力竭运动前后及恢复期大鼠脑皮质运动区GABA含量及GAD、GABA-T活性的变化

目的：观察力竭运动前后及恢复期大鼠脑皮质运动区GABA含量及GAD、GABA-T活性的动态变化.方法：成年雄性SD大鼠进行一次性力竭游泳,用荧光法测定其脑皮质运动区GABA含量及GAD、GABA-T活性.结果：力竭运动前后及恢复期大鼠脑皮质运动区GA-BA含量、GAD与GABA-T活性出现明显变化.结论：运动性疲劳时GABA可能是脑的机能抑制状态的主导因素之一.力竭运动后GAD、GABA-T活性明显增高,GABA的代谢加快.中枢机能的恢复具有时间延续性.GABA代谢酶的变化可以用来评定运动过程及恢复期中枢机能状态.     

中药沙苑子抗疲劳作用研究

探讨中药沙苑子对大鼠脑组织EAA,IAA含量的影响及其抗疲劳作用,为沙苑子在运动生物学方面的应用提供实验依据。建立运动疲劳动物模型,测试大鼠脑组织海马、间脑脂肪族EAA,IAA含量,Glu/GABA比值变化和大鼠运动至运动疲劳的时间。与安静对照组比较,运动对照组海马和间脑EAA含量均下降(P<0.05),IAA含量均升高(P<0.01/P<0.05);运动加沙苑子组海马EAA含量下降(P<0.05),IAA含量升高(P<0.05);间脑EAA中Glu含量下降(P>0.05),Asp含量下降(P<0.05),IAA中,GABA含量升高(P<0.01/P<0.05)。与运动对照组比较,运动加沙苑子组海马和间脑EAA含量均升高(P>0.05),IAA含量均下降(P<0.05)。与安静对照组比较,运动对照组、运动加沙苑子组两个脑区的Glu/GABA比值下降(P<0.01/P<0.05);与运动对照组比较,运动加沙苑子组两个脑区Glu/GABA比值升高(P<0.01)。运动加沙苑子组运动至疲劳的时间比运动对照组延长(P<0.05)。沙苑子可以影响海马、间脑脂肪族EAA,IAA含量及Glu/GABA比值,延缓中枢神经疲劳的发生,提高大鼠抗疲劳水平。     

力竭运动对大鼠脑纹状体5-HT含量及其代谢的影响

目的:观察力竭运动对大鼠脑纹状体5-羟色胺(5-HT)含量及其代谢的影响,分析纹状体中5-HT合成代谢和分解代谢中各指标的关系,进一步探讨力竭运动后脑5-HT含量及其代谢的动态变化对运动性中枢疲劳发生、发展的影响并分析其机理。方法:大鼠分为两组。力竭运动组大鼠进行一次性游泳运动直至力竭。断头处死,取纹状体测色氨酸(Trp)、5-HT和5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量,测色氨酸羟化酶(TPH)和单胺氧化酶(MAO)活性,取血清测游离色氨酸(f-Trp)含量。结果:与安静组5-HT含量及其代谢各指标相比,力竭运动组大鼠血清f-Trp含量有下降趋势,其余各指标均呈升高趋势,其中纹状体Trp(P<0.01)和5-HIAA(P<0.001)含量显著升高。结论:(1)力竭运动引起血清Trp透过血脑屏障进入脑中增多,导致血清f-Trp含量下降且纹状体Trp含量增多,激活TPH的活性,增强脑5-HT的合成。(2)运动中5-HT的分解也是增加的,说明力竭运动使5-HT代谢加快,易产生中枢疲劳。提示力竭运动组大鼠在力竭运动后,中枢神经系统抑制过程占优势。     

游泳训练及环境应激对大鼠中脑酪氨酸羟化酶与纹状体多巴胺含量的影响

50只SD雄性成年大鼠分别接受不同时间的水应激、一次性力竭游泳运动和长期游泳耐力训练,用免疫印迹法检测中脑TH含量,以荧光发光分析法检测纹状体DA含量。结果显示：长期游泳训练与安静状态的大鼠和一次性力竭游泳大鼠相比中脑TH含量有升高的趋势,但以上变化并没有显著性差异;而一次性力竭游泳运动使得大鼠纹状体DA含量高与安静组,长期游泳耐力训练引起了大鼠纹状体DA含量显著性升高;处于一次性水环境与长期水环境的大鼠中脑TH与纹状体DA含量无显著性差异;长期耐力游泳训练大鼠中脑TH和纹状体DA含量显著性高于处于水环境的大鼠。提示：一次性力竭游泳运动抑制了中脑TH活性,而长期游泳耐力训练有助于提高大鼠中脑TH含量,增加纹状体DA的释放量,提高中枢兴奋性,从而能够改善中枢机能,延迟中枢疲劳的发生时间;水环境会抑制大鼠中脑TH含量,从而使机体处于中枢抑制状态,建议在建立大鼠游泳训练模型中,应增列水环境对照组,从而增强实验的可比性与真实性。     

益智五海胶囊对痴呆大鼠大脑皮层单胺类递质和海马氨基酸的影响

目的:观察益智五海胶囊对老年肾精亏虚痴呆大鼠模型大脑皮层DA、NE、5-HT;海马Glu、Gly、Asp、GABA的影响.方法:采用老年肾精亏虚法筛选痴呆大鼠模型,采用荧光分光光度法测定DA、NE、5-HT其皮层DA、NE、5-HT的含量;采用毛细管电泳法测定其海马Glu、Gly、Asp、GABA含量.结果:大脑皮层的NE、5-HT具有不同程度的升高,海马的Glu、Asp具有不同程度的降低,组间差异具有显著意义.结论:益智五海胶囊改善智能是多途径的,通过调节NE、5-HT的含量,调节Glu、Gly、Asp、GABA的含量,改善痴呆的智力障碍.     

力竭性运动对大鼠骨骼肌Ca2+含量的影响

观察大鼠力竭性运动后即刻组及三小时后组(以下简称3h组)骨骼肌内Ca2+的变化情况,探讨骨骼肌Ca2+在力竭性运动后和恢复中的变化及其机制.力竭性运动后取大鼠骨骼肌,采用原子吸收分光光度计测其Ca2+浓度.运动后即刻组骨骼肌中Ca2+浓度(2068.33±752.02μg/g)比对照组(615.31±546.03μg/g)有极显著增高(P＜0.001),3 h组(734.58±258.70μg/g)与对照组无明显差异,即刻组和3 h组有极显著性差异(P＜0.001)力竭性运动即刻,骨骼肌中Ca2+浓度显著增高,恢复期内Ca2+浓度逐渐恢复.     

长期耐力训练大鼠肾组织不同功能状态下一氧化氮与一氧化氮合酶体系变化

目的研究长期耐力训练对雄性大鼠肾组织一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)的影响.方法64只雄性Wistar大鼠随机分为2组:对照组和耐力组.每组32只.耐力组进行8周跑台训练,对照组一直笼中饲养不训练.耐力组8周训练结束后,对照组和耐力组2组大鼠分别在直径70 cm的圆形塑料桶中进行2天适应性游泳,水深55 cm,水温32℃,每天15 min.第3天,两组大鼠分别于安静、游泳40 min、游泳力竭即刻、力竭后恢复24 h,4种状态麻醉处死取材,每种状态8只大鼠.安静状态大鼠不进行游泳直接取材,其余状态大鼠尾部负重3%体重的铅条,在圆形塑料桶中进行游泳.游泳40 min状态大鼠统一在游泳至40 min后取材.游泳力竭即刻状态大鼠统一在游泳至力竭即刻取材.力竭后恢复24 h状态大鼠从被确定为力竭后计时,经过24 h后取材.测定NO含量和NOS活性.结果耐力组与对照组相比,力竭即刻状态,耐力组NO含量极显著升高(P0.01);在24 h恢复后,耐力组NO含量极显著升高(P0.01).游泳40 min状态,耐力组NOS活性极显著降低(P0.01);力竭即刻状态,耐力组NOS活性显著降低(P0.05);在24 h恢复后,耐力组NOS活性极显著升高(P0.01).结论长期耐力训练增加了力竭即刻肾组织的NO含量,减轻缺血症状,增加了24h恢复期NO含量;长期耐力训练减小了运动过程中和力竭即刻肾组织NOS活性的升高幅度;增加了24 h恢复期NOS活性,对肾组织再灌注期的恢复有积极意义.     

游泳运动对大鼠纹状体、下丘脑多巴胺的含量及其代谢的影响

目的：探讨游泳运动对大鼠纹状体、下丘脑（DA）内多巴胺的含量及其代谢的影响.方法：选取72只雄性SD大鼠,随机分成6组：安静对照组（A）、一次性力竭游泳运动组（B）、安静＋水环境组（C）、游泳耐力训练组（D）、水环境组（E）、游泳耐力训练后一次性力竭游泳运动组（F）.D组按照耐力训练方案进行负重训练,每周5次,持续7周.所有大鼠一起断头处死,各组交叉进行,迅速取出脑组织（纹状体、下丘脑）进行多巴胺浓度和单胺氧化酶B（MAO-B）活性的测试.结果：一次性力竭运动或游泳训练对下丘脑中DA含量或MAO-B活性的影响无明显影响,而纹状体DA浓度在一次性力竭运动尤其是游泳训练后都明显升高（P〈0.05）,MAO-B也有升高的趋势.结论：一次性力竭运动尤其是游泳耐力训练使DA的浓度和MAO-B活性增加,其合成和分解代谢都增加,提高了DA的转换率,以适应运动的需要,有利于改善脑机能,延缓运动疲劳,是适应运动的表现.     

一次力竭性离心运动对大鼠血清肌酸激酶(CK)活性的影响

通过建立大鼠下坡跑运动损伤模型,研究一次力竭性离心运动后不同时刻大鼠血清CK从亚细胞水平探讨一次力竭性离心运动后,骨骼肌超微结构损伤发生的机制,为运动训练和大众健身提供理论依据.将雄性SD大鼠48只随机分为6组(每组8只):安静对照组(C),运动后24h组(E2),运动后即刻组(E0),运动后48h组(E3),运动后12 h组(E1),运动后72 h组(E4),以速度16 m/min,坡度-16°进行跑台运动,运动100 min后,休息5 min,然后再运动100 min.在不同时刻观察大鼠血清CK活性的变化,结果表明:运动后即刻血清CK活性(2 035.42±426.49 U/L)与对照组血清CK活性(293.66±76.07 U/L)相比,非常显著的增高(P0.01),达到了峰值,而后逐渐恢复,运动后72 h组血清CK活性(425.51±143.34 U/L)与即刻组血清CK活性相比已显著恢复(P0.01),与对照组相比没有统计学意义(P0.05),但没有完全恢复到安静时水平.一次力竭性离心运动后即刻大鼠血清CK活性显著增高,而后逐渐恢复,运动后72h接近正常,血清CK活性的变化能够反映运动后骨骼肌超微结构损伤的状况.     

血浆和尿液8-OHdG含量作为运动机能监控标志物的可行性分析

15名青年男子田径运动员在功率自行车上进行一次力竭运动,于运动前1d(Baseline)、运动前(Pre-Ex)、运动后即刻(Post-Ex)、运动后24h(Post-24h)、48h(Post-48h)和72h(Post-72h)分别测定肌肉酸痛强度,血浆、尿和淋巴细胞中8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量以及血浆中肌酸激酶(CK)活性和丙二醛(MDA)含量,探讨8-OHdG作为运动机能监控标志物的可行性.结果显示,肌肉酸痛强度在运动后即刻明显升高(P0.01),24h达峰值(P0.01),72h恢复至正常水平;血浆CK活性在运动后24h开始升高(P0.01)并持续至72h(P0.01);血浆MDA含量和淋巴细胞8-OHdG含量均在运动后即刻显著升高(P0.01),24h恢复至安静水平(P0.05);血浆和尿液中8-OHdG含量在各时间点均无显著性变化(P0.05).血浆和尿液中8-OHdG含量在Baseline、Pre-Ex的两次测试间均无显著性差异,日间变异系数(CV)分别为72.8%(95%CI:57.2%~99.9%)和87.8%(95%CI:66.1%~130.5%).ELISA法测定8-OHdG的批内CV为2.25%~4.67%,批间CV为5.25%~7.12%.以上结果表明,虽然力竭运动可造成氧化应激、淋巴细胞DNA损伤和运动性肌肉损伤,但由于血浆和尿液中8-OHdG含量存在显著的日间生物节律变异,因此可能不是运动机能监控(DNA氧化损伤及过度疲劳)的敏感标志物.     

嗜酸氧化亚铁硫杆菌的核糖-5-磷酸异构酶的同源建模研究

采用同源建模技术和分子动力学模拟方法,构建了嗜酸氧化亚铁硫杆菌Acidithiobacillus ferrooxidans(A.f)的核糖-5-磷酸异构酶(rpiA)基因编码的蛋白质三维分子结构模型。将结构模型进行绑定位点搜索并与底物核糖-5-磷酸(R5P)进行柔性分子对接,结果显示,R5P被招募到A.ferrooxidans的RpiA的活性位点并随后被激活;残基Asp81,Thr31,Lys121,Ser30,Glu103,Asp84,Lys94,Asp118,Lys7,Gly97,Gly29,Gly95,Thr28和H2O对底物绑定或催化起重要作用,其中,Gly97,Gly29,Gly95和Thr28是新识别的残基,它们在其他生物体的RpiA中相当保守但未被发现。     

脂肪酶基因结构和氨基酸序列的比较

采用PCGENE6 8软件系统对真菌脂肪酶基因和氨基酸序列进行了分析。真核生物中多数结构基因中含有内含子 ,但真菌脂肪酶基因几乎有一大半的是连续的 ;对于有内含子的基因 ,不同脂肪酶基因所含内含子数目各异。所有脂肪酶一级结构中都包含Gly X1 Ser X2 Gly保守序列 ,在真菌脂肪酶中该序列更保守 ;Ser、Asp/Glu和His3个氨基酸残基组成了真菌脂肪酶的活性中心 ;大多数真菌脂肪酶是糖蛋白 ,但也有一些不含糖基的脂肪酶 ,主要取决于脂肪酶一级结构中是否存在糖基化识别序列。     

印迹膜测序法分析结核分枝杆菌抗原蛋白

把WesternBlot技术分析抗原抗体反应的高度特异性与用PVDF膜作载体进行蛋白质氨基酸序列分析的高度敏感性相结合对结核分枝杆菌 (Mycobacteriumtuberculosis,TB)的特异性、保护性抗原进行筛选和分析鉴定 ,获得了分子量为 31KDa、30KDa的抗原 这两种抗原与抗结核分枝杆菌的单克隆抗体和结核病人血清均发生阳性反应 ,而与正常小鼠血清和健康人血清呈阴性反应 用印迹膜测序法测出 31KDa抗原蛋白的N 末端序列为AlaGluValAspTrpLeuValPheAlaValSerTrpProValGly ,30KDa蛋白序列为PheSerArgProGlyLeuProValGluTry 印迹膜测序为分子生物学研究提供了一种有效的新途径     

五参胶囊镇静催眠作用及其机制的实验研究

目的观察五参胶囊(Wu Shen Capsules,WSh C)对小鼠镇静催眠作用的影响,并探讨其作用机制.方法将ICR小鼠随机分为对照组、五参胶囊高剂量组、中剂量组和低剂量组.五参胶囊高剂量组用药量为200 mg/(kg·d~(-1)),中剂量组用药量为100 mg/(kg·d~(-1)),低剂量组用药量为50 mg/(kg·d~(-1)),给药时间为15 d,于给药结束后进行小鼠自主活动实验和协同戊巴比妥钠阈上剂量睡眠时间实验,测定5 min内各组小鼠的活动次数和站立次数,记录各组小鼠的睡眠潜伏期和睡眠持续时间.采用酶联免疫吸附法检测小鼠下丘脑5-羟色胺(5-Hydroxytryptamine,5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-Hydroxyindole acetic acid,5-HIAA)、γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)、谷氨酸(glutamine,Glu)含量,并计算5-HIAA/5-HT比值及Glu/GABA比值.结果与对照组比较,WSh C各给药组小鼠活动次数减少,睡眠潜伏期缩短,睡眠持续时间延长(P0.01),WSh C能升高小鼠下丘脑5-HIAA含量和5-HIAA/5-HT比值,降低Glu含量和Glu/GABA比值.结论 WSh C具有明显镇静催眠作用,其机制可能与调节中枢兴奋性和抑制性神经递质有关.     

珍珠薏米乳酸发酵饮料的研究

研究了以珍珠和薏米为主要原料制作乳酸发酵饮料的工艺。通过正交试验,确定最佳调配组合为:蔗糖10%,香精0.1%,薏米发酵液与珍珠水解液的体积比为2∶1。对饮料的可溶性固形物、酸度、还原糖、金属元素、氨基酸含量等指标进行了测定。结果表明,还原糖质量浓度为11.9 mg.mL-1;可溶性固形物为4.6%;pH值为4.97(16.5℃时);Zn、Mg、Fe、Mn、Na、Ca、K的质量浓度分别为0.1672,5.14340,.23260,.2933,241.76,136.093,4.87μg.mL-1;Cd、Pb、Cr、Cu和Co等均未测出;且含有Asp、Thr、Ser、Glu、Gly、Ala、Val、MetI、le、Leu、Tyr、Phe、Lys、His、Arg和Pro等16种氨基酸。     

补充谷氨酰胺对大鼠跑台运动后血、脑多巴胺和去甲肾上腺素的影响

本研究旨在通过补充不同剂量的谷氨酰胺(Gln)，观察大鼠力竭性运动应激时血清和脑内去甲肾上腺素(NE)和多巴胺(DA)的反应性。40只大鼠随机分为4组，分别灌服大、小剂量Gln、淀粉溶液和水，共20天。第20天，补充Gln和补淀粉的大鼠进行力竭性跑台运动，并在运动后即刻处死；补水大鼠直接处死。测定血、脑Gln、NE、DA水平。结果显示，补充Gln大剂量 运动组第10天血清Gln、DA、NE及处死时脑组织DA显性高于补淀粉 运动组：补充Gln大剂量 运动组第10天血清Gln、处死时血清NE显性高于补充Gln小剂量 运动组；补淀粉 运动组第10天血清Gln、DA和NE均显性低于安静对照组大鼠，但处死时脑组织Gln显性高于安静对照组。提示，补充淀粉和Gln均可能影响血脑NE和DA含量；补充Gln可能提高大鼠力竭性运动应激后脑组织对DA升高的耐受，并有维持NE平衡的作用，提高大鼠对运动应激的反应能力和中枢的耐受能力，且大剂量补充Gln效果较好。     

运动应激对大鼠海马去甲肾上腺素、5-羟色胺及前体氨基酸的影响

目的：旨在观察运动应激对海马去甲肾上腺素和5-羟色胺及前体氨基酸的影响。探讨海马对运动应激的反应及运动技能学习的关系。方法：雄性SD大鼠分别直接处死，力竭性跑台运动后即刻和运动后24h处死；高效液相色谱法，测试去甲肾上腺素、5-羟色胺、酪氨酸和色氨酸。结果：与安静组相比，运动后即刻海马内去甲肾上腺素和色氨酸均显著性升高，运动后24h有所下降；安静时大鼠5-羟色胺与色氨酸，及运动后24h去甲肾上腺素、5-羟色胺及其前体氨基酸间的均呈显著性强相关系；安静时去甲肾上腺素与5-羟色胺相关系数也很高，p=0．055。结论：力竭性跑台运动应激过程中，去甲肾上腺素和5-HT参与应激反应，运动应激后的24h，大鼠海马内的去甲肾上腺素、5-羟色胺、酪氨酸和色氨酸含量及相关关系的个体差异减小，可能与运动技能、记忆形成和保持有关。     

酸枣仁汤对氯苯丙氨酸诱导失眠大鼠模型治疗机制的研究

为探究经典名方酸枣仁汤对氯苯丙氨酸(PCPA)诱导失眠大鼠的作用机制,采用8周龄的雄雌性SD大鼠各20只,每10只大鼠(雌雄各半)为一组,将40只大鼠随机分成酸枣仁汤组、地西泮组、模型组和空白组,利用腹腔注射PCPA混悬液的方法构建失眠大鼠模型,通过旷场实验和高架十字迷宫实验评价造模后大鼠睡眠行为、情绪的改变。给药两周后,通过血清学检测单胺类神经递质、氨基酸类神经递质、炎性细胞的变化。高架十字迷宫实验结果显示,与空白组相比,PCPA诱导的失眠大鼠开臂停留时间百分比(t_oc)和进入开臂次数百分比(N_oc)均下降,其中t_oc显著下降,表明模型构建成功。与模型组相比,酸枣仁汤组5-羟色胺(5-HT)、γ-氨基丁酸(GABA)含量显著升高,而去甲肾上腺素(NE)含量升高不明显,多巴胺(DA)、谷氨酸(Glu)含量显著降低;酸枣仁汤组促炎性细胞因子白介素1β(IL-1β)含量显著降低,抗炎性细胞因子白介素10(IL-10)含量显著升高。与地西泮组相比,酸枣仁汤组DA含量降低更加显著,地西泮组肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量比酸枣仁组降低更加显著,而5-HT、GABA、NE、Glu、IL-1β、IL-10含量变化趋势相同,且无显著差异。研究认为酸枣仁汤通过增加抑制性神经递质,降低兴奋性神经递质,恢复促炎性和抗炎性细胞因子水平,从而缓解失眠症状,为酸枣仁汤治疗失眠的功效机制及遣药组方提供了科学依据。