乌蕨挥发油成分分析及其抗菌活性

 对植物乌蕨(Stenoloma chusanum(L)Ching)中的挥发油成分进行定性和定量分析并开展其抗菌试验.采用水蒸汽蒸馏提取挥发油成分,用气相色谱-质谱(GC/MS)联用仪进行成分分析;采用纸片法扩散法开展其抑菌试验.从乌蕨挥发油中分析出36种成分,鉴定了其中的24种,其主要成分是芳樟醇(24.76%),松油醇(7.24%)和香叶醇(6.06%).抗菌活性研究显示,乌蕨挥发油对枯草芽孢杆菌、伤寒沙门氏菌有明显的抑制作用,对铜绿假单胞菌大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌和藤黄微球菌抑制活性很低或没有活性.乌蕨挥发油成分检出率为72.0%,其中主要成分为单萜类化合物;挥发油具有一定的抗菌活性.     

抗菌肾蕨多糖的提取与分离

采用3种方法提取肾蕨多糖，其中综合法提取率为5．4％，可溶性多糖经DEAE-纤雏素52柱层析进一步纯化，得到1种中性糖和1种酸性糖，各占91．5％和8．5％．利用纸片法进行了抑菌实验，结果表明：肾蕨多糖显示了不同程度的抑制动植物病原菌的活性，对肠炎病病原菌、黑曲霉与稻瘟病病原菌的最低菌浓度为7．5mg／mL．     

三种褐藻乙醇提取物抗动植物病原菌活性

采用纸片法对3种褐藻的乙醇提取物进行抗动植物病原菌的实验.结果表明:3种褐藻的抗细菌活性强于抗真菌活性.大部分薄层层析分离组分的抗菌活性均强于未分离前的海藻粗提物.3种褐藻均对3种鱼病病原菌具有抑菌活性,其中以羊栖菜的抑菌效果为最好.其具体的活性物质还有待于作进一步的研究.     

紫球藻多糖的分离纯化及抗菌活性

从紫球藻中提取的水溶性粗多糖,用Sevage法脱蛋白后,经DEAE-纤维素52柱层析可得到纯品．利用圆形纸片法对紫球藻多糖提取物进行了抑菌实验．结果表明,紫球藻多糖提取物对稻瘟病病原菌和赤皮病病原菌有较强的抑制作用,其抗细菌活性与抗真菌活性没有明显差别,对稻瘟病病原菌的最小抑菌浓度为6．25mg／mL．     

海金沙多糖的分离纯化及抗菌活性

从海金沙中提取水溶性粗多糖,用Sevag法脱蛋白后,经DEAE-纤维素52柱层析和葡聚糖凝胶G-200柱层析可得到纯品,利用纸片法进行了抑菌实验.结果表明:海金沙多糖显示了不同程度的抗菌活性,对普通变形杆菌和稻瘟病病原菌有相对较强的抑制活性.     

乌天麻挥发性成分分析及抗菌活性研究

用水蒸汽蒸馏法提取乌天麻次生块茎（箭麻）的挥发性成分,用气相色谱质谱法（GC—MS）对其挥发性化学成分进行分离鉴定,并用面积归一化计算各成分相对含量．结果显示：乌天麻挥发性成分包含36种成份,20种成分已确定,大约占总质量的76．392％．乌天麻中主要是4-甲基-苯酚（20．409％）、苯乙烯（12．607％）、1-甲乙醚十六烷酸（8．842％）芳香醚（6．038％）．用乌天麻挥发性成分进行的抗菌试验表明：乌天麻挥发性成分对包括米曲霉、黄曲霉、小麦纹枯病、茶轮斑病和青霉在内的部分植物病源真菌有一定的抑菌活性．这将为天麻挥发油进一步开发利用提供了实验基础．     

复合酶法提取蕨麻多糖及其抗氧化活性研究

确定了复合酶(纤维素酶、果胶酶、中性蛋白酶)提取蕨麻多糖的最佳工艺,并对其体外抗氧化活性进行初步研究.在单因素试验的基础上,设计L9 (33)正交实验和L9(34)正交实验,分别得出复合酶的最佳配比和复合酶法提取蕨麻多糖的最佳提取工艺条件;采用清除·OH(羟基)自由基模型和O2-·(超氧阴离子)自由基模型评价了蕨麻多糖的抗氧化能力.结果表明:复合酶的最佳配比为:纤维素酶2.0％,木瓜蛋白酶1.0％,果胶酶2.0％;最佳工艺条件为∶料液比为1∶30、pH值为4.5,温度为45℃,酶解时间为60min,此时蕨麻多糖的提取率最大为8.12％,同时验证性实验也表明优化得到的提取工艺稳定可靠;蕨麻多糖对羟基自由基和超氧阴离子都具有较强的清除作用,并与浓度呈一定依赖关系,且对羟自由基的清除能力要比超氧阴离子自由基的清除能力强.     

蕨麻多糖的功能研究

综述了蕨麻的主要化学成分及其多糖功能的研究进展.查阅近几十年来有关蕨麻的研究性文献,进行分析、归纳和总结.研究结果表明,蕨麻中所含的多糖成分具有抗氧化、抗缺氧、保肝和免疫调节等多种功能.蕨麻多糖是蕨麻的主要活性成分之一,具有多种医疗保健功能,而且我国蕨麻资源丰富,值得进一步探讨和开发利用.     

蕨麻水溶性多糖的提取及其单糖组分的分析

本文采用热水提取、乙醇沉淀、a-淀粉酶法脱淀粉、链酶蛋白酶和Sevag法联合除蛋白,得到蕨麻多糖.对提取的蕨麻多糖进行了总糖含量及糖醛酸含量的测定.粗多糖(P1)总糖含量为41.8%,糖醛酸含量为11.1%.脱淀粉脱蛋白多糖(P2)总糖含量为39.4%,糖醛酸含量为35.9%.经纸层析和高效液相色谱分析,表明该多糖主要由阿拉伯糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、半乳糖醛酸组成,说明蕨麻多糖为酸性杂多糖.     

细辛多糖的分离纯化与免疫活性研究

本文对细辛(Asarum heterotropoides Fr.Var.mandshuricum(Maxim)kitag)中多糖进行了分离纯化以及初步的免疫活性研究。沸水提取细辛粗多糖,经80%醇析、Sevag法脱蛋白、DEAE-纤维素离子交换层析对粗多糖进行纯化得多糖级分A-1.5-水、A-1.5-0.1M、A-1.5-0.3M、A-1.5-0.5M、A-4-水、A-4-0.3M,并对级分A-1.5-0.3M做了进一步的研究。经Sepharose CL-6B分子筛层析测定其分子量约为4万。高效液相色谱(HPLC)法测定其单糖组成为半乳糖醛酸(74.7%)、阿拉伯糖(9.7%)、木糖(7.1%),此外还有痕量的半乳糖、葡萄糖醛酸存在。说明A-1.5-0.3M是一种以酸性糖为主的杂多糖。淋巴细胞转化试验结果表明细辛多糖A-1.5-0.3M对小鼠脾T、B淋巴细胞的体外增殖有明显的促进作用。     

Antagonism and Molecular Identification of an Antibiotic Bacterium BS04 Against Phytopathogenic Fungi and Bacteria

Through a modified agar well diffusion assay, antagonism of bacterium BS04 is tested. The data show that BS04 has antibiotic activity against phytopathogenic fungi and bacteria, including Phoma wasabiae Yokogi, Cochlibolus Heterostrophu, Exserohilum Turcicum, Curuvularia Lunata (Walk) Boed, Thantephorus cucumris, Fusarium graminearum, Xanthomonas axonopodis pv. Citri (Hasse) Dye and Xanthomonas zingiberi (Uyeda ) Savulescu. The products of bacterium BS04 can endure the treatment of a wide range of pH, and maintain the antibiotic activity after treatment of 100℃ for 30 min. The result suggests that bacterium BS04 has the potential as a promising biocontrol agent. In order to determine the taxonomic placement, the molecular identification of BS04 is performed. The comparative analysis of 16s rDNA sequences indicates that the 16s rDNA sequence of BS04 is highly homologous with sequences of typical Paenibacillus bacteria from the RPD library (from 92% to 99% ). And the constructed phylogenetic tree by using maximum-likelihood method with Bootstrap Trial 1000 proves that BS04 is subjected to Paenibacillus polymyxa.     

养殖环境病原菌以及超级细菌气溶胶的发生与传播的监测

为了观察和评估养殖环境耐药细菌气溶胶的形成与扩散,采用Andersen-6级空气样品收集器在养鸡场鸡舍环境舍内、外(到下风方向800 m)收集空气样品;与此同时,采集鸡只粪便样品。对样品分离的大肠杆菌(E.coli)进行药物敏感性测试。结果显示,各个地点分离的E.coli对利福平和青霉素完全耐药,但他们对妥布霉素、庆大霉素敏感;有不同数量的菌株对氟哌酸、链霉素、头孢哌酮、氯霉素、复合磺胺和四环素有不同程度的耐药性。采用多重PCR方法,分别对从鸡、猪、牛舍(共21个)及其环境中分离到的480株大肠杆菌,进行了5种毒素基因即STa,STb,LTa,Stx1和Stx2/Stx2e的检测。结果表明,分离株都携带有一定数量的毒素基因,很多携带2种或2种以上。通过对11个动物舍(鸡、猪、牛、兔)空气和粪便样品分离的426株肠球菌对四环素类(TetM)、氨基糖甙类抗生素及万古霉素VanA和VanB主要耐药基因的检测表明,14.55%的细菌对β-内酰胺酶耐药;分离株都存在不同程度的对四环素类抗生素的耐药性;共检测出31株肠球菌携带vanA和vanB耐药基因;绝大多数肠球菌携带氨基糖苷修饰酶(AME)基因的一种或几种。     

中药双联用复方对养殖鳗鲡主要致病菌的抑制作用研究

筛选单用抑菌作用较强的6种中药药材,依据棋盘法设计15种双联用复方,采用超微药粉琼脂稀释法测定各系列浓度组合的复方对养殖鳗鲡18株常见致病菌的抑制作用.实验结果表明,15种双联用复方对18株致病菌中绝大多数菌株的抑制作用比6种中药单用的抑菌作用强,呈现协同效应(FIC≤1)的比例占85.7%,其中显著协同(FIC≤0....     

鳗鲡肠道中嗜水气单胞菌的拮抗菌筛选

从鳗鲡肠道中分离到643株细菌,用点种法筛选出65株病原性嗜水气单胞菌的拮抗菌,研究拮抗效果最好的14株拮抗菌的抗菌谱和生长曲线及其与病原性嗜水气单胞菌的共凝集作用.研究结果显示:NAC琼脂培养基筛选的2株拮抗菌(Na 3-38和Nb 3-15)对7株指示菌均有较强的拮抗作用,Aa 3-22和Mb 3-7对7株指示菌中的5株有拮抗效果;除Na 3-38和Nb 3-15以外,其余12株的生长系数均大于嗜水气单胞菌;11株拮抗菌(Na 3-38、Nb 3-15、Ab 2-55、Ab 2-77、Ab 1-3、Aa 3-22、Aa 3-67、Mb 1-4、Mb 2-10、Mb 3-7和Mb 3-27)和嗜水气单胞菌的共凝集率大于10%.这表明:Aa 3-22和Mb 3-7在抗菌谱和生长曲线及其与病原性嗜水气单胞菌的共凝集作用等方面都适合作为益生菌.     

不同加工处理中草药对鳗鲡主要致病菌的抗菌效果

采用琼脂稀释法,测定了3种不同加工处理后的大黄(Pheum officinale B.)、黄连(Coptis chinensis F.)、黄芩(Scutellaria baicalensis G.)、五倍子(Rhus chinensis M.)、连翘(Forsyrhia suspense V.)、知母(Anemarrhena asphodeloides B.)等6种中草药对16株鳗鲡致病菌的MIC和MBC.结果表明:6种中草药通过不同的加工处理,其抑菌效果存在显著差异.6种中草药通过两种粉碎方法处理后的抑菌效果明显好于水煎煮法,而且药物粉碎颗粒的大小与药物抑菌效果也有一定的关系.     

新疆北疆地区临床型乳房炎病原细菌的分离鉴定

旨在调查新疆北疆地区奶牛乳房炎高发季节细菌性乳房炎病原菌种类,为该病的药物防治及免疫学防治提供科学依据。选择新疆北疆14个规模化牛场共采集623份临床型乳房炎奶样进行了细菌分离鉴定,结果显示,分离得到468株细菌,其中兼性厌氧革兰氏阴性杆菌占25．2％;链球菌占22．6％;葡萄球菌和微球菌52．2％。     

网箱养殖患病草鱼细菌分离鉴定与回复感染研究

利用常用细菌分离纯化方法从患病草鱼中分离出7株菌株,分别编号为Ⅰ～Ⅶ;对7株菌株的16SrRNA基因序列进行PCR扩增,均得到长约600bp的片段;将扩增结果进行测序,测序结果输入到美国国立生物技术信息中心(NCBI,http://www.ncbi.nlm.nih.gov/),用BLAST工具对序列进行同源性比对分析.结果表明:Ⅰ为沙雷氏菌,同源性达95%;II为腐生葡萄球菌,同源性达99%;III为荧光假单孢菌,同源性达97%;IV为产碱普罗威登斯菌,同源性达99%;V为嗜水气单孢菌,同源性达99%;VI为杀鲑气单孢菌,同源性达97%;VII为不动菌属,同源性达97%.将Ⅰ～Ⅶ号菌株回复感染健康草鱼,结果沙雷氏菌、腐生葡萄球菌、荧光假单孢菌、产碱普罗威登斯菌和嗜水气单孢菌对草鱼的危害较大,而杀鲑气单孢菌和不动菌属的感染症状不明显.     

三疣梭子蟹病原菌检测与分析

分离患病三疣梭子蟹样本中的病原菌,对分离菌株进行形态特征、理化特性和分子生物学鉴定。采用普通营养琼脂及zobell2216E海水营养琼脂分离患病样本中的病原菌。采用细菌常规生化鉴定方法,了解细菌的形态和生理生化特性。采用16SrRNA和gyrB基因序列同源性比对,进一步明确该病原菌的分类学地位。采用人工感染实验的方法,证明分离菌株是三疣梭子蟹致病病原菌。该菌革兰氏阴性,氧化酶阳性,葡萄糖发酵型,在低于10 g/L的NaCl胨水中不生长。16SrRNA和gyrB基因与需钠弧菌(Vibrio natriegen)同源序列具有99%的相似性。分离菌株对三疣梭子蟹有明显的致病性。需钠弧菌是引起江苏省连云港市赣榆县石桥镇九里村三疣梭子蟹严重死亡的病原菌。