一株嗜蜡嗜胶质基因工程菌ZH20的构建与评价

利用DNA转化法将嗜胶质菌的功能基因转入嗜蜡菌中,成功构建一株嗜蜡、嗜胶质基因工程菌ZH20,分析此菌株的生物特性及高温下对原油的作用。结果表明:ZH20的生长特性与受体菌基本相同,最高耐受温度为75℃,对pH值的适应范围较广(4～10),对盐(NaCl)的最大耐受量为12.5%;基因工程菌ZH20不仅保留受体菌的嗜蜡性能,同时还获得供体菌的嗜胶质性能,能够有效降低原油凝固点和黏度。     

2株嗜碱性放线菌的分离鉴定及特性研究

从新疆巴洲和硕县碱性土壤中分离纯化出2株放线菌菌株XJ-1和XJ-4,对其形态特征、生理生化特性、抗生素产生以及16S rRNA基因序列分析等方面进行了多种特性研究.结果表明.2株放线菌在pH7.0的中性条件下不能生长,在pH12.0的强碱性条件下能够生长,最适生长pH为10.0,属于嗜碱性放线菌.2株放线菌菌株能耐受10%的NaCl,最高耐受温度为45℃.菌株XJ-1产生抗生素,能抑制柑橘绿霉菌、水稻轮纹菌、棉花枯萎菌和小麦赤霉菌的生长.16S rRNA基因同源性分析表明XJ-1属于拟诺卡氏菌属的Nocardiopsis dassonvillei,序列相似性达到了99.9%.而XJ-4与Nocardiopsis. sp. AF-333的序列相似性达到了99.3%,有可能是一新种.     

新疆鄯善产淀粉酶沙漠放线菌的生长特性研究

通过对从新疆鄯善特殊沙漠环境采集的沙样中分离纯化获得89株沙漠放线菌菌株进行分析研究,筛选出淀粉酶活力高的四株放线菌,继而进行了NaCl耐盐实验,pH耐受实验,温度耐受实验研究。生长特性研究结果表明,沙漠放线菌对NaCl浓度具有广泛的适应性,属于中等嗜盐菌,最适生长酸碱度和温度数值范围分别为7~9℃和28~48℃。XSS040804菌株的最高耐受温度为55℃。     

连云港台南盐田中嗜盐菌数量分布的调查

在连云港台南盐田中取卤水和底泥样品,以盐(NaCl)为限制性生长因子,采用含4％、12％和25％的NaCl平 板对嗜盐菌的分布状况进行调查,表明盐田中嗜盐菌数量在夏季最多,每毫升卤水中最高为1.4×104个,而在同一季节 每克底泥中嗜盐菌数量高于卤水中约1～2个数量级.     

两株苯酚降解菌的降解特性及对比分析

采用驯化的方法从活性污泥中筛选分离得到两株高效苯酚降解菌XTT-1,XTT-3,均能在含苯酚的培养基中生长,初步鉴定均为假单胞菌属(Pseudomonassp.).研究了两株菌降解苯酚的最适条件;XTT-3菌经48 h培养可完全降解500 mg.L-1苯酚,而XTT-1菌需要64 h;两株菌的苯酚耐受能力均不超过1000 mg.L-1苯酚;NaCl含量2.0%以上对两株菌的苯酚降解率有不同程度的抑制作用.     

1株嗜碱克氏菌属菌株的分离及系统发育分析

从埃及盐碱土样分离得到1株革兰氏阳性的兼性嗜碱菌株YIMT0003，不产荚膜和芽孢，不具游动性．生长温度范围为室温(约20℃)到37℃，最适生长温度为28℃，生长的pH值范围为pH5～12。对NaCl的耐受范围为1％～5％，DNA的G C mol％为69．44％．16S rRNA全序列分析的结果表明，该菌株与Kocuria polaris CMS76^T亲缘关系最近，但两者在形态、生理生化特征上有差异。有可能是克氏菌属的一个潜在新种。     

一株中度嗜盐菌Halomonas sp.NY-011的分离与鉴定

从盐生杜氏藻（Dunaliella salina）培养物内筛选到一株能在广泛NaCl浓度范围（0.5 %～21 %, w/v）和广泛pH值范围（pH 5～11）生长的嗜碱耐盐菌NY011.细胞形态电镜观察和生理生化分析表明, NY-011呈杆状,大小为（0.51～1.53）μm×（1.02～2.55）μm,革兰氏阴性,有荚膜,无鞭毛,不运动,好氧生长,淀粉水解酶呈阴性,接触酶呈阳性.其最适培养条件为：2% NaCl,30 ℃,起始pH值10.16S rDNA序列比对和构建的系统发育树表明该菌属于盐单胞菌     

甘肃黄芪根瘤菌耐盐性及化学试剂和染料的抗性研究

选用67株分离自甘肃兰州地区的黄芪根瘤菌菌株,测定了供试菌对甲基蓝、甲基红、亚甲基蓝、刚果红、孔雀石绿5种染料和脱氧胆酸钠、亚硝酸钠2种化学试剂的抗性反应,及耐盐性测定.测定结果表明:黄芪根瘤菌具有较强的耐盐性,36％的菌株可以耐受5％NaCl,21％的菌株可以耐受6％NaCl;黄芪根瘤菌对两种化学药物脱氧胆酸钠和亚硝酸钠均具有极高的抗性,几乎所有菌株都能在终浓度为0.1％和0.2％的YMA培养基上生长;不同的黄芪根瘤菌菌株对不同染料具有不同的抗性,对不同浓度的同种染料也具有不同的抗性,同种黄芪根瘤菌菌株对不同染料具有不同的抗性,对不同浓度的同种染料也具有不同的抗性.     

具抗肿瘤活性中度嗜盐菌YIM 80186的分离和系统发育分析

 从青海盐碱土壤样品中分离到1株中度嗜盐放线菌YIM 80186,该菌株的代谢产物具有很强的抗肿瘤和抗菌活性.菌株YIM 80186在添加20~100 g/L NaCl的培养基上生长良好,而在未添加NaCl的多数培养基上生长微弱.最高能耐受200 g/L NaCl.气生菌丝和基内菌丝丰富,白色至黄白色.气生菌丝产生直的或弯曲的孢子链,基内菌丝发育良好,断裂.生长pH范围6.0~10.0,最适pH 7.5~8.0.通过对其进行的包括形态、生理生化特性、细胞化学以及基于16S RNA基因序列的系统发育分析等方面的多相分类研究,该菌株具有拟诺卡氏属的典型特征,初步鉴定其为拟诺卡氏菌属的1个潜在新种.     

一株中度嗜盐菌Halomonas sp．NY-011的分离与鉴定

从盐生杜氏藻(Dunaliella salina)培养物内筛选到一株能在广泛NaCl浓度范围(0.5 %～21 %, w/v)和广泛pH值范围(pH 5～11)生长的嗜碱耐盐菌NY-011.细胞形态电镜观察和生理生化分析表明, NY-011呈杆状,大小为(0.51～1.53)μm×(1.02～2.55)μm,革兰氏阴性,有荚膜,无鞭毛,不运动,好氧生长,淀粉水解酶呈阴性,接触酶呈阳性.其最适培养条件为:2% NaCl,30 ℃,起始pH值10.16S rDNA序列比对和构建的系统发育树表明该菌属于盐单胞菌属(Halomonas).Biolog分析显示,在检测的95种碳源中,该菌仅有10种的代谢指纹能与数据库类型相匹配,且代谢情况和其亲缘关系最近的Halomonas pantelleriensis亦有差异.     

野大麦耐盐变异体的筛选和植株再生

以野大麦的成熟胚为外植体诱国组织，选取淡黄色，易碎的胚佃组织为材料，进行细胞悬浮培养。     

四合木(Tetraena mongolica Maxim)雄性不育的细胞学研究

首次报导了四合木花粉发育过程中存在雄性不育现象．四合木花具八枚雄蕊,分两轮排列．药壁发育属基本型,具腺质绒毡层．正常花药的绒毡层细胞在四分孢子形成之后开始解体．四合木花药败育从小孢子母细胞减数分裂Ｉ前期开始,在以后的各个时期均有发生．败育发生在个别雄蕊或全部雄蕊中不等．败育花药的药壁中层、绒毡层在小孢子母细胞减数分裂之前即开始解体,减数分裂过程中基本全部瓦解,使小孢子母细胞正常的减数分裂不能进行,引起以后一系列败育现象,形成不正常的四分孢子或单核花粉粒．败育花药药室瓦解,花粉囊收缩变形．即使在正常发育的成熟花药内,仍能观察到败育的花粉粒,形状为椭圆形或三角形．     

耐盐细菌质粒的研究

本实验以1株耐盐细菌My23（耐18％NaCl）作为研究对象,采用碱裂解法对其进行质粒提取,结果表明可以提取得大小2个不同质粒;改变常规提取方法中的部分环节,如加入STE清洗菌体的培养基成分,溶菌酶的使用,以及加入碱裂解液Ⅰ后静置20min,对该耐盐菌质粒的提取有较好的作用。经SDS法将小质粒消除后的菌株与野生型菌株的耐盐功能比较,发现提取出的小质粒与耐盐无关。将大肠杆菌DH5α制备成感受态细胞,将耐盐菌的质粒进行转化,结果进一步表明耐盐性状与质粒没有关系。     

渗透压对细菌的影响

在等渗溶液中,微生物正常生长繁殖;在高渗溶液中,细胞失水收缩,而水分为微生物生理生化反应所必需,失水会抑制其生长繁殖.根据不同盐质量分数下细菌的繁殖情况,可以判断渗透压对细菌的影响.用含不同质量分数NaCl的牛肉膏蛋白胨培养基培养细菌来观察渗透压对细菌的影响,选用的菌种为金黄色葡萄球菌,大肠杆菌,枯草芽孢杆菌.大肠杆菌耐高渗透压的能力较差,在质量分数为3%以下的NaCl溶液中能正常生长,在5%的NaCl溶液中受到抑制;枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌有较强的耐盐能力,枯草芽孢杆菌在5%的NaCl溶液中能正常生长,在10%的NaCl溶液中受到抑制,而金黄色葡萄球菌在10%的NaCl溶液中仍能正常生长,在高于10%的NaCl溶液中生长受到抑制.     

氯盐、硫酸盐溶液长期腐蚀下混凝土组成的生态控制

为解决材料与腐蚀溶液的相适应性,用3.5%NaCl溶液、3.5%NaCl与5.0%Na2SO4两种不同的腐蚀溶液对掺有不同工业废渣的生态混凝土进行长期浸泡,测试矿物掺合料含量的变化对混凝土依时扩散系数的影响.以混凝土的服役寿命为目标,确定混凝土中矿物掺合料的最佳掺量.结果表明,材料的种类和掺量以及腐蚀溶液的变化对混凝土服役寿命具有非常显著的影响,矿物掺合料掺量可以用3次多项式进行材料参数的表征;在腐蚀溶液相同,且当掺量均为30%时,粉煤灰混凝土的抗氯离子能力好于矿粉混凝土的抗氯离子能力;在3.5%NaCl溶液中,选用30%粉煤灰混凝土抗氯离子侵蚀能力较好;在3.5%NaCl和5.0%Na2SO4复合溶液中,选用30%粉煤灰和20%矿粉复掺的混凝土更能使混凝土结构耐久.     

NaCl胁迫对河南道地红花幼苗生理特性影响

采用盆栽培养法,以7个河南道地红花品种为材料,研究了NaCl(0、50、100、150、200mmol/L)胁迫对叶绿素(Chl)、丙二醛(MDA)、可溶性糖(SS)、可溶性蛋白及抗氧化酶(SOD,POD和CAT)7项生理指标的影响,并用隶属函数法对7个红花品种的耐盐性进行了综合评定.结果表明,在一定范围内随着NaCl浓度的增加,延津红花和刺红花幼苗Chl含量先升高后下降,其它品种均呈下降趋势;盐胁迫下MDA和SS含量较对照均有显著增加,而可溶性蛋白含量先升高后下降;除封丘红花SOD活性及南阳红花POD活性随盐浓度升高逐渐下降之外,其它品种3种抗氧化酶活性均呈先上升后下降的趋势.依据7项指标,应用隶属函数法,得出耐盐性的大小顺序为:封丘红花白沙二号南阳红花延津大红袍延津红花刺红花、虞城红花.     

小麦耐盐愈伤组织内源脯氨酸含量和细胞学特征

以小麦幼穗和幼胚为外植体，诱导出愈伤组织，通过在培养基中逐渐增加选择剂（ＮａＣｌ：Ｎａ２ＳＯ４＝４：１）方法，获得耐０．８％至２．０％选择剂的耐盐愈伤组织，其内源脯氨酸含量显著高于相同盐渍条件下的对照组．培养基中选择剂浓度达到１．６％耐盐细胞仍能保持细胞及细胞器正常形态，液泡化程度低，细胞核大，有的细胞中出现二或二个以上核仁．在培养基中选择剂超过１．２％，绝大多数细胞处于坏死或类坏死状态．耐盐愈伤组织在培养基中选择剂不超过２．０％，生长良好，可以再生植株，其后代在０．３％ＮａＣｌ土壤中仍表现耐盐性．     

镉对圆锥南芥锌的吸收、亚细胞分布和化学形态影响

通过营养液培养并采用差速离心技术和化学试剂逐步提取法,分析了Cd对圆锥南芥Arabis paniculata Franch.叶片和根系中Zn的吸收、亚细胞分布和化学形态的影响。结果表明,Cd的添加不会抑制圆锥南芥的生长及对Zn的吸收。Zn在圆锥南芥中以多种化学形态存在;叶片中乙醇、水、NaCl、HAc提取态Zn分配比例较均匀;根系中主要以乙醇提取态和NaCl提取态为主,HAc与HCl提取态Zn的绝对含量与所占的百分比均较低,表明圆锥南芥中的Zn主要以无机酸盐以及氨基酸盐存在。对圆锥南芥Zn的亚细胞分布结果表明,叶片和根系中的Zn主要贮存于细胞壁中其次为细胞核,两者所占的比例分别为65%～83.5%和42.7%～87.3%,且Cd的添加提高了细胞壁中Zn的比例,促进了Zn向细胞壁中的转移。但Cd的添加对Zn的化学形态变化不明显。     

相思根瘤菌的抗逆性初步研究

对21株相思根瘤菌和2株大豆根瘤菌菌株进行NaCl、(NH4)2SO4、pH值、高温和低温的耐受性实验，其中耐(NH4)2SO4的实验分别进行了相思根瘤菌在含(NH4)2SO4的平板上的耐受性和在浓度为100mol／L、300mol／L、500mol／L、600mol／L的(NH4)2SO4中的结瘤试验。参试菌株均经过回接实验培养和镜检，培养基均为YMA。结果表明，相思根瘤菌均能耐受的盐浓度为0．5％～2．0％，能在37℃和pH值为6～9的条件下生长。在抗生素抗性方面，相思根瘤菌普遍抗氨卞青霉素，而对卡那霉素和链霉素敏感。相思根瘤菌的耐盐、耐高温和耐氨能力强于慢生大豆根瘤菌。