乙酰丁香酮对根癌农杆菌介导的甘薯遗传转化的影响

研究了乙酰丁香酮 (AS)对根癌农杆菌介导的甘薯离体遗传转化的影响 .结果表明 :①菌液中加入AS不利于遗传转化 ;②AS的作用效果与培养基的 pH值有关 .培养基的 pH值为 5 8时 ,加入AS不能提高转化频率 ;而pH值为 5 2时 ,加入AS则能显著提高转化频率 ,特别是AS浓度为 2 5mg·L-1时 ,Kanr 芽获得率提高到 35 7%;③茎段外植体切口两端各滴加 2 μL 2 0 0 μmolL-1的AS ,可使Kanr 芽获得率达 13 3%.     

根癌农杆菌介导的水稻遗传转化

以粳稻、空育131、垦鉴稻7号成熟胚、幼胚诱导的愈伤组织为材料,将反义蜡质基因导入受体材料.经两次抗性筛选后,转入分化培养基中分化培养后获得转基因小苗.成熟胚和幼胚的转化效果比较,幼胚优于成熟胚.将转化植株进行PCR鉴定,证明外源目的基因已经整合到植株中.     

影响根癌农杆菌介导大岩桐转化因素的研究

以大岩桐为外植体,探讨根癌农杆菌介导的大岩桐遗传转化中存在的问题,找出影响转化的因素。     

根癌农杆菌对黄瓜和朱顶红的转化

用携带有构建质粒Ｃｏ１８的根癌农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）菌株ＧＶ３１１－ＳＥ转化双子叶植物黄瓜子叶和单子叶植物朱顶红鳞叶，得到了抗卡那霉素的黄瓜植株和朱顶红愈伤组织，并测出了ＮｐＤＨ活性，证明构建质粒Ｃｏ１８所携带的外源基因转移进了这两种植物细胞并得到了表达。     

根癌农杆菌电击转化条件的研究

探索了根癌农杆菌EHA105的高效转化方法.将双元载体质粒pBIN19/glgB经电击转化法导入根癌农杆菌EHA105,研究不同实验条件对转化率的影响.结果表明:在细胞浓度OD600为1.0时进行电转化,转化率最高,达到每微克DNA1.12×105CFU;当电场强度为11 kv/cm,转化率最高,达到每微克DNA1.78×105CFU;在一定的细胞浓度范围内,电击转化率与细胞浓度密切相关,转化率随着细胞浓度的上升而上升;质粒大小能影响电击转化率,转化率随着质粒的增大而下降.应用该优化的电击转化条件将双元载体质粒pBIN19/glgB成功导入根癌农杆菌EHA105,构建了植物双元表达载体.     

根癌农杆菌的高效电激转化

利用电激法双元载体质粒ｐＢＩ１２１导入根癌农杆菌ＡＧＬ－１并获得较高转化效率。探讨了不同电激条件对转化效率的影响，并检测了ＣａＭＶ３５Ｓ启动子ＧＵＳ基因在根癌农杆菌中的表达。     

影响根癌农杆菌介导的香蕉基因转化早期的主要因素

用含质粒载体pCAMBIA2301的根癌农杆菌（Agrobacterium inoculation）转化“641”香蕉（Musa AAA Cavendish subgroup cv.64-1）的薄片外植体，通过测定GUS基因瞬时表达率，对转化早期的主要影响因素进行了研究。结果表明：农杆菌EHA105较适合于介导转化，将薄片置于固体高渗培养基上培养4h后，通过真空减压法使农杆菌接种于其上，获得了较高的瞬时表达率（41.67%），是对照（8.33%）的5倍，农杆菌悬液稀释5倍用于转化较好，共培养3d为宜，薄片外植体越靠近根部，瞬时表达率越高。而外植体预培养会降低瞬时表达率。     

根癌农杆菌介导的马铃薯遗传转化体系

随着分子生物学研究的深入,植物功能基因组研究以及后续的大规模基因工程都必将依托于高效的植物遗传转化体系,因此植物遗传转化体系越来越成为分子生物学研究和遗传改良的重要技术基础．农杆菌介导转化法被认为是最具发展潜力的植物遗传转化方法．本文介绍了根癌农杆菌介导的马铃薯遗传转化体系．     

根癌农杆菌介导的马铃薯遗传转化体系的研究

以重庆主栽品种的叶片和茎段为外植体,研究了不同转化条件(菌液浓度、感染时间、预培养及共培养时间)对转化效率的影响,以及选择压和培养基对抗性愈伤出芽的影响,初步建立了马铃薯品种"台湾红"和"Spunta"的遗传转化体系并获得了转化植株.     

根癌农杆菌介导的骏枣愈伤组织遗传转化体系的研究

采用农杆菌介导法,对骏枣愈伤组织遗传转化体系进行研究.结果表明：进行遗传转化的合适条件为：愈伤诱导培养基MS＋6-BA 0.4 mg/L＋2,4-D 1.2 mg/L;浸染之前对愈伤组织进行6d的避光培养可提高愈伤组织在共培养过程中的成活率;愈伤组织在OD600=0.4～0.6的农杆菌菌液中浸染10 min,农杆菌LBA4404的生长情况最好;在28℃黑暗条件下共培养放置16 d对转化最适宜;头孢霉素的抑菌浓度为250 mg/L;卡那霉素的筛选浓度为125 mg/L.经PCR检测,初步证明外源目的基因已整合到骏枣基因组中,初步实现了农杆菌介导的骏枣愈伤组织遗传转化,与以骏枣茎叶外植体建立的遗传转化体系相比,以骏枣愈伤组织为外植体共培养时间长,有利于转化.     

硝酸银在水稻农杆菌转化中的作用

以籼稻、粳稻两种类型的成熟种子为外植体研究了不同浓度的AgNO3在水稻农杆菌转化中的作用。结果表明,在农杆菌转化前添加AgNO3可以提高愈伤组织诱导率,最适浓度为8～10mg／L,但对愈伤组织的分化没有明显促进作用;转化后添加低浓度的AgNO3可以减轻愈伤组织的褐化,提高抗性愈伤率和绿苗分化率,最适浓度为2-8mg／L。同时发现,无论是转化前还是转化后,添加高浓度的AgNO3对水稻愈伤组织的分化均具有毒害作用。     

影响水稻愈伤组织植株再生频率的因素研究

以水稻成熟种子为外植体,研究了影响水稻伤组织再生频率的各种因素,如渗透压,植物激素素和ＡｇＮＯ３等。发现不同基因型愈伤组织再生频率有很大差异,增加诱导培养基或分化培养基其中的渗透压和琼脂浓度,继代培养时加入适量的激动素或６－苄基氨基腺嘌呤以及在分化增减基中加入活性炭、玉米素等均可明显提高水稻愈伤组织的再生频率。     

根癌农杆菌介导苜蓿体胚转化及转基因植株再生

用含质粒载体pCAMBIA2301(带有受CaMV35S启动子调控的GUS基因和nptⅡ基因)的根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens转化晋南苜蓿Medicago sativa L.cv.Jinnan的体胚组织,发现负压处理有利于提高转化频率(可达35%),3批共158个体胚切块的转化实验共获得具有卡那霉素抗性的再生植株15株,经组织化学染色和分子检测,证实GUS基因已整合到转化植株基因组中,在芽、叶片、叶柄和根等组织中均有表达,并在土壤栽培过程中保持稳定的表达.     

籼稻不育系中A完善再生系统的研究

以籼稻不育系中A的种子为外植体，探讨了培养基配方、外源激素、营养物等对其愈伤组织诱导和绿苗分化的影响。结果表明，在NB培养基中添加2．5mg／L2，4-D以及脯氨酸、水解酪蛋白、山梨醇等营养物有利于提高籼稻中A的愈伤诱导率，添加外源激素3．0mg／L的6-BA和0．5mg／L的NAA有利于提高其分化率，添加0．1mg／LNAA可以使生根率达到100％。由此初步建立了籼稻中A的高效再生系统，为其遗传转化的顺利进行奠定了基础。     

Origin of the Chinese cultivated rice (Oryza sativa L.)

The following new research progresses are summarized and discussed, which are related to 3 main problems in origin of rice cultivation in China: 1. new hypothesis of rice cultivation in China— middle Yangtze River and upper Huai River regions; 2. primitive cultivated rice and the strengthen period of domestication; 3. genetic diversity centers of cultivated rice in China; 4. China and South Asia might be two independent systems of origin and differentiation of Asian cultivated rice; 5. morphological classification of common wild rice of China; 6. primitive progenitor of common wild rice; 7. direct progenitor of cultivated rice; 8. present or not the annual wild rice in China; 9. differentiation or not the common wild rice into Indica and Japonica; 10. origin and differentiation of Indica and Japonica.     

影响农杆菌介导的辣椒基因转化因素的研究

试验设置农杆菌类型、辣椒基因型、外植体、vir基因活化培养基、方法5个因素，研究了利用根癌农杆菌介导法辣椒遗传转化的效果。以获得Km抗性芽外植体频率为指标，发现农杆菌菌株类型和辣椒基因型对转化效率都有较大影响，直接影响着转化效率。采用预培养2d的子叶外植体，用农杆菌侵染5～7min，可获得最高的转化效率。     

水稻镉耐性研究进展

镉（Cd）是重要的土壤污染物且极易被水稻吸收,对水稻造成毒害.开展水稻耐Cd性研究已成为当前水稻育种的重要课题.文章综述了Cd对水稻生长发育、农艺性状、生理生化特性的影响,以及水稻耐镉性的生理生化机制、遗传机理和分子生物学研究进展,并对进一步开展水稻镉耐性研究提出一些建议.     

Salt tolerance of transgenic rice (Oryza sativa L.) with mtlD gene and gutD gene

Southern blot analysis indicated that mtlD gene (encoding mannitol-1-phosphate dehydrogenase) and gutD gene (encoding glucitol-6-phosphate dehydrogenase) had been integrated into the rice genome mediated by Agrobacterium tumefaciens LBA4404(pBIGM). The expression of the above two genes in transgenic rice plants was demonstrated by Northern blot analysis and enzymatic activity assay. Analysis of sugar alcohol showed that transgenic rice plants could produce and accumulate mannitol and sorbitol. The salt tolerance of transgenic plants was much higher than that of their controls.     

高蛋白籼稻品系H12体细胞无性系变异的研究

以高蛋白籼稻品系H12及其体细胞无性系HE1297、H28、H17、HE10和H1701为材料,进行了无性系变异的研究。结果表明：高蛋白无性系的变异在遗传上具有稳定性,其中千粒重等部分性状的稳定性和整齐度超过了亲本;变异主要在数量性状,与蛋白质含量性状连锁的有株主同、有效分蘖数、直链淀粉、千粒重、粒长等性状,变异方向既有同向也有反向;存在隐性变异,出现了1个糯稻品系H1701;花药培养力的变异非常明显,H12的花药培养力极低,大多数无性系的花药培养力有显著提高。