酵母诱导子对肉苁蓉细胞悬浮培养影响的研究

目的:以酵母诱导子对肉苁蓉细胞悬浮培养及其抗氧化活性成分苯乙醇苷的合成动力学的影响进行研究.方法:从肉苁蓉种子诱导出愈伤组织,在MS培养基上进行细胞悬浮培养.首先考察肉苁蓉细胞生长和苯乙醇苷合成的动力学,在此基础上就酵母诱导子对细胞生长和苯乙醇苷合成的影响进行研究.结果:肉苁蓉悬浮细胞培养经过三天的延滞期后进入对数生长期,21天后细胞生长进入稳定期,最大生物量和苯乙醇苷产量分别达到8.03g DW/L和97 mg/L.在对数生长期后期,即培养的第18天加入0.8 mL/瓶浓度的酵母诱导子,诱导三天的效果最好,苯乙醇苷的最高产量为237.7 mg/L,为对照的239%.结论:合适浓度的酵母诱导子不但能够有效提高肉苁蓉细胞悬浮培养液中的苯乙醇苷含量,同时对细胞生长也具有促进作用.     

基于无外源激素下肉苁蓉细胞悬浮培养的研究

设计了不添加外源激素进行肉苁蓉细胞悬浮培养的方案,考察了细胞生长及其次生代谢产物苯乙醇苷、总黄酮和肉苁蓉多糖的变化情况.结果表明:在无外源激素悬浮培养下,肉苁蓉细胞的生长与次生代谢产物的合成与添加外源激素的相类似,细胞仍能快速生长及产生代谢产物,实现了不依赖外源激素的肉苁蓉细胞生长与次生代谢产物的积累,细胞培养成本降低,且安全、可食用.     

酵母提取物对水母雪莲悬浮培养合成紫丁香苷的影响

研究了酵母提取物诱导的水母雪莲悬浮培养时紫丁香苷生产和相关次级代谢酶的活性.酵母提取物促进了紫丁香苷的生产,最优的添加方法是在培养15 d时添加1.5%的酵母提取物.最大紫丁香苷产量达671.9 mg/L,是对照实验的3.25倍.诱导子处理后G6DPH、PAL和POD活性显著增加,当处理6 h后酶活性达到最大值.     

不同培养条件对益母草悬浮培养细胞生长的影响

测定了不同的基本培养基,不同的激素水平,不同的糖含量以及不同的初始接入量对益母草悬浮培养细胞生长的影响．结果发现MS培养基最益于悬浮培养细胞的生长,3％的蔗糖水平细胞的生物量增长率最大．在初始接入量为6g／L时细胞增殖最快,在低接入量的情况下细胞停止生长．在6-BA无论与2,4-D组合还是与NAA组合,均在细胞分裂素2mg／L和生长素0．5mg／L时悬浮培养细胞的增殖率达到最大．研究结果为细胞培养生产益母草生物碱提供参考依据．     

不同培养条件对金钗石斛悬浮培养细胞生长的影响

研究了培养温度、培养时间、初始p H、摇床转速对金钗石斛液体悬浮培养的影响。结果表明,在培养条件分别为培养温度为25℃、培养天数为30d、初始p H为6、摇床转速为120r/min时,金钗石斛原球茎增殖量最大,石斛碱的积累量也相对最高。     

草珊瑚细胞悬浮培养之研究

报道了草珊瑚（Ｓａｒｃａｎｄｒａｇｌａｂｒａ）细胞悬浮培养的某些特性。细胞悬浮培养的摇床转速对草珊瑚细胞生长至关重要、培养物在１００ｒ／ｍｉｎ速度下振荡培养几乎难以存活，最佳的摇床转速为４０ｒ／ｍｉｎ（２３．５ｈ／ｄ＋８０ｒ／ｍｉｎ（０．５ｈ／ｄ），其生长可增加５倍左右。细胞悬浮培养的接种量以２．０ｇＦＷ／瓶合适，其培养物的月产率１３．２２ｇＦＷ／瓶（或１８．７３ｇＤＷ／１）。细胞生长的时间进程是，接种０－５ｄ，细胞增殖十分缓慢，１０－２０ｄ迅速生长，２０ｄ后基本停止生长。培养基的ｐＨ迅速下降时是细胞增殖缓慢的时期，当培养基ｐＨ值开始升高时，细胞增殖也显著加快。黄酮苷类物质的合成在０－２０ｄ迅速增加，２０ｄ左右达到高峰。     

银杏细胞悬浮培养及黄酮的产生

本文研究了激素、培养基的成分组成及诱导子对银杏悬浮细胞生长及黄酮产生的影响，结果表明：在银杏细胞悬浮培养过程中，NAA和6-BA组合使用比NAA、6-BA单独使用更有利于细胞的生长，当培养基的蔗糖浓度达到35g．L^-1时，比较有利于细胞的生长；去掉培养基中的氮源，虽不利于细胞的生长，但有利于细胞中黄酮的累积，黄酮的含量可达2．16％，培养基中附加0．1g．L^-1琼脂糖诱导子可使细胞中黄酮含量提高到细胞干重的2．23％。     

培养条件对银杏悬浮培养细胞黄酮合成影响研究

对12个不同品种的银杏树幼叶及其诱导的愈伤组织进行了银杏黄酮含量测定，发现其存在较大差异．梅核品种幼叶黄酮含量最高，为3．32％，大白果品种幼叶黄酮含量最低，为0.84％；梅核品种幼叶愈伤组织黄酮含量最高，达1．26％，岭南品种幼叶愈伤组织黄酮含量最低，为0.22％．选取生长旺盛、银杏黄酮含量高的愈伤组织在B5液体培养基中进行了银杏细胞悬浮培养，研究了多种条件对银杏细胞生长和银杏黄酮含量的影响．结果表明，在150mL培养瓶中装有50mL培养液，接种量为鲜质量30—40g/L，对培养细胞给予3000—40001x的光照、以蔗糖为碳源最有利于黄酮的合成，以葡萄糖为碳源则最有利于细胞生长．HPLC检测结果显示，银杏悬浮培养细胞中银杏黄酮含量可达细胞干质量的2．82％．     

生物量对黄花蒿悬浮培养细胞生长的影响

黄花蒿细胞悬浮培养过程中，分别以１０、３０、６０、８０ｇ／Ｌ的接种量进行细胞生长的对比实验．在所述培养条件下的最适起始细胞浓度为鲜重６０ｇ／Ｌ培养基．起始培养的细胞浓度直接影响细胞的生长周期增殖倍数．起始浓度越高，细胞生长周期越短，但细胞的增殖倍数越小．起始细胞浓度对黄花蒿悬浮培养细胞对数生长期的比生长速率影响不大．     

肉苁蓉寄生对梭梭生长的影响研究

在新疆石河子149团肉苁蓉人工繁育基地,以被肉苁蓉寄生的梭梭（A）和未被肉苁蓉寄生的梭梭（CK）为研究对象,分别测定其株高、冠幅、地径、当年生枝条生长量和根系;同时,对其生境的土壤水分变化动态进行了定期连续测定。结果表明：调查对象A的株高、冠幅和地径的月平均增长率都小于调查对象CK;调查对象A当年生枝条增长率达最大值的时间滞后于调查对象CK,由此可知,肉苁蓉寄生对梭梭当年生枝的生长存在一定程度抑制;梭梭主根发达,被肉苁蓉寄生后,细根所占比例较高,这有利于梭梭自身的生长和为肉苁蓉寄生提供营养。     

中药肉苁蓉的雌激素作用研究

中药肉苁蓉是著名的补益中药,且具有一定的雌激素作用.通过查阅大量文献,从植物雌激素成分组成和药理作用、中药肉苁蓉的介绍及肉苁蓉的雌激素作用三个方面对中药肉苁蓉的雌激素作用的研究进行总结分析,为后续对其发挥雌激素作用的活性成分研究奠定基础.     

肉苁蓉营养器官的比较解剖学研究

比较三种不同形态肉苁蓉的茎和鳞片叶的内部构造和营养物质储藏方式,结合形态与功能的相关性,探讨肉苁蓉茎和叶形态结构的变异与环境的适应性问题．取三种肉苁蓉的茎和鳞片叶,用石蜡切片法制成永久制片,显微镜观察并照相．比较茎和叶中维管束的排列、数目,导管数目、长度、孔径等指标．三类不同形态的肉苁蓉茎中维管束都为散生排列,属典型的外韧维管束类型;一种为针状排列,其余为指状排列．其鳞片叶为等面叶,叶肉不分化．三种不同形态肉苁蓉内部结构的差异与环境因素无直接关系．     

肉苁蓉茎水溶性多糖SPA的分离纯化与鉴定

从野生肉苁蓉的茎中分离出水溶性粗多糖.粗多糖经Sevage法脱蛋白、反复冻融、高速离心、超滤分级,得级分SPA.经高压液相色谱等方法证明SPA为均一组分,气相色谱分析,SPA的单糖组成为Ara, Rha,Man,Gal, Glc,摩尔比依次为1.83∶1.00∶3.06∶4.56∶14.74.以上结果表明多糖SPA是以葡萄糖和半乳糖为主兼有阿拉伯糖、鼠李糖和甘露糖的中性杂多糖.     

不同授粉方式和花序不同部位肉苁蓉种子质量的比较研究

采用人工授粉方法,对结实的肉苁蓉种子进行分级和生活力等测定,研究肉苁蓉不同授粉方式及花序不同部位种子的质量差异。结果表明,肉苁蓉异株异花方式授粉的结实率为88.4%,同株异花方式授粉的结实率为43.4%,自花授粉不能结实;异株异花方式授粉种子质量(空胚率为25.67%,千粒重为0.088g,生活力为41.33%,粒径≥0.5mm的重量百分比为95.33%)优于同株异花授粉种子(空胚率为92.77%,千粒重为0.068g,生活力为0.67%,粒径≥0.5mm的重量百分比为1.33%)。同一花序不同部位种子中,花序下部种子质量最好(千粒重为0.114g,生活力为33.33%,空胚率为33.75%,粒径≥0.5mm的重量百分比为81.33%);花序中部种子次之(千粒重为0.086g,生活力为32.67%,空胚率为35.50%,粒径≥0.5mm的重量百分比为78.52%);花序上部种子质量最差(千粒重为0.078g,种子生活力为10.33%,空胚率为75.65%,粒径≥0.5mm的重量百分比占66.81%)。     

肉苁蓉(Cistanche deserticola Ma)种子的萌发及与寄主梭梭(Haloxylon ammodendron Bunge)的关系

在人工栽培条件下研究了专性寄生植物——肉苁蓉种子的形态解剖结构及其在寄主根上的萌发过程。肉苁蓉种子具有典型的列当科寄生植物种子的特征,种皮内仅有球形胚,外包以胚乳。根据观察发现,只有当寄主梭梭的根穿入肉苁蓉种子的种皮内且刺激其球形胚产生“芽管状器官”,并连接于寄主根上后种子才能萌发,与肉苁蓉种子连接的部位主要在根毛区。首先在与寄主根连接的“芽管状器官”的頂部膨大为瘤状物,以后在内部分化形成输导分子并与寄主的维管束相连通,进而在瘤状物远离寄主根的一端分化形成頂芽,由此长成肉苁蓉植株。     

肉苁蓉(Cistanche deserticola Ma.)胚胎学研究 Ⅰ.大、小孢子发生和雌、雄配子体形成

本文报道肉苁蓉大,小孢子发生和雌、雄配子体形成.主要结果如下;1)药壁发育为基本型,它由五层细胞组成,中层为二层,绒毡层分泌型,药室内壁未见纤维状加厚。2)小孢子母细胞相互分散,它们在减数分裂1时开始形成胼胝质壁。当小孢子从四分体中释放时,胼肤质壁消失。小孢子四分体为四面体型。其中有的四分体中的小孢子已分裂为二核。成熟花粉为二细胞型,花粉外壁较薄。3)倒生胚珠,单珠被和薄珠心。雌性孢原处于珠心表皮之下,为单细胞。孢原细胞直接起大孢子母细胞功能。随之,大孢子母细胞进行分裂形成直线型四分体。胚囊蓼型,由合点端大孢子发育而成。     

肉苁蓉对负荷运动小鼠肝脏保护作用的探讨

采用HE染色法、糖原染色法、聚丙烯酰胺凝胶电泳法,研究肉苁蓉对负荷运动小鼠肝组织、糖原及乳酸脱氢酶同工酶(LDH)活性的影响.结果显示负荷运动小鼠肝组织结构损伤严重,糖原减少、LDH5同工酶活性显著升高;服用肉苁蓉后负荷运动小鼠肝组织结构趋向正常,糖原丰富,LDH5同工酶活性明显下降.研究表明肉苁蓉可增加负荷运动小鼠肝糖原含量,降低LDH5同工酶活性,对肝脏具有保护作用.     

火焰原子吸收法测定肉苁蓉中的微量元素锰和铜

本文采用AAS300型火焰原子吸收分光光度计研究了测定新疆特色中草药肉苁蓉中微量元素锰及铜含量的方法,并通过实验对比了干法消化、湿法消化对测定结果的影响,测定结果的相对标准偏差〈2.1％。