净化室与层流架相结合饲养繁殖裸鼠经验

为创造一个净化环境饲养裸鼠,我们将旧动物房改造成11M~2和9M~2两间净化室,一间为裸鼠繁殖室,一间为裸鼠实验室。净化室空气经过初、中、高效三级过滤,由鼓风机送风,室内保持正压,净化室内放层流架饲养繁殖裸鼠。进入净化室的一切物品经过严格消毒后由传递窗传入,层层拆包进入层流架,工作人员洗澡后更换无菌服进入净化室。经过一年多的使用,取得了一定的效果。裸鼠繁殖平均产仔数6.8只,平均成活率80％,一年内进行了四次空气菌落检测,均达到100级净化标准。此外,还在实验室进行了裸鼠肿瘤实验,均取得满意的效果。通过一年的裸鼠繁殖,实验证明在外环境条件比较差的情况下,利用旧房屋改造建立裸鼠室是可行的。只要严格管理,合理操作,同样能取得满意的效果。     

超净生物层流架内裸鼠长期饲育的研究

用自行设计制造的超净生物层流架对NC裸鼠进行了二年多的饲育,共繁殖NC裸鼠197只,成功地建立了人大肠癌裸鼠移植传代模型,已传至19代,传代总成功率97％(105/108)。本所饲育的裸鼠已用于多种用途的研究,表明层流架可适于NC裸鼠的长期饲育,是易于管理、投入较少、适合国内中小型实验室的实验动物设施。     

应用层流柜饲养裸鼠的体会

裸鼠是先天性胸腺缺陷动物 ,T细胞缺乏 ,是现今进行人癌异种移植的理想动物。然而由于裸鼠的饲养条件要求较高 ,使其应用受到了很多的限制。我们教研室经过几年的探索 ,在无菌实验室内使用层流柜 ,再加上比较严格的管理制度 ,成功地饲养裸鼠 18批次 ,5 6 0余只 ,都顺利地完成了实验。所以 ,在实验室条件下使用层流柜短期饲养裸鼠是可行的     

裸鼠自发性肿瘤病理学及免疫组织化学研究

研究了１９８１￣１９９５年进行人类肿瘤异位移植的２８５０只ＢＡＬＢ／ｃ裸鼠,发现４例裸鼠自发瘤,发病率为０．１４％。病理学及免疫组化证实其中３例为Ｂ细胞生恶性淋巴瘤,病变主要累及全身淋巴结、脾脏、肝、肾和肺;１例为肛管高分化然状细胞瘤。该４例裸鼠所移植的人类肿瘤均未生长。本文讨论了裸鼠自发瘤的发病率、病理学类型和发生原因。     

第四届免疫缺陷动物实验学术交流会即将召开

<正> “全国第四届免疫缺陷动物实验学术交流会”订于1992年11月26—28日在广东省湛江市湛江医学院召开,会议将交流和讨论有关免疫缺陷动物实验室的建立、管理和裸鼠自发肿瘤的生物学特性;人肿瘤移植瘤模型的建立及有关研究;人癌裸鼠移植瘤的实验诊断及治疗;正常人胚组织裸鼠移植及诱癌研究;麻风杆菌裸鼠感染等问题。以进一步开拓研究领域,提高研究水平。     

不同转移能力的人鼻咽癌细胞CNE-2Z克隆株在scid小鼠体内的验证和比较

报道将从人类鼻咽癌细胞系(CNE-2Z)分离出的不同克隆株细胞悬液,分别移植于严重联合免疫缺陷(scid)小鼠和BALB/c裸鼠的背侧皮下,于56天后处死所有小鼠,进行了大体和组织学检查。结果发现当每只scid小鼠移植2×10~6个瘤细胞时,CNE2-L2克隆株为高转移株,其淋巴转移率为100％,肺转移率为71％;而CNE2-L4克隆株为低转移株,其肺转移为13％,淋巴结未见转移;而当每只小鼠移植2×10~5个瘤细胞时,CNE 2-L2也为高转移克隆株,但比上者为低,其淋巴结转移率为71％。肺转移率为14％;CNE2-M2克隆株为中转移株。其淋巴转移率为43％,肺转移率为14％。与其裸鼠相比,当给每只BALB/c移植2×10~6个瘤细胞后56天时,尚未查见转移。说明两种免疫缺陷动物对恶性瘤细胞表型的表达,scid小鼠比BALB/c裸鼠为敏感。另外,皮下移植瘤细胞的数量也可能与转移出现的时间有密切关系。在相同时间内移植瘤细胞数越多,转移率也相对地增高,反之亦然。     

气功外气对人鼻咽癌细胞株裸鼠成瘤的影响

应用细胞培养技术,以裸鼠为实验动物,按双盲法进行了两次实验,第一次实验由气功师发放外气作用于人鼻咽低分化鳞癌细胞株(CNE-2),然后将受功组和非受功组(对照组)细胞分别接种于裸鼠(NC-Z裸鼠),结果受功组成瘤受到明显抑制,两次实验的抑制率均为100％(3/3和4/4)。两次实验组织病理检查证实:受功组裸鼠接种癌细胞部位的组织均未见癌,肝、肺组织也未见癌;非受功组裸鼠瘤组织均为低分化鳞癌,除第一次实验的2号鼠见肺转移癌外,其余各鼠肝,肺均未见癌。本研究提示有进一步研究气功外气抑瘤及其机理的必要性和可能性,同时也为气功外气治疗鼻咽癌提供有意义的资料。     

外伤所致裸鼠真菌性角膜溃疡的报告

某实验室购入实验用裸鼠,由于雄性鼠间的争斗发生了眼部咬伤,两周后裸鼠眼角膜溃疡,经诊断为真菌感染。建议当引进雄性动物合笼时,要加强管理,发现同笼争斗立即分开,对发病的动物隔离或淘汰。     

人食管癌裸鼠移植瘤株建立及其应用的研究

用人食管癌组织直接接种于裸鼠,建立两株裸鼠移植瘤株,分别命名为人食管鳞状细胞癌裸鼠移植瘤(HEC_2)和人食管腺鳞癌裸鼠移植瘤(HEC_6),两瘤株的鼠间传代达40余代,历时3年,生长稳定,潜伏期短,移值成功率达100％。并应用于抗癌药物和放射增敏的实验研究,结果表明:平阳霉素对HEC_6有明显的抑制作用,重复两次,抑制率分别为56.5％和8.87％;血卟啉衍生物(HPD)对HEC_2 X线分次照射有明显增敏作用。     

裸鼠人癌模型复制

裸鼠人癌模型复制陈系古，曾宪明中山医科大学实验动物中心由于裸鼠的免疫缺陷，在一定情况下，不排斥来自异种组织的移植，本实验室从１９８６年～１９９２年间，已成功地复制了近２０株人的瘤细胞系和人体原发癌组织移植建立了裸鼠人癌模型。现报导如下：材料与方法一、...     

人肺癌裸鼠常位移植实验研究

将高转移人肺巨细胞癌和低转移人肺腺癌常位移植于裸鼠肺内,其移植成功率分别为74％和56％,肺内移植瘤仍保持人原发肿瘤的病理组织学形态,其肉眼类型可呈肺门肿块,周围结节和弥散浸润型,与人类原发肺癌亦相似,而与局限膨胀生长或较少浸润的裸鼠皮下移植瘤有明显区别。肺内常位移植瘤较广泛地浸润胸部脏器,特别应当指出的是低转移肺腺癌细胞肺内移植其淋巴结转移率可达56％,甚至高于该癌系在beige裸鼠体内的淋巴结转移率。说明常位移植有利于恶性肿瘤表达其浸润转移表型。常位移植之肿瘤生物学行为更接近人体内原发性肿瘤的生物学行为,将成为研究人类肿瘤特性和实验治疗的更为适宜的实验模型。研究裸鼠皮下移植瘤和常位移植瘤基因表达的差异亦将为肿瘤浸润转移分子生物学基础的揭示作出贡献     

六年中裸鼠繁殖群动物自发性肿瘤发病情况研究

对饲养于SPF条件下的466只Nc系自育选留的繁殖群小鼠自发性肿瘤发病情况进行了6年观察研究,其中包括纯合子雄鼠(nu/nu)164只,杂合子雌鼠(nu/+)302只。每只动物的平均观察时间均达7个月以上,淘汰时均详细解剖学检查,检出病变者进行病理组织学及透射电镜观察确诊。多数肿瘤病例结合裸鼠间可移植性鉴定。共检出自发性肿瘤7例,发生于纯合子裸鼠(♂,nu/nu)5例,杂合子裸鼠(♀,nu/+)2例。本结果表明,在相同饲养环境条件下,裸鼠(♂,nu/nu)的自发性肿瘤发病率(3.04％)比其同系的有胸腺杂台裸鼠(♀,nu/+)(0.66％)明显增高,两者发病比较有显著性差异(P<0.05),且前者的平均发瘤鼠龄比后者为短。结果支持了免疫功能缺陷的裸鼠比其同系免疫功能正常鼠有更高的自发性肿瘤发生的观点。且表明了Nc系裸鼠的自发性肿瘤以恶性上皮性肿瘤为主。此外作者针对前人的观察结果,提出了对一裸鼠群体的自发性肿瘤发病率的正确评价,必须是在相同的生存环境条件下,相同的观察时间内与其相同品系或相同基因背景的有胸腺小鼠进行比较,并经详细的病理学检查,才能得出较客观可靠的结论这一见解。     

裸鼠洁净间的设计使用与管理

<正> 自六十年代无胸腺裸小鼠(以下简称裸鼠)问世以来,裸鼠作为医学科研特别是肿瘤学和免疫学领域中的动物模型得到日益广泛的应用。由于裸鼠缺乏正常胸腺,T细胞缺损,免疫性能低,导致对微生物环境的高度敏感及饲养繁殖的困难。在普通动物房条件下,裸鼠平均生存期只有14～30天,但在无病条件下其生存期能增加一年以上,根据美国专家制定的“医学生物学研究中无胸腺裸鼠管理及应用指南”所提要求,如何设计隔离屏障,并能较长时间的维持无病条件,至关重要。为满足本校科研工作需要,提供较大数量的合格裸鼠,我校实验动物科     

黄芩苷下调CyclinB1基因表达对SMMC-7721裸鼠移植瘤的抑制作用

目的:本研究通过对肝癌细胞株SMC-7721的裸鼠移植瘤模型使用不同剂量的黄芩苷处理,观察裸鼠移植瘤组织中Cyclin B1基因表达及裸鼠血清AFP蛋白含量的变化,初步探讨黄芩苷对肝癌的抑制作用,为中药黄芩的抗肿瘤应用提供理论基础.方法:使用传代后的人肝癌SMMC-7721细胞悬液建立裸鼠肝癌移植瘤模型,使用随机数字法分组.使用不同剂量的黄芩苷进行腹腔注射,2周后处死裸鼠解剖瘤体,使用免疫组化法测定肝癌组织中CyclinB1基因的表达水平、酶联免疫法测定各组裸鼠血清中AFP(甲胎蛋白)含量.结果:各黄芩苷组裸鼠的瘤荷显著低于对照组,黄芩苷组裸鼠抑制瘤肝癌组织中CyclinB1基因与对照组均有显著差异,并呈剂量负相关性(P0.01);黄芩苷组裸鼠血清AFP阳性例数显著小于对照组,具有统计学意义(P0.01).结论:黄芩苷对肝癌裸鼠移植瘤肝癌组织中CyclinB1基因有明显抑制作用,且其抑制强度与黄芩苷计量呈正相关关系;黄芩苷对肝癌裸鼠移植瘤外周血中AFP含量有明显抑制作用,其具体机制值得进一步研究.     

裸鼠自发性肿瘤病理形态及免疫组化研究

从１９８１年至１９９５年１５年中使用２８５０只ＢＡＬＢ／Ｃ裸鼠进行人体肿瘤移植研究，发现４例裸鼠自发性肿瘤，发病率为０．１４％。病理形态及免疫组化证实其中３例为Ｂ细胞淋巴瘤，病变主要累及全身淋巴结及脾脏，肝、肾、肺有灶性肿瘤细胞浸润；１例为肛管高分化鳞状细胞癌。４例所移植的人体肿瘤均未生长。本文讨论了裸鼠自发性肿瘤的发病率及病理类型、移植瘤与自发瘤的相互关系及裸鼠自发瘤的发生原因。     

三种癌裸鼠移植瘤肝脾转移的比较研究

摘要: 目的利用人卵巢癌、胃癌、结肠癌裸鼠移植瘤动物模型观察比较肝脾转移情况。方法分别将人卵巢癌、 胃癌、结肠癌实体瘤移植到裸鼠皮下,在建立人卵巢癌、胃癌、结肠癌裸鼠实体瘤模型的基础上,观察裸鼠实体瘤生 长速度、存活时间及肝脾转移病理形态学变化。结果人卵巢癌、胃癌、结肠癌实体瘤移植到裸鼠皮下,移植成瘤 率、肝转移率皆为100% ; 卵巢癌脾转移100% ; 胃癌脾转移62. 5% ; 结肠癌脾转移75% 。人卵巢癌裸鼠实体瘤生 长速度高于胃癌、结肠癌裸鼠实体瘤,且肝脾转移快,存活时间短; 三种癌裸鼠移植瘤肝脾转移病理形态均有差异。 结论建立的人卵巢癌、胃癌、结肠癌裸鼠移植瘤肝脾转移完整地再现了人卵巢癌、胃癌、结肠癌患者肝脾转移的 临床过程,为探讨人卵巢癌、胃癌、结肠癌肝脾转移生物学机制和抗转移提供参考,三种癌裸鼠移植瘤肝脾转移癌 均有差异。     

荷人鼻咽癌裸鼠血清MDA、NK活性及中药“癌克星”制剂对其影响的研究

利用BALB/c裸鼠复制人鼻咽癌(NPC)模型,检测荷人NPC裸鼠血浆MDA和脾NK活性,以探讨瘤宿主NK活性改变的原因和可能机理;观察中药“癌克星”制剂对NPC的抑瘤作用及对MDA和NK活性等的影响,以探讨其抑瘤机理,结果发现荷NPC课鼠血浆MDA(37.92±5.36nmol/ml)比正常裸鼠(13.90±1.63nmol/ml)明显增高(P<0.01),而脾NK活性(40.93±2.39)则比正常裸鼠(67.09±6.28)明显降低(P<0.01)。中药“癌克星”制剂对荷瘤裸鼠有抑瘤作用,抑瘤率在63.65—99.99％;并可降低荷瘤裸鼠血清MDA,提高NK活性,增加瘤组织单核细胞的浸润。实验提示,游离基类(FR)可能作为免疫抑制因子之一,使NK活性下降。“癌克星”对NPC有抑癌效应,其抑癌作用可能是通过降低瘤宿主内FR,提高免疫功能而实现。     

云芝糖肽对裸鼠荷人肝癌的抑制作用

比较了云芝糖肽（Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ—ｐｒｐｔｉｄｅｏｆＣｏｒｉｏｌｕｓｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ，ＰＳＰ）单方和云芝糖肽复方（ＰＳＰ＋丹参＋川芎＋黄芪）对荷人肝癌ＢＡＬＢ／Ｃ裸鼠的治疗作用，并观察了裸鼠体内脂质过氧化物（ＬＰＯ）和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的变化．试验结果表明，ＰＳＰ单方和复方按０．５～１．０ｇ／ｋｇ（体重）．ｄ连续用药２８天，对裸鼠荷人肝癌有明显的抑制作用，抑瘤率为５２％～５８％，增加药物剂量并不增强其抑瘤效果。裸鼠红细胞内５ＯＤ活性与对照组相比明显增强（单方：Ｐ＜０．０５；复方：Ｐ＜０．０１）．裸鼠血浆内ＬＰＯ含量有所下降，而以ＰＳＰ复方组对裸鼠血浆中过氧化反应的减弱更为显著。提示ＰＳＰ单方和复方的抑瘤效应可能与提高宿主的抗氧化能力有关。     

医院条件下SPF级裸鼠繁育与实验应用研究

用一间普通饲养室改建成裸鼠繁育室,面积为11m~2,缓冲间4m~2。缓冲间与繁育室之间是铝合金手拉式门和玻璃隔墙,门窗密封,缓冲间内装有电子灭菌灯。繁育室铺有马赛克地面,墙壁涂有防水、防酸涂料,内装有窗式空调、暖气、定时送排风装置,送排风口装有初效过滤膜。温度为28±2℃,相对湿度为40—60％,人工采光12h/日,通风为1次/h,0.5h/次,将引入的BALB/c裸鼠2对饲养在隔离器中,共繁殖4代,20窝,产仔143只;NC系裸鼠繁殖7窝,产仔46只,每月采集饲料、垫料、饮水、被毛、壁拭子、粪便培养48h,培养结果无SPF级动物须排除的细菌。送动物一对去中科院动物中心检测,细菌、病毒、寄生虫均为阴性,符合SPF标准。将海拉细胞2×10~5、肝癌细胞株(BEL—7402)肝癌细胞5×10~6移植于裸鼠颈部支下和右腋下,生长良好,BGC胃癌细胞亦在裸鼠身上成活生长。     

博安霉素及其单克隆抗体偶联物对裸鼠移植的人大肠癌的作用

大肠癌是我国常见的消化道恶性肿瘤之一,对大多数化疗药物均不敏感。本研究用裸鼠移植的人大肠癌动物模型,观察博安霉素及其与单克隆抗体R19偶联物对人大肠癌生长的抑制作用。在裸鼠可以耐受的剂量下,博安霉素对移植的人大肠癌(人结肠癌HT-29和人盲肠癌HCe-8693)均有明显的抑制作用。博安霉素15mg/kg和10mg/kg对人结肠癌HT-29的抑制率为92％和89％(P<0.01)对肓肠癌HCe-8693的抑制率分别为92％和190％(P<0.01)。博安霉素MMC和5-Fu在相当于l/9 LD50的剂量进行比较,博安霉素对HT-29的抑制率为82％;MMC为53％;而5-Fu仅为12％。博安霉素对人大肠癌的抑制作用明显较MMC(P<0.05)和5-Fu(P<0.01)为强。用人盲肠癌HCe-8693细胞免疫Lou/C大鼠,用大鼠杂交瘤技术获得抗人大肠癌单抗R19。用免疫组织化学的方法检测了R19单抗对肠癌的特异性。用ABC法检测,发现R19对裸鼠移植的人结肠癌HT-29和人结肠癌的外科手术切块呈阳性反应,对人胚脑、胸腺、淋巴结、肺、脾和血细胞等呈阴性,对肾小管上皮细胞显示弱阳性。用DextranT-40为中介体的方法连接大鼠R19和博安霉素形成的偶联物兼有二者生物学活性。实验共设5组,各治疗组的剂量以博安霉素计算为1mg/kg,每周二次,共8次,最后通过称量瘤重计算各组的抑制率,游离博安霉素为52％;R19与博安霉素混合物为34％;无关抗体M_3与博安霉素偶联物为48％;R19与博安博素偶联物为90％,显著地高于其它几组(P<0.01)。综上所述,博安博素及其与R19的偶联物对裸鼠移植的人大肠癌均有明显的抑制作用,尤其是博安霉素和单抗R19的偶联物在同等剂量下对肿瘤的抑制率显著地高于游离博安霉素。