞的抑制作用更为明显,给药72 h后测定IC50=9.374 323μg/mL;Hoechst 33258染色法观察细胞出现凋亡小体,有凋亡现象发生.文殊兰弱碱性生物碱MCF-7细胞株、SMMC7721细胞株、SGC7901细胞株、HepG-2细胞株具有不同程度的抑制作用,且呈现一定的剂量依赖性,对HepG-2细胞的抑制作用最强,表现出良好的抗肿瘤活性.     

新型姜黄素结构衍生物抗肝癌细胞增殖作用的研究

采用MTT法对姜黄素结构衍生物（CCM系列化合物）进行抗人肝癌细胞Bel-7402和SMMC-7721活性筛选;利用流式细胞技术和荧光显微镜检测SMMC-7721细胞凋亡及周期分布;采用Western-Blot方法检测SMMC-7721中蛋白caspase-3和剪切后p17的表达.结果表明,化合物CCM-5和CCM-14抗肿瘤活性较好,其对SMMC-7721细胞的凋亡作用呈剂量依赖性,且凋亡率与阴性对照组相比有显著差异（P<0.01）;化合物浓度增高时,G0/G1期细胞减少,S期以及G2/M期细胞增加,凋亡峰SubG1峰增大;两个化合物均可增强caspase-3的表达,随着浓度的提高,caspase-3的表达趋势减弱,而剪切形式p17亚基表达量逐渐提高.因此,姜黄素结构衍生物CCM-5和CCM-14能抑制人肝癌细胞SMMC-7721细胞的增殖,促进凋亡,其作用机制可能与化合物诱导caspase-3活性的增强有关.     

肝癌细胞形态和生长行为对基底拉伸的响应

采用“四点弯曲梁加载装置”，对培养的人肝癌细胞株SMMC－7721旋以拉伸刺激，通过显微计算机图像处理系统了解其形态变化，流式细胞仪了解其增殖行为，结果发现1）加载24h后SMMC－7721 G2－M期8．63％，对照组15．92％；2）加载72h后SMMC－7721铺展投影面积缩小；3）加载24h后SMMC－7721分裂指数0．46，对照组0．55。加载可部份抑制SMMC－7721的生长。     

槟榔果实中的细胞毒活性成分研究

采用多种柱色谱技术对槟榔(Areca catechu Linn.)果实中的化学成分进行分离纯化,通过波谱分析及文献数据对照鉴定其化合物的结构,并采用MTT(methyl thiazolyltetrazolium)法进行细胞毒活性测试.结果显示:从槟榔果实中分离得到2个化合物,分别鉴定为巴西红厚壳素(1)和环―(亮氨酸―酪氨酸)(2).化合物2为首次从槟榔果实中分离得到.化合物1对人肝癌细胞(SMMC-7721)和人胃癌细胞(SGC-7901)的增殖均显示了较强的生长抑制活性.化合物2对慢性髓原白血病细胞(K562)的增殖具有一定的生长抑制活性.     

AFP基因shRNA表达质粒稳定转染肝癌细胞克隆的构建

甲胎蛋白(AFP)是一种重要的胚胎期及肝癌相关蛋白,为了深入研究其在肝癌细胞增殖中的作用,构建了针对AFP基因的shRNA表达质粒,拟建立可稳定转染的肝癌细胞克隆;利用生物信息学方法设计shRNA,经酶切连接和抗生素筛选构建表达质粒;通过酶切、琼脂糖凝胶电泳及测序对质粒加以验证;优化转染条件后采用脂染法转染肝癌SMM C-7721细胞,利用Purom yc in筛选稳定转染的细胞克隆.成功获得高特异的shRNA设计结果,构建了针对人类AFP基因的shRNA表达质粒,并获得该质粒稳定转染的细胞克隆.