超氧化物歧化酶—邻苯三酚自氧化测活方法的改进

本文对邻苯三酚自氧化测定超氧化物歧化酶活力的方法做了部分改进,使其操作更简便省时,节省试剂;并对该实验条件下反应的动力学做了初步研究,表明该法比较适合经部分纯化的酶活测定,结果比较稳定,认为是柱层析中大批量活性跟踪的首选方法,可作为自动分析的基础。     

邻苯三酚自氧化法适于测定SOD活性吗?

用邻苯三酚自氧化法测定了Cu-ZnSOD(Superoxide dismutase，SOD）及根据天然超氧化物歧化酶活性部位结构设计、合成的一些模型化合物（the models of SOD，MSOD）活性。测试结果表明：Cu-ZnSOD和含Cu（Ⅱ）、Fe(Ⅲ)、Mn(Ⅱ、Ⅲ的SOD模型化合物随浓度升高，有的对邻苯三酚氧化表现为负抑制（即促进邻苯三酚氧化）；另一部分化合物在较低浓度表现为抑制，较高浓度表现为负抑制的交替变化；或抑制率的无规则变化。本文对出现负抑制的内在根源进行了探讨，鉴于邻苯三酚自氧化的复杂反应机理；含Cu(Ⅱ)、Fe(Ⅲ)、Mn（Ⅱ、Ⅲ）SOD模型化合物的多酚氧化酶活性和Fenton反应催化活性，及MSOD中金属离子的Lewis酸性，不宜采用邻苯三酚自氧化法测定SOD活性。     

NBT光还原法、邻苯三酚自氧化法测定SOD酶活性的比较(简报)

超氧化物歧化酶(ＳＯＤ)是催化Ｏ-2歧化反应的酶类,它催化的反应是Ｏ-2 Ｏ-2 2Ｈ Ｈ2Ｏ Ｏ2。由于Ｏ-2是一种极不稳定的氧自由基,因此,检验ＳＯＤ活性一直采用间接的方法。笔者针对目前较普遍采用的邻苯三酚自氧化法和ＮＢＴ光还原法,从灵敏度、精确度、反应特异性三个方面对两方法进行比较,以确定提纯过程中非纯品ＳＯＤ及纯品ＳＯＤ两种材料酶活测定的适用方法。1　材料与方法11　材料纯品牛红细胞ＳＯＤ、玉米ＳＯＤ粗提液(自制)、超滤液(超滤膜ＭＷ=4000)、透析液(体积分数为04～09的硫铵分步沉淀后)。本实验所用药品牛红细胞ＳＯＤ为电…     

邻苯三酚自氧化法测定超氧化物歧化酶活性的研究

目前超氧化物歧化酶(SOD)活性测定结果混乱,为提高测定结果的可比性,对邻苯三酚自氧化法测定SOD活性的方法进行了研究,就该活力测定体系中缓冲溶液的介质组成、浓度、pH及所含的EDTA量等因素对测定结果的影响进行了探讨,根据实验结果,提出了新的改良方法.     

四种邻苯三酚自氧化法测定超氧化物歧化酶活性方法的比较

邻苯三酚自氧化法(420nm法)与邻苯三酚/DTT终止法测定SOD酶活力,结果基本一致,其转换系数(CC)为1.03;改进的邻苯三酚自氧化法(325nm法)、微量邻苯三酚/Vc终止法测定SOD酶活力与420nm法差别较大,其转换系数分别为2.51、5.51.在测定SOD酶活力时,可根据不同的测定方法采用转换系数进行校正;实验表明:终止剂维生素C(Vc)和二硫苏糖醇(DTT)对SOD酶活力的测定无影响;325nm法与Vc法灵敏度较高,可用于SOD活力较低的样品.     

中华猕猴桃营养生物学效应研究——Ⅲ.浓缩果汁对家兔血液红细胞的邻苯三酚自氧化抑制效应

采用邻苯三酚自氧化抑制法,对口服中华猕猴桃浓缩果汁家兔血液红细胞的邻苯三酚自氧化抑制效应的试验表明,按50kg体重人体,每日食用0.5kg果汁剂量,持续5周服用中华猕猴桃浓缩果汁的家免,其血液红细胞邻苯三酚自氧化反应抑制率明显升高。与服用前正常值73.7％对比,1—5周依次为129.1％,153.1％,133.4％,154.9％和150.8％。停服果汁2周和4周的测定值为111.8％和114.8％。结果提示,口服中华猕猴桃浓缩果汁有明显增强家兔血液红细胞的邻苯三酚自氧化抑制效应,抑制率比正常值提高1倍。猕猴桃果汁与同等剂量试剂抗坏血酸平行抑制试验结果,猕猴桃果汁的自氧化抑制率较试剂抗坏血酸高2个剂量级。     

超氧化物歧化酶活性肾上腺素自氧化紫外测定法

本文证实肾上腺素自氧化过程的325nm 吸收峰远比480nm 吸收峰高和稳定,并用 SOD 标准品和人红细胞样品建立了 SOD 活性肾上腺素自氧化紫外分光测定法(A_(325))。本方法简便、快速,比用480nm 的方法更为灵敏,并有良好的定量性和重复性。     

保健食品中SOD活性测定改良Marklund法及检测条件的研究

目的：建立保健食品SOD活性检测的标准。方法：利用改良Marklund方法测定保健食品（花粉、茶等）中SOD活性。结果：研究pH、温度、邻苯三酚和操作程序等对SOD活性的影响，选择检测条件，其回收率、变异系数（花粉和茶）分别为104％、97％和2．7％、5％。结论：方法简便、稳定、准确，仪器试剂价廉，易于推广。     

微量超氧化物歧化酶邻苯三酚/Vc测活法

在Vc终止剂法的基础上 ,邻苯三酚的加入量由终浓度2mmol/L降低为0.05mmol/L ,并提高反应溶液的 pH值至8.6 ,从而提高了SOD活力测定的灵敏度。使用本方法在SOD样品最大加入量1mL时 ,最低可检测到3.3×10-8 mol/(s·mL)SOD ,比Vc终止剂法灵敏度提高4倍。     

盐酸羟胺自氧化法测定SOD活性的电化学方法研究

盐酸羟胺在碱性水溶液中发生自氧化反应,可产生O2-.,其自身被氧化为亚硝酸根离子,在酸性介质中SCN-催化亚硝酸根离子与二苯胺-4-磺酸反应生成具有电活性的亚硝基化合物在-0.60V处有一波形很好的二阶导数极谱峰。在一定条件下,极谱峰电流的大小与亚硝酸根离子的浓度呈线性关系。体系中加入SOD,使生成的亚硝酸根离子的量减小。由此建立了通过检测亚硝酸根离子的生成量来测定超氧化歧化酶活性的电化学方法,测定了酶活力曲线,并研究了常见的黄酮类化合物对O2-.的清除作用。     

超氧化物歧化酶及其模型配合物

介绍了超氧阴离子自由基、超氧化物歧化酶的结构和性质,概述了一系列配合物型的超物歧化酶模拟对超氧自由基的清除作用。     

超氧物岐化酶提纯研究

采用氯仿—乙醇提取液盐析、丙酮沉淀及ＤＥ（３２）纤维素柱层析方法，从牛红细胞中分离得到纯品铜锌超氧物歧化酶（Ｃｕ、Ｚｎ—ＳＯＤ）．纯化的酶经聚丙烯酰胺凝胶电泳为一条蛋白带，活性染色在蛋白带的位置上呈现表示酶活性的亮斑，比活力为每毫克２４８７３单位，原子吸收测Ｃｕ、Ｚｎ含量及紫外吸收光谱测定结果制备样与标准ＳＯＤ样相同．     

炸干茸与冻干茸中超氧化物歧化酶活力测定

采用改进的邻苯三酚法测得的炸干茸和冻干茸中超氧化物歧化酶的活力,分别为2400μmol/(min·g)和4880μmol/(min·g),探讨了用超氧化物歧化酶活力作为判定鹿茸的质量指标,以及鹿茸加工工艺是否合理的参考依据之一的可能性。     

大蒜超氧化物歧化酶活性测定及某些性质研究

采用肾上腺素自氧化法对蒜头ＳＯＤ进行活力测定及某些性质研究。结果表明：蒜头粗提取液富含ＳＯＤ，其比活力为４．６０２×１０４ｕ／ｇ蛋白质；它在３０～６５℃及ｐＨ５～ｐＨ９时活力较强；用ＰＡＧＥ分离出两条酶带；能被高浓度的ＫＣＮ、Ｈ２Ｏ２完全抑制，但对氯仿－乙醇液不敏感，说明此酶为Ｃｕ、Ｚｎ－ＳＯＤ。     

植物SOD和类SOD活性物质研究进展

本文就近年来迅速发展的植物超氧化物歧化酶的纯化工艺、性质及结构研究进行概述。并介绍类SOD活性物质及其在抗衰老中的应用。     

超氧化物歧化酶新制备方法的研究

研究了制备超氧化物歧化酶的一种新方法．通过加热、盐析和中空纤维超滤,得到高纯度的产品．1000mL猪血,可得到94mgSOD,比活为6312μ／mg,产率为70．8%．