鹅及家鸽血红蛋白的肽链与其末端结构

各类动物血红蛋白的化学结构的研究,近年来有了迅速的进展。诸如血红蛋白的分离、结构的测定及其比较生物化学等各方面,均已提出不少评论或报导。在鸟类血红蛋白的研究中,首由Saha等报导把鸡、珠鸡(Guinea fowl)、鸽、鸭等鸟类的血红蛋白的纸电泳行为;而Matsuda对鸡的血红蛋白进行了柱层析纯化、肽链的裂解、与游离的α—氨基端结构的研究。但对其它鸟类血红蛋白的化学结构的研究;迄今的报导甚少。     

补骨脂素和异补骨脂素的分离纯化研究

应用高速逆流色谱技术分离和纯化补骨脂中香豆素类成分补骨脂素和异补骨脂素.以补骨脂干燥成熟果实为原料,经乙醇回流制备补骨脂粗提物,经高速逆流色谱分离,所得样品由高效液相色谱检测纯度,并由对照品确定成分.采用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(7∶3∶5∶5)作为两相溶剂体系,从补骨脂粗提物中分离得到补骨脂素和异补骨脂素,二者纯度分别达到99.4%,99.1%.该法可以成功用于补骨脂粗提物中补骨脂素和异补骨脂素的分离,并且具有制备量大和分离效率高的优点.     

硫酸盐还原细菌的分离纯化和鉴定

从山西运城盐湖及太原市殷家堡污水处理厂等地采样,共分离到５株硫酸盐还原细菌纯菌株,对它们分别进行了形态学观察及生理生化特性测定,并结合现代分子遗传学方法其中一株鉴定到种,为Ｄｅｓｕｌｆｏｖｉｂｒｉｏｄｅｓｕｌｆｕｒｉｃａｎｓ,其余罩株鉴定到属,均归入Ｄｅｓｕｌｆｏｖｉｂｒｉｏ属。     

金黄色葡萄球菌A蛋白的分离和纯化

金黄色葡萄球菌A蛋白(Staphylococcal Protein A,简称SPA)能特异地结合许多高等动物和人的免疫球蛋白,因此常作为第二抗体应用在免疫化学研究及临床免疫学上。由于SPA是菌壁蛋白,分离高纯度的样品难度较大。本文采用金黄色葡萄球菌Cowan Ⅰ菌株为实验材料,比较了几种制备SPA粗品的方法,并以亲和层析及制备电泳方法提纯SPA,获得电泳单点纯的样品。     

浸铀真菌的分离和纯化研究

为获得浸铀真菌纯种,应用Dox(-)培养基、沙堡培养基(SDA培养基)、PDA培养基、Dox(+)培养基进行了铀矿石中真菌的分离,挑取孢子进行了纯化培养,共获得具有产酸能力的真菌4株,其中黑曲霉1株,青霉3株.试验结果表明,铀矿石中存在大量真菌,部分真菌具有产酸能力,并且这些产酸真菌生长速度较快,具有浸铀的潜力.     

烟草叶肉原生质体分离和纯化研究

实验比较了从烟草K326叶片分离叶肉原生质体的若干影响因素.结果表明,质壁分离的时间、酶液浓度、渗透压及酶解时间是影响原生质体产量和质量的决定性因素.研究结果对建立高效的烟草原生质体再生系统及其遗传操作有参考价值.     

Klebsiella aerogenes染色体DNA的分离和纯化

<正> 基因工程是在分子水平上进行人工拼接,获得具有生物活性的杂种DNA分子,然后通过转化或转染,使其在有机体或细胞中得到表达。在基因工程操作技术中,由于经常需要将染色体上的某一目的基因重组到载体DNA上,因此制备纯净的染色体DNA是十分必要的。迄今为止,从动、植物或微生物材料中分离、纯化染色体DNA的方法已有不少报导。Marmur的方法至今仍被广泛地应用于微生物染色体DNA的制备。这个方法的基本要点是:(1)用溶菌酶和十二烷基硫酸钠破坏细菌的细胞壁,使细胞内容物释出。(2)在高氯酸盐存在时用氯仿-异戊醇进行抽提,除去蛋白质。(3)用核糖核酸酶除去与染色体DNA混杂在一起的RNA。(4)用乙醇或异丙醇改变溶的极性,使染色体DNA呈纤维状析出,得以与细胞中其它成分分开。我们以细菌K.aerogenes为材料,按照Koh改进的Marmur法,获得了电泳纯的染色体DNA,     

烟草原生质体的分离纯化

研究从烟草叶片分离原生质体的若干影响因素.通过酶解法降解细胞壁释放出原生质体,利用离心和蔗糖漂浮法从粗提取液中纯化出原生质体,并通过血球计数板计数来比较制备的效果.结果表明:酶的种类、质膜稳定剂、渗透压稳定剂、pH及酶解时间是影响原生质体制备的重要因素.纤维素酶含量2%,果胶酶含量1%,2-N-吗啉乙烷磺酸(MES)浓度50mmol/L,Ca2+与甘露醇作为渗透压稳定剂,pH6左右,温度28℃,酶解时间4h时原生质体的分离效果最佳.     

莪术多糖的分离纯化

研究莪术多糖分离纯化的最佳条件,优化莪术多糖的提取纯化工艺,为进一步探讨莪术多糖的生物活性奠定基础.莪术经热水提取,酒精沉淀,脱色,脱蛋白得粗多糖.粗多糖用50%、75%乙醇分级沉淀得2个级分CZ1、CZ2,进行DEAE-纤维素柱层析.调节DEAE-纤维素的pH值,比较洗脱曲线的不同.CZ1经DEAE-纤维素柱层析得到1个组分,CZ2在酸性、中性条件下层析得2个组分,在碱性条件下得1个组分,随pH升高,回收率降低,纯度增高.各纯化得到的多糖组分经纸层析、琼脂糖凝胶电泳鉴定为单一成分.实验证明,pH是影响层析的一个重要因素,因此莪术多糖的最佳纯化pH值为7.0.     

酵母醇脱氢酶的分离纯化

报道了酵母醇脱氢酶的分离纯化，使用硫酸铵分级沉淀，SephadexG—100凝胶层析技术，从啤酒酵母提取液中分离出醇脱氢酶，收得率为10．9％，纯化倍数达53．2。     

丹皮多糖分离纯化和降血糖作用研究

用芍药科植物牡丹根皮为材料,采用三种不同的方法提取,经ＤＥＡＥ－纤维素ＤＥ－５２离子交换柱纯化,获得丹皮多糖（ＰＳＭ）纯品。动物试验证明,三种不同方法提取ＰＳＭ的纯品,在降血糖活性上有显著差异。蒸馏水浸提得到的纯品ＰＳＭ２ｂ降低血糖率为５９．９％（Ｐ＜０．０１,５０ｍｇ／ｋｇ）和５３．１％（Ｐ＜０．０１,１００ｍｇ／ｋｇ）。温水提取的纯品ＰＳＭ３ｂ降低血糖率为５５．８％（Ｐ＜０．０１,５０ｍｇ／ｋｇ体重）和４５．９％（Ｐ＜０．０５,１００ｍｇ／ｋｇ体重）,沸水提取的纯品ＰＳＭ４Ｃ无降血糖活性。     

沙蒿多糖分离纯化和理化分析

利用水提醇沉法从白沙蒿子中提取多糖;Sevage 木瓜蛋白酶法脱蛋白,ultrahydrogelTM500(7.8×300 mm)凝胶柱层析进行分离纯化;琼脂糖电泳进行纯度检查;苯酚-硫酸法测定总糖含量;UV法及IR法检测多糖性质;自动旋光仪测定旋光度;离子色谱鉴定多糖的单糖组分.结果表明,沙蒿多糖为均一组分,纯度为96.5%,比旋光度为 90°,还原性多糖.经离子色谱分析,沙蒿多糖由阿拉伯糖、木糖、来苏糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成,且物质的量之比为1∶4.98∶1.69∶27.86∶3.76∶13.92.     

产冷活性淀粉酶嗜冷菌的分离和纯化

文章主要对产冷活性淀粉酶的冷适应微生物进行分离和纯化。通过对菌株的分离和提取基因组DNA进行PCR扩增得到其16S rRNA基因后连接于T-载体再转入大肠杆菌JM109中，筛选阳性克隆转化子进行培养，最后提取质粒进行琼脂糖凝胶电泳检测。     

甘薯糖蛋白的分离、纯化和结构分析

采用二乙基氨基乙基52和葡聚糖凝胶G100柱层析法,从甘薯中分离纯化甘薯糖蛋白,并对其进行结构分析．用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检验纯度和分子质量;根据β-消除反应判断糖肽键的连接方式;利用气相色谱法分析单糖组成;通过红外光谱推断糖苷键类型．研究结果表明,甘薯糖蛋白是以共价键连接而成的结合蛋白,呈白色粉末状,易溶于水,分子质量约为62ku,属O-连接方式,含有β-糖苷键和典型酰胺羰基结构,蛋白质含量为12．01％,糖链部分含有岩藻糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖．     

山楂果胶低聚糖的诱导生成和分离纯化

以山楂果胶多糖为原料,经果胶酶降解获得山楂果胶多糖酶解液.分别选用不同的上样量、洗脱流速和洗脱体积经DEAE Sephadex A-25柱层析对酶解液进行分离纯化方案的优化.结果表明,当最初山楂果胶浓度为10 mg/mL,上样量为50 mL、洗脱流速为1 mL/min以及洗脱体积为3倍柱床体积时,分离纯化效果最好,山楂果胶多糖酶解产物分离纯化得到11个单独的洗脱峰.该实验为后续山楂果胶低聚糖的应用以及构效关系的研究奠定了基础.     

人参多肽的分离纯化

运用生物化学的技术和方法,以人参为原料,经乙醇提取后,采用大孔吸附树脂、离子交换、凝胶过滤等层析技术,分离纯化出一种人参多肽,经过HPLC鉴定其纯度为95%以上,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其分子量为3.5 KD到10 KD之间.     

东方弧菌SOD的分离纯化和特性研究

从东方弧菌５１８菌株的细胞中提取超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）。先以硫酸铵分级沉淀取得粗酶，再经ＤＥ－５２，ＤＥＡＥ－纤维素柱层析，并以５－５００ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸钾缓冲液作线性梯度洗脱，再次分级沉淀而获纯化的ＳＯＤ，呈棕黄色，其分子量为３８０００道尔顿，为二聚体，亚基分子量为１８５００道尔顿，原子吸收光谱测定其金属辅基为Ｆｅ＾＋＋＋。该酶反应最适温度为２５℃，室温下溶液中很易失活。紫外及可见光吸收光谱测     

甘薯糖蛋白和多糖的分离纯化及其鉴定

经水溶提取、乙醇沉淀、离子交换层析、凝胶过滤层析等步骤,成功从广薯98中分离到两种甘薯糖蛋白组分SPG-1、SPG-3和一种甘薯多糖组分SPPS-2.经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和凝胶过滤层析鉴定,均为单一的甘薯糖蛋白、甘薯多糖组分.