比布列西猩红-蛋白质体系的共振光散射及其分析应用

光散射技术在物理化学、胶体化学和高分子化学研究中具有十分重要的地位.自从Pasternack[1]建立了共振光散射技术以来.我们利用该技术,建立了十分灵敏的测定痕量DNA的方法[2,3].随后,共振光散射技术广泛用于痕量蛋白质、金属离子、表面活性剂和药物的测定中.本文报道了一种简单灵敏的蛋白质测定方法--比布列西猩红共振光散射方法.     

酸性铬深蓝共振光散射光谱法测定蛋白质的研究

基于人血清白蛋白 (HSA)对酸性铬深蓝共振光散射的增强效应 ,拟定了一种新的测定HSA的共振光散射法 .在pH =3.78的B R缓冲溶液中 ,酸性铬深蓝与蛋白质结合 ,产生强烈的共振光散射 ,在λ =36 5nm处 ,共振光散射强度较大 ,且共振光散射强度与蛋白质的浓度成线性关系 ,线性范围为 0 .0～ 12 .0 μg mL ,检测限可达 0 .13μg mL .该法简便、快速 ,用于人体血清样品蛋白质的测定 ,结果令人满意 .     

共振光散射比浊法测定胶片废水中银离子的研究

氯化银胶体在375、496和565 nm产生3个明显的共振散射峰,其中496 nm处的散射峰强度最大且最稳定,适于进行共振光散射比浊法分析.探讨了共振光散射比浊法的机理,建立了在酸性氯化钠-乙二醇溶液中,共振光散射比浊法测定银离子的新方法.线性回归方程IRLS=7.60cAg+-4.82,R=0.999 8;检出限0.04μg/mL.此方法用于实际样品测定,取得了满意效果.     

富勒醇/镱(Ⅲ)体系共振光散射法测定核酸

基于核酸对富勒醇/镱Ⅲ体系共振光散射强度的增强作用,建立了一种新的测定核酸的分析方法.富勒醇的水溶液表现出弱的共振光散射性质,但是当三价镱离子存在时,它的共振光散射强度显著增强,形成了一种稳定的富勒醇/镱Ⅲ共振光散射体系.鱼精DNA的加入使得该体系的共振光散射强度进一步增强.在优化条件下,0 -20.0μg/mL浓度范围内,共振光散射强度的增强值与鱼精DNA的浓度呈线性关系,检出限可达13.3 ng/mL.该法用于合成样品的分析,结果令人满意.     

四磺基金属酞菁类染料共振光散射法测定人血清白蛋白

在pH为2.0的Clark-Lubs缓冲溶液条件下,人血清白蛋白与四磺基金属酞菁类染料结合,使共振光散射急剧增强,并产生新的共振光散射光谱.不同体系在质量浓度0～3.0 mg/L范围内,共振光增强,与人血清白蛋白浓度呈线性关系,检出限为0.033～0.100 mg/L.表明四磺基金属酞菁类染料都可以作为共振光散射试剂测定人血清白蛋白.考察了某些共存物质的影响,初步讨论了反应机理.     

共振光散射技术在生化及药物分析中的应用

散射光在高分子化学、胶体化学中已得到广泛应用,在分析化学中已应用于色谱监测系统中,但在分子光谱分析中,通常散射光是一个干扰成分而采取诸如低温冷冻技术和场分辨技术加以消除或降低.1993年,Pasternack通过同时扫描普通荧光光度计的激发单色器和发射单色器获得了聚集体系的共振光散射光谱[1],在此基础上我们提出了应用卟啉在核酸表面长距组装导致光散射增强的现象建立和核酸的共振光散射分析方法[2].近年来,共振光散射技术已在生物大分子包括蛋白质、核酸和糖类分析,临床药物和金属离子分析中得到广泛应用,已成为一个新兴的光谱分析方法[3～5].     

变色酸2R共振光散射光谱法测定蛋白质

基于人血清白蛋白（HAS）对酸性偶氮染料变色酸2R的共振光散射的增强效应，拟定了一种新的测定HSA的共振光散射法。在pH=4.10的条件下，变色酸2R本身只有极弱的光散射，但它与蛋白质的结合物却有强烈的共振光散射作用，在λex=λcm=420nm处，光散射有最大的散射强度，并且光散射强度与蛋白质HSA的浓度成线性关系，线性范围为0．0－10．0μg/mL，检测限可达0．12μg/ml。该法简便、快速，用于人体血清样品蛋白质的测定并与考马斯亮蓝法比较，结果令人满意。     

用巯基丙酸修饰银纳米粒子共振光散射法测定稀土总量

依据文献合成了巯基丙酸修饰的银纳米粒子,并用共振光散射法调查了它们与稀土离子的相互作用.在pH 7.5的Tris-HCl缓冲介质中,银纳米粒子在467 nm呈现一弱的共振光散射峰.Eu3+离子的加入导致体系共振光散射峰显著增强,并伴随47 nm(从467到514 nm)的散射峰红移.上述光谱变化可能是由于Eu3+离子与纳米粒子表面的羧基发生配位作用所导致的粒子间的聚集引起的.根据体系对其它稀土离子类似的信号响应,我们建立了一种测定稀土离子总量的共振光散射新方法.最佳条件下,稀土离子浓度在6.0×10-7-8.0×10-6mol/L范围内与共振光散射强度呈正比,检测限为2.8×10-8mol/L.该方法简便、灵敏,用于环境水样中稀土离子总量的测定,结果令人满意.     

邻苯二酚紫共振散射法测定蛋白质含量

基于人血清白蛋白(HSA)对邻苯二酚紫的共振散射的增强效应,拟定了一种新的测定HSA的共振散射法．在pH=4．20的条件下,邻苯二酚紫只有极弱的光散射,但它与蛋白质的结合物却有强烈的共振散射作用,在λ562nm处,光散射有最大的散射强度,并且光散射强度与蛋白质HSA的浓度成线性关系,线性范围为0．0～10．0mg／L,该法简便,快速,用于人血清样品蛋白质的测定,并与用CPA-pA-Ba法测定的结果相比较,结果令人满意．     

二碘荧光黄共振光散射光谱法测定蛋白质

在pH4.41 Britton-Robinson缓冲介质中,白蛋白（BSA）与二碘荧光黄（DIIF）作用形成复合物,使最大波长377 nm的共振光散射光谱得到加强,根据其共振光散射的增强效应,可用于蛋白质的定量测定.研究了复合物反应的适宜条件,结果表明：在优化的条件下,蛋白质浓度在0.0-5.0μg/mL范围内与共振光散射强度呈良好的线性关系,方法的检出限为0.027μg/mL.用于合成样品中蛋白质的测定,获得满意结果.