牛奶黄嘌呤氧化酶的纯化性质研究

本文建立从牛奶中分离纯化黄嘌呤氧化的酶的工艺,该工艺采用正丁醇－硫酸铵分级提取、磷酸钙凝胶吸附、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５０层析纯化获得纯品。从磷酸钙凝胶上解吸到的ＸＯＤ粗酶化活性达５．０９６Ｉ．Ｕ／ｍｇ－ｐｒ,提纯３４０倍,产率达７４．３％。每单位粗酶的吸附剂用量以６ｍｇ为最佳。纯酶的最大紫外吸收在２８５ｎｍ处,酶活性测定的最适ｐＨ在８．６０～１０．１５之间,最适温度在２５℃～３５℃间。１ｍｏｌ／     

利用黄嘌呤氧化酶提高病毒唑转化率

研究了纯牛纯黄嘌呤氧化酶对病毒唑合成有促进作用，进而选育具有高活性黄嘌呤氧化酶的球形节杆菌ＡＴＣＣ８０１０代替纯酶，证帝了非增殖的完整球形节杆菌细胞也对病毒唑合成有促进作用，为病毒唑的酶合成提供了一种新的方法的思路。     

黄嘌呤氧化酶微型生物传感器及其应用的研究

该文利用Ｎａｆｉｏｎ和电化学聚合苯酚（ＰＰｈ）复合膜将黄嘌呤氧化酶（ＸＯＤ）成功地固定在碳纤维微电极上，制成黄嘌呤氧化酶微型传感器。在５．０×１０－５～１．８×１０－３ｍｏｌ／Ｌ范围内次黄嘌呤浓度与传感器的电流响应呈线性关系，相关系数为０．９９９０。该传感器具有灵敏度高，抗干扰能力强，使用寿命长等特点。传感器用于心肌细胞缺血性损伤过程中胞外次黄嘌呤的测定，结果满意。     

光谱法研究杨梅酮与黄嘌呤氧化酶相互作用

应用利用紫外-可见光谱法研究了生理条件下(pH值为7.4)杨梅酮(myricetin)与黄嘌呤氧化酶(XO)的相互作用.实验结果表明，随着XO的加入时间的增加，杨梅酮的吸收I带、Ⅱ带的光谱发生了明显的减色效应；与此同时，在331nm处随时间逐步出现-个新的最大吸收峰，其吸光值逐步增大，吸光值从0.649增大到1.053...     

平板扩散法测定黄嘌呤氧化酶的活性

通过对Arthrobacter sp.X11菌株所产黄嘌呤氧化酶(XOD)活性测定方法的研究和比较,建立一种简便可行的黄嘌呤氧化酶活性快速检测方法,即平板扩散法.实验结果表明,该方法测得的显色圈直径与辣根过氧化物酶分光光度法测得的酶活力之间有良好的线性关系,通过测量显色圈的直径即可估算出样品的酶活力.     

黄嘌呤氧化酶法优化大鼠血清SOD 测定条件的探讨

目的:优化黄嘌呤氧化酶法测定大鼠血清SOD实验条件.方法采用黄嘌呤氧化酶法,探讨其加样量、方法重复性、显色稳定性、试剂稳定性及样品稳定性等最佳因素.结果黄嘌呤氧化酶法测定大鼠血清SOD最佳加样量为5μl,其测定变异系数CV＜1%,显色前后20 min吸光度比较(P＞0.05);新配试剂与配制3个月试剂做测定,吸光度比较...     

凡纳滨对虾多酚氧化酶的纯化及性质分析

通过硫酸铵盐析、DEAE-Cellulose离子交换、Phenyl-Sepharose疏水层析、Hi-Trap Capto-Q强阴离子交换层析等方法,从凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)虾头中分离纯化出一种多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO),十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electropheresis,SDS-PAGE)显示其分子质量约为210 ku。肽质量指纹图谱的比对结果表明,纯化得到的PPO中含有187个氨基酸残基的14个片段与NCBI数据库中酚氧化酶原(gi|147724160)序列相似性为100%。该酶的最适温度和最适pH值分别为40℃和6.0,且在温度0～50℃及pH=5.0～8.0可保持相对稳定的活性。圆二色谱分析结果表明,对虾PPO的二级结构主要为反平行结构及无规则卷曲。抗坏血酸、茶多酚和特丁基对苯二酚(tertiary butylhydroquinone,TBHQ)等具有生物活性羟基的抑制剂对其均有较好的抑制效果。     

黄嘌呤氧化酶的研究进展及其发展前景

本文综述了黄嘌呤氧化酶(XOD)的研究进展及其发展前景。首先总结了XOD的基因、蛋白结构、催化机制和生物合成机制,其次介绍了与XOD催化相关的嘌呤代谢途径及其生理病理作用和相关的疾病,再次综述了目前已有商品化XOD及其生产现状和存在的问题,然后概述了XOD的应用进展和发展前景,最后探讨了XOD基础和应用研究存在的问题并提出发展建议。     

降纤酶的分离纯化及其性质

蛇毒蛋白对抑制血栓形成和溶解血栓具有较好的疗效 ,但由于得不到性质稳定、组分单一的酶蛋白 ,影响了其临床效果。该研究通过亲和层析方法 ,从长白山白眉蝮蛇乌苏里种蛇毒中分离提纯到 SDS- PAGE图谱为单一组分糖蛋白——降纤酶 ,相对分子质量约 3.6× 10 4。该酶具有体外凝血、体内抗凝作用。等电点约为 4 .2 5。HPL C分析结果表明其纯度为 99%。最适温度为 70℃ ,最适 p H =8.0。动力学研究表明该酶为一 Michaelis- Menten酶 ,Michaelis常数为0 .32 0 mm ol/ L,最大反应速度为 0 .117μm ol/ m in。EDTA,Mg2 + ,Cu2 + 对其有抑制作用。测定该酶 N端 2 0个氨基酸的序列是 Val Ile Glu Glu Asp Glu Cys Asn Ile Asn Glu His Arg Phe L eu,与其他的蛇毒类凝血酶有高度同源性。     

葡聚糖凝胶层析法分离纯化纤维素酶的研究

用绿色木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｖｉｒｉｄｅ）高产变异菌株４１３１产生的纤维素酶粗酶分别过ｓｅｐｈａｄｅｘＧ２５、ｓｅｐｈａｄｅｘＧ５０、ｓｅｐｈａｄｅｘＧ７５、ｓｅｐｈａｄｅｘＧ１００和ｓｅｐｈａｄｅｘＧ１５０柱层析．结果表明：ｓｅｐｈａｄｅｘＧ７５对纤维素酶的分离效果最佳,并获得了一个ＣＭＣ酶组份,其比活力提高到原来的４９倍,回收率为４１６％．     

磷酸盐缓冲液法提取茶叶多酚氧化酶的工艺研究

采用磷酸盐缓冲液提取法,研究了从茶鲜叶中提取多酚氧化酶的最佳工艺条件.结果表明,茶鲜叶多酚氧化酶提取的最佳工艺条件为pH 6.4,料液比(茶叶g∶缓冲液mL)为1∶1,离心转速为9000 r/min,离心时间35 min.     

高压密闭非完全消化-FAAS测定奶粉中高含量钙

样品经HNO 3-H 2 O 2高压密闭非完全消化,加入聚乙二醇辛基醚（OP-10）乳化剂处理试液,以La 2 O 3为释放剂,用FAAS测定奶粉中高含量钙;同时对消化时间、消化剂以及OP-10用量等进行了优化选择.实验结果表明,此方法回收率达到101%～104%,精密度为0.29%.     

菠萝焦磷酸:果糖-6-磷酸1-磷酸转移酶的分离纯化及性质研究

应用硫酸铵分级分离、DEAE-纤维素、Sephadex G-200、磷酸纤维素柱层析分离纯化了菠萝叶片焦磷酸:果糖-6-磷酸1-磷酸转移酶(PFP).凝胶过滤和非变性聚丙烯酰胺梯度电泳测定酶的分子量为132kD和140kD,SDS-聚丙烯酰胺电泳分析得到一条分子量为66kD的蛋白主带,表明该酶可能是由同种亚基组成的二聚体.此外,还对该酶的部分酶学性质进行了初步研究.     

羊乳制品中牛乳源成分的鉴别检测技术

羊乳含有丰富的蛋白质、脂肪和矿物质,与其他乳相比营养组成最接近母乳。羊乳中的脂肪球小,乳糖含量低,并含有丰富的腺苷三磷酸促进乳糖的分解,更适于具有乳糖不耐受症的亚洲成年人和婴幼儿饮用。国内外对羊乳及羊乳粉的需求不断增长。然而由于羊乳产量过低,价格高,不法商家在羊乳及羊乳制品中容易掺入一些价格低廉、方便易得的牛乳及牛乳源成分不时有报道。为了保护消费者权益和健康,规范市场,避免进出口贸易损失,鉴定纯正的羊乳及制品,检测其中的掺假牛乳源成分十分迫切。从免疫学法、色谱法、电泳法、基因检测法等方面综述了目前羊乳及羊乳制品中牛乳源成分鉴别和检测技术。     

纤维素酶渣对杂交奶牛产奶量和奶品质的影响

采用纤维素酶渣替代黄豆对西黄杂奶牛(西门塔尔×本地黄牛)作饲喂对比试验,并对其产奶量及奶品质进行观察.结果表明,试验组比对照组牛日产奶量平均提高1.88kg,其乳蛋白和乳糖含量也有不同程度的提高.     

日粮阴阳离子间隙和日粮类型对奶牛乳热症的影响

乳热症是奶牛的一种严重代谢性疾病,是现代养牛业常见病、多发病.目前,对于该病的发病机理尚没有完全搞清楚,现在多采用发病后大量补钙来进行治疗,但是在发病时,病情已十分严重,因此临床疗效常常不佳.当前预防奶牛乳热症的方法主要是通过平衡干奶牛日粮离子,日粮阴阳离子间隙(DCAD)便应运而生,它作为定量分析碱源性日粮中的有害成分和饲喂阴离子日粮的有利作用的指标.通过平衡日粮离子,获得适宜的离子间隙,可以极大的改善奶牛的生产性能,有效防止乳热症,提高饲料摄入,增加奶产量,降低跛行、难产、乳房炎的发病率.     

火焰原子吸收光谱法快速测定豆浆及其原料中的钙

摘要：用火焰原子吸收光谱法测定豆浆及其原料中的钙.通过单因素实验,优化了样品的稀释比例和消化酸用量.研究了氧化钢溶液对豆浆中钙测定的影响.结果表明,优化的豆浆与水稀释体积比为1：3;10 mL稀释后豆浆和豆粉样品的消化酸用量分别为30 mL和35 mL;在豆浆加工中,钙的损失率为10.4%;加氧化钢后检测灵敏度达到0. 136μg/ （ mL·% ）,检出限低至0.01 μg/mL,回收率为98.1 % .