高香草酸—H2O2—HRP荧光酶联免疫分析测定HRP的研究

提出了高香草酸－Ｈ２Ｏ２－ＨＲＰ荧光酶联免疫分析测定ＨＲＰ的新方法。该法基于ＨＲＰ催化Ｈ２Ｏ２氧高香草酸生成能产生荧光的物质，该物质在Ｅ＝３１７ｎｍ激光作用下产生荧光，     

二苯胺-H_2O_2-HRP伏安酶联免疫分析新体系的研究

提出了以二苯胺为底物的伏安酶联免疫分析新体系测定辣根过氧化物酶 (HRP)的方法 .通过线性扫描二阶导数极谱法测定 HRP催化 H2 O2 氧化二苯胺的产物 ,从而间接的测定 HRP的浓度 ,进而用于酶联免疫分析 .在 p H=8.5的 Britten-Robinson(BR)缓冲溶液中 ,二苯胺的氧化产物可以在 -0 .53V(vs.SCE)左右处产生一个灵敏的极谱还原峰 .在选定的最佳条件下 ,应用此峰测定 HRP的检测限可达 1 .0× 1 0 - 9g/m L,测定 HRP的线性范围是 4 .0× 1 0 - 9～ 2 .0× 1 0 - 7g/m L.另外 ,还推导了酶催化反应和电极还原反应方程式     

化学发光酶联免疫分析测定血清中乙型肝炎表面抗原

提出了曙红（Eosin)-H2O-HRP-Luminol化学发光体系测定HRP（辣根过氧化物酶）及HRP标记物的方法。将该方法与免疫分析技术相结合成功地用于测定病人血清中乙型肝炎表面抗原的含量，测定结果与经典的ELISA显色光度法进行对照,二者相关性好。     

伏安酶联免疫分析中一类新的HRP底物体系的初步研究

提出了以酚红、1,2,5,8－四羟基蒽醌、1,8－二羟基蒽醌三种染料类物质作为电化学酶免疫分析中辣根过氧化物酶（FRP）催化氧化反应的底物,这三种具有电化学活性物质,在HRP的催化作用下,被H2O2氧化生成非电活性的产物,导致测定的电流下降,其减少程度和HRP的浓度有一定的关系,从而建立了三种底物测定HRP的新体系,比较了它们测定HRP的灵敏度,对酶催化反应机理进行了初步的探讨。     

能量转移荧光法测定血清中淀粉酶的活性

将5(4,6-二氯三吖嗪)氨基荧光素(DTAF)和普施安红MX-8B活性染料同时标记在淀粉的适当位置,制得了测定淀粉酶活性的荧光新底物。在此底物中,染料将从荧光剂上获得能量转移并使荧光熄灭。淀粉酶催化淀粉的水解,导致能量转移效应降低,荧光强度增大。用此新方法测定了血清中淀粉酶活性,与标准方法比较,相关系数为0.994。     

基于对羟基桂皮醇的新型酶联荧光免疫传感系统测定布氏杆菌抗体

以一种纯天然产物对羟基桂皮醇(4-hydroxycinnamic alcohol,HCA)为辣根过氧化物酶(HRP)底物,建立对羟基桂皮醇-辣根过氧化物酶-过氧化氢新体系。对羟基桂皮醇本身只有极弱的荧光,在HRP催化下可被H2O2氧化成二聚体产物,该二聚体在315nm的激发光下能发射波长为467nm的强荧光,并且反应体系荧光强度增加值与HRP量在一定浓度范围内呈线性相关。根据此关系和竞争型免疫定量原理,建立兔布氏杆菌抗体测定的荧光酶联免疫传感体系,并对免疫测定条件如pH值、HRP-BrAb用量、BSA和流速等进行优化。运用制备传感体系测定兔布氏杆菌抗体的质量浓度线性范围为2.7～90μg/L,检测限为2.7μg/L,相对标准偏差为4.6%;对羟基桂皮醇在空气中较稳定,对人体无毒害,在临床上可代替传统HRP底物。     

热敏相分离模拟酶催化荧光免疫分析法测定乙肝表面抗原

以聚Ｎ－ 异丙基丙烯酰胺（ＰＮＩＰ） 作为免疫反应载体, 以铁酞菁作为ＨＲＰ的新型模拟酶来标记抗人ＨＢｓＡｇ 抗体, 建立了基于热相分离技术的夹心型荧光免疫分析ＨＢｓＡｇ 的方法． ＨＢｓＡｇ浓度在２０ ～５０００ｎｇ／ｍＬ范围与体系的相对荧光强度呈良好线性关系． 检测限８ｎｇ／ｍＬ．     

二苯胺—H2O2—HRP伏安酶联免疫分析新体系的研究

提出了以二苯胺为底物的伏安酶联免疫分析新体系测定辣根过氧化物酶（HRP）的方法.通过线性扫描二阶导数极谱法测定HRP催化H     

偶合放大反应化学发光酶联免疫分析测定人血清乙型肝炎E抗体

提出了一种偶合放大反应化学发光酶联免疫分析测定人血清乙型肝炎Ｅ抗体的新方法．本法对ＨＢｅＡｂ－ＨＲＰ测定的灵敏度比ＨＢｅＡｂ－ＨＲＰ催化Ｌｕｍｉｕｏｌ－Ｈ２Ｏ２直接化学发光体系高２．５×１０２倍．对ＨＢｅＡｂ的测定采用竞争性抑制法，对ＨＢｅＡｂ阳性对照血清的测定范围为１：１～１：３２７６８，用所建立的方法对实际病人血清样品进行了测定，并与现行的ＥＬＩＳＡ显色光度法进行对照，两种方法相关性很好．     

表面活性剂对联苯—H2O2—HRP伏安酶联免疫分析体系测定HRP的影…

考察了多种表面活性剂对联苯胺－Ｈ２Ｏ２－辣根过氧化酶伏安酶联免疫分析体系测定ＨＲＰ的影响，并对其作用机理进行了探讨。结果表明，表面活性剂在一定的浓工范围内对反应具有增敏作用并且对还原电位产生一定的影响。据此可通过加入适当的表面活性剂提高分析方法的灵敏度。     

化学发光酶免疫分析法测定血清前列腺特异性抗原的研究

目的建立化学发光酶免疫分析法测定血清前列腺特异性抗原,用于临床前列腺癌、前列腺增生、前列腺炎患者病情的监测和预后.方法化学发光酶免疫分析法(CLELA)采用辣根过氧化酶(HRP)-鲁米诺竞争法.结果该方法的灵敏度为0.01μg/L,在0.5～80μg/L的范围内线性良好.CLEIA测定血清前列腺特异性抗原的批内、批间与日间变异系数分别为5.0%,4.97%和4.93%.在血红蛋白浓度<2.4g/L、总胆红素浓度<342μmol/L、甘油三酯浓度<9.9mmol/L时的干扰率无临床意义.与放射免疫分析法有较好的相关性(r=0.9472).结论CLEIA法测定血清前列腺特异性抗原能及时有效地满足前列腺癌、前列腺增生、前列腺炎患者的临床需要,有助于进一步对检测试剂盒的研制.     

过氧化氢酶的荧光法测定及其在海洋环境污染评估中的应用

建立了一种新的测定过氧化氢酶的方法.在酸性介质中,Fenton反应产生的羟基自由基(·OH)能将几乎无荧光的2,2′ 联吡啶氧化成强荧光物质,羟基化产物的最大激发和发射波长分别是340nm和430nm.过氧化氢酶(CAT)催化H2O2分解为H2O和O2,抑制Fenton反应,导致2,2′ 联吡啶羟基化反应产率降低,体系荧光强度减弱.体系荧光强度的减弱与过氧化氢酶的量成正比.用此法直接分析海洋生物样品的CAT活力,结果表明,该方法操作简便、测定快速,可作为一种简便的过氧化氢酶的测定方法.     

重金属汞离子免疫分析方法的研究

快速定量检出环境及食品中的重金属离子已成为世界范围内的研究热点.免疫分析方法具有灵敏度高、特异性强、速度快、成本低、容易操作等优点,被广泛应用到环境和食品中重金属离子的检测中.本文主要介绍了重金属汞离子抗原制备过程中双功能试剂的选择、单克隆抗体的制备以及免疫分析方法的建立,并且就其与新型分析方法的结合趋势进行了探讨.     

ODA—H2O2—HBsAg—HRP伏安酶联免疫分析测定人血清乙型肝炎表…

提出了一种偶合反应伏安酶联免疫分析测定人血清乙型肝炎表面抗体（ＨＢｓＡｂ）的新方法。该法将ＨＢｓＡｇ－ＨＲＰ催化Ｈ２Ｏ２氧化邻联茴香胺（ＯＤＡ）的反应与邻联茴香胺的氧化产物在电极上的反应相偶合，在ＢＲ缓冲溶液中，在－０．５６Ｖ（ＳＣＥ）左右产生灵敏的极谱波，根据测定标记在乙型肝炎表面抗原上的ＨＲＰ的量，求得发生免疫反应的乙型肝炎表面抗体的含量。本法对ＨＢｓＡｇ－ＨＲＰ及ＨＢｓＡｂ测定的灵敏度均高于     

人尿中IgG的时间分辨荧光免疫分析法──以铕标记链亲和素作为标记物

利用铕标记链亲和素作为标记物，建立了固相抗体竞争性的人尿中ＩｇＧ的时间分辨荧光免疫分析法，标准曲线范围０．６２５～４０．０ｍｇ／Ｌ．检测范围宽，可以用于检测人尿中的ＩｇＧ含量，不用对样品进行稀释，能满足临床检测需要．     

以1-氯萘酚为底物的分光光度法测定辣根过氧化物酶

提出了1-氯萘酚-H2O2-辣根过氧化物酶(HRP)催化动力学光度法测定HRP的新方法.在pH 10.0的B-R缓冲溶液中,HRP催化H2O2氧化1-氯萘酚生成有色化合物,通过测定该有色化合物在波长为580 nm处的吸光度值,间接测定HRP的含量.在所选定的实验条件下,测定HRP的线性范围是3.0×10-9～5.0×10-7 g/mL,检测下限为2.0×10-9 g/mL.此方法可以应用于测定动植物体内的抗原和抗体.