野花生豆(Crotalaria mucronata)凝集素的细胞表面受体的研究

研究了异硫氰基荧光素和~(125)I标记的野花生豆凝集素,对A型细胞和牛精细胞表面的凝集素受体的定位、分布和数量。结果表明这些细胞表面的凝集素受体比较复杂,难以用一般动力学方法加以说明。D-葡萄糖、D-甘露糖、D-半乳糖和N-乙酰半乳糖胺等糖类和Con A、PHA、BSA对标记凝集素与A型细胞结合的影响各不相同。通过饱和曲线计算出A型细胞和牛精细胞表面的凝集素受体数目,分别为1.29×10~7和3.09×10~6个/细胞.     

牛精细胞膜上凝集素受体的分离及其测定方法

应用非离子型去垢剂Brij58增溶牛精细胞获得的膜蛋白,经VBL-Sepharose4B亲和柱层析分离,可获得在PAGE、SDS-PAGE中均呈现单一蛋白带的VBL受体.其亚基分子最为46500d.牛精细胞经Brij58增溶的膜蛋白经用~(125)I标记,再经VBL-Sepharose4B亲和柱层析,也能获得~(125)标记的凝集素受体.经测定,用亲和层析法获得的凝集素受体,保持了原有的生物学活性.     

荆豆(Ulex europaeus L.)凝集素Ⅰ的细胞表面受体研究

从Ulex europaeus L.种子中纯化的荆豆凝集素I(UEH I),不仅专一地凝集人O型血细胞,也能凝集牛精细胞,表明这些细胞表面存在有UEH I的受体.应用经FITC或~(125)I标记的UEH I与牛精细胞结合,研究受体在精细胞表面的分布;Glc、Con A、PHA和Fuc的浓度对~(125)I-UEH I与O型血细胞结合的影响;O型血细胞和牛精细胞与~(125)I-UEH I的饱和实验,获得饱和结合曲线或竞争性结合曲线,得出各自的Scatchard图,分别计算出O型血细胞和牛精细胞表面的UEH I受体的数目。     

荆豆(Ulex europaeus L.)凝集素Ⅰ的研究

用硫酸铵分级沉淀,当饱和度达40％时,荆豆种子中的荆豆凝集素I就被沉淀出来,再经处理,获得冻干的无盐制剂.当凝集素浓度为7.8μg/mL时,就能凝集人O型血细胞,浓度分别为125μg/mL或500μg/mL时,对人B或A型血发生凝集反应.其凝集O型血的凝集作用可被Fuc所抑制.上述制剂可通过CM—纤维素柱和Sephadex G—200柱2次分子筛过滤而纯化,此纯化的凝集素在PAGE中显示一条蛋白带,浓度为1.25μg/mL时可使O型血和牛精细胞发生凝集反应;浓度为40μg/mL或500μg/mL时,可分别使B型和A型血发生凝集反应.     

胃癌细胞株(SGC)细胞表面凝集素受体性质的研究

研究了温度、反应时间、蛋白水解酶和单糖对凝集素与SGC细胞反应的关系,还测定了几种凝集素对SGC细胞的毒性作用.结果表明:SGC细胞在50℃保温30min后,细胞表面的凝集素受体基本失活;凝集素与SGC细胞在25℃温育90min后,其凝集反应的强度不再增加;SGC细胞经胰蛋白酶和胶原酶处理后,对细胞表面受体的活性影响不大,但经木瓜蛋白酶处理后,则其受体活性全部丧失;Man、Glc、GlcNAc可以抑制SFL对SGC细胞的凝集作用,但几种单糖对SLL与SGC的凝集作用均无明显的抑制作用;LPL、LPL_1和SLL对培养的SGC细胞具细胞毒性作用,当浓度分别为0.5mg/mL、0.1mg/mL、5mg/mL时,就能使细胞坏死.     

4种软体动物凝集素的细胞凝集性研究

从4种软体动物肌肉中获得凝集素粗提液．用人的四种血型红细胞和三种动物红细胞检测其凝集活性，结果表明，每种软体动物凝集素至少凝集6种以上的红细胞．兔血红细胞对凝集素最敏感．能够和兔血细胞发生凝集反应的海螺丝、缢蛙、毛蚶、四角蛤蜊凝集素提取液的最小蛋白浓度分别为0．67μg／ml，0.78μg／ml，0．29μg／ml和0．49μg/ml。6种微生物细胞或孢子不能与凝集素样品发生凝集反应。     

动物精子发生及成熟过程中凝集素受体的分布与变化

对各种动物精子发生与成熟过程中生精细胞表面凝集素受体的变化做了综述 .精子发生过程伴随着不同凝集素受体的出现和变化 ,这些受体是由生精细胞自身合成的 ;精子在成熟过程中 ,质膜凝集素受体的合成、修饰及分布会进一步发生变化 ,这些变化与精子获得与卵子进行识别、粘附、结合等受精能力密切相关 .     

花生凝集素受体在中华绒螯蟹生精细胞的分布

以中华绒螯蟹为材料,应用凝集素印迹法检测中华绒螯蟹生精细胞中的花生凝集素受体.以凝集素组织化学技术为手段,采用生物素标记的花生凝集素对中华绒螯蟹精子发生过程中花生凝集素受体进行了标记,研究精子发生过程中花生凝集素受体的分布特征.结果表明,中华绒螯蟹生精细胞中的花生凝集素受体的分子质量为72 ku;精子发生过程中,不同的生精细胞膜有不同程度的阳性标记.精原细胞质膜上有较强的阳性标记,呈深棕色;精母细胞的质膜阳性标记减少;精细胞与精母细胞染色程度相似.PNA受体在生精细胞中分布,可能与生殖细胞发育以及生殖细胞之间或者生殖细胞与体细胞之间的信息传递有关.精子质膜、顶体区域也有阳性标记,这可能与精卵识别及结合等受精过程息息相关.     

棉花凝集素对枯萎病菌的抑制作用与其受体的研究

研究了ＦＩＴＣ或ＨＲＰ标记的棉花凝集与枯萎病菌丝体作用后，在荧光显微镜下或扫描电镜下可以清晰地看到ＦＩＴＣ－凝集素或ＨＲＰ－凝集素－受体复合物在菌丝体上的均匀分布实验表明，纯化的棉花凝集素对棉花枯萎病菌丝体的生长有较强的抑制作用，当凝集素浓度达１５０μｇ／ｍＬ时，可以使枯萎病菌丝体的生长完全停止。     

正常人和不育患者精子表面凝集素受体的研究

应用4种凝集素和经过FITC标记后分别与正常人或不育患者的精子相互作用,研究其凝集作用和膜上凝集素受体的分布.以铁蛋白或辣根过氧化物酶标记城口豆凝集素后再与精子反应,应用扫描电镜或透射电镜观察了正常人或不育患者精子表面膜受体的分布.     

Phaseolus lunatus Linn vel aff的种子中A型血专一性凝集素的研究

用亲和层析法从Phaseolus lunatus Linn vel aff的种子中纯化出一种对人类A型血专一的凝集素.该凝集素的粗浸提液都只对A型血细胞凝集,而对B、O型绝不凝集.当纯化的凝集素浓度为0.98μg/mL时,即能凝集A型血细胞,GalNAc、对硝基苯酚-β-D-吡喃半乳糖苷能抑制其凝集作用;酚—硫酸法测得凝集素含有3.8％的中性糖;该凝集素是一个促有丝分裂原,其细胞转化为67.9％;它的分子量为56500,有两种亚基,分子量分别为17200和14600.凝集素分子中亮氨酸和缬氨酸含量较高,分别为9.83和9.64,而酸性氨基酸含量远比碱性氨基酸为高.     

凝集素对上皮癌细胞的凝集作用

应用多种凝集素与6种上皮癌细胞株细胞、传代人羊膜胚胎细胞株细胞、正常人足月胚胎羊膜细胞和人A、B、O型血细胞、兔血细胞反应,检测其凝集素反应的程度;并通过荧光标记,测定凝集素受体在上述各型细胞膜上的分布;与此同时,还应用辣根过氧化物酶标记雪山豆凝集素,进行扫描电镜观察辣根过氧化物酶标记的雪山豆凝集素受体复合物在SGC肿瘤细胞表面上的分布情况.     

深层发酵培养的虎奶菇多糖对3种小球藻的凝集作用

以深层发酵培养的虎奶菇(Pleurotus tuber-regium)菌丝体和发酵液为材料,提取胞内和胞外多糖,研究对藻类细胞的凝集作用.结果表明:胞内多糖使蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)和捷克小球藻(Chlorella luteorividis)产生凝集的最小凝集质量浓度分别是23.3,186.4μg/mL,而胞外多糖使上述2种小球藻产生凝集的最小凝集质量浓度分别是3.3,211.3μg/mL,对海洋小球藻(Chlorella sp.)无凝集反应.     

3种食用菌凝集素的纯化和部分生物学活性的比较

柱状田头菇、鲍鱼菇、红菇子实体浸出液经硫酸铵分级沉淀、活性炭柱吸附、DEAE-SepharoseFF离子交换层析及Sephadex G-100分子筛层析,得到纯化的柱状田头菇凝集素(Agrocybe cylindraceaLectin,简称ACL)、鲍鱼菇凝集素(Pleurotus abalonusLectin,简称PAL)、红菇凝集素(Russula depallensLcetin,简称RDL).从纯化结果来看,RDL的纯化倍数及蛋白回收率比ACL和PAL高.ACL和RDL对供试动物的红细胞都有凝集作用,PAL只凝集部分动物红细胞并表现出血型专一性.ACL、RDL和PAL除凝集红细胞外也能凝集动物的其它细胞,但PAL不凝集S180瘤细胞.此外,3种凝集素也能凝集某些微生物,如细菌、放线菌、植物病原菌.凝集结果表明ACL、RDL的凝集活性普遍高于PAL.     

正常胃肠和癌变胃肠粘膜凝集素受体的研究

ＦＩＴＣ标记的２０种凝集素与正常和癌变胃肠组织的石蜡切片进行标记，结果表明，ＦＩＴＣ－ＰＮＡ和ＦＩＴＣ－ＬＰＬ对正常胃体和幽门上皮细胞呈阴性反应；ＦＩＴＣ－凝集素与胃癌粘膜细胞反应，以ＰＮＡ、ＬＰＬ阳性率最高，与肠癌粘膜细胞反应，则以ＳＭＬ和ＣＫＬ的阳性率最高。实验揭示了癌变胃肠粘膜与正常胃肠粘膜表面的糖复合物各不相同，导致与凝集素结合反应的强度也不相同。