共查询到20条相似文献,搜索用时 125 毫秒
1.
2.
《江西科学》2015,(4)
构建乳酸菌同源重组载体,以实现外源基因在乳酸菌中的整合型表达。PCR扩增lacZ基因表达盒lacZ-cassette,和upp基因表达盒upp-cassette,SOE-PCR扩增lacZ-P-upp,产物回收后连接到pORI28载体中,构建载体pORZP;根据干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393全基因组中lai基因序列设计引物,PCR扩增lai基因两端同源重组臂lai-up和lai-down基因序列,产物经回收后,连接至pORZP载体中,得同源重组载体pORZPlai。双酶切及DNA测序结果证实,成功构建了同源重组载体pORZP-lai,为实现外源基因在乳酸菌中的非抗性、整合型表达奠定了基础。 相似文献
3.
目的:构建含HIV gp120,gp41序列中广谱中和抗体2F5,4E10作用靶基因的载体并进行鉴定,为后期重组载体表达产物诱导产生中和抗体及抗HIV亚单位疫苗的研究奠定基础.方法:根据NCBI中HIV gp120,gp41基因序列中可与2F5、4E10结合的区域设计引物并进行PCR反应,将PCR得到的目的片段插入到载体pET28a中,对重组载体进行PCR鉴定、酶切鉴定及DNA测序.结果:PCR鉴定、酶切鉴定及DNA测序结果证实重组载体构建成功.结论:成功构建了含HIV gp120,gp41序列中广谱中和抗体2F5,4E10作用靶基因的载体. 相似文献
4.
建立一种快速的重组农杆菌PCR扩增鉴定方法,采用煮沸法处理重组农杆菌,使农杆菌高温裂解,释放质粒DNA,直接进行PCR扩增反应,检测目的基因片段.结果表明,重组质粒PCR扩增效果较好,目标条带较为明显.通过煮沸重组农杆菌,进行PCR扩增反应鉴定质粒DNA,不仅实验操作简单安全,缩短实验时间,并且避免了酚、氯仿试剂在提取质粒DNA过程中的残留对后续分子鉴定质量的影响. 相似文献
5.
6.
乙型肝炎病毒X蛋白在细胞转化和肝癌的发生发展中具有重要作用.为了深入研究X蛋白的致癌机理构建了pTAT-GFP-X载体.该研究以克隆在真核表达载体pCMV-X质粒中的x基因为模板,设计了x基因的PCR引物,采用PCR方法扩增x基因,回收PCR产物,以XhoI和EcoRI酶切位点将PCR产物连接到蛋白转导系统pTAT-GFP载体中,再用XhoI和EcoRI酶对筛选的重组子进行酶切鉴定,获得了510bp的目的片段,表明已成功地将目的片段克隆在pTAT-GFP载体中.经DNA序列分析检测,显示克隆的x基因无突变.经SDS-PAGE和Westernblot检测证实,将重组质料pTAT-GFP-X转化致大肠杆菌BL21中,可表达pTAT-GFP-X融合蛋白.该pTAT-GFP-X载体蛋白转导系统的构建,为进行X蛋白的蛋白转导实验奠定了基础.pTAT-GFP-X融合蛋白具有穿透细胞膜进入细胞的能力,进而在细胞内发挥作用,与转基因不同,无需细胞内基因表达的过程,使得X蛋白的定量实验成为可能,X蛋白的蛋白转导实验更有助于探讨x基因的致癌机理. 相似文献
7.
文中采用PCR技术从番茄中克隆获得了Mi基因,采用反转录PCR(RT-PCR)技术从来源于红橘(Citus reticulate)的根结线虫中克隆获得了16D10基因,采用DNA重组技术构建了Mi基因的过表达载体和16D10基因的RNAi载体,分别命名为pB-Mi和pB-16DR. 通过根瘤农杆菌介导的遗传转化,获得了经PCR检测为阳性的沙田柚转基因植株. 这一结果将为研究Mi基因过表达和16D10基因的RNA干扰对柑橘根结线虫病的抗性影响提供试材和技术支持. 相似文献
8.
9.
10.
枯草杆菌纳豆激酶基因的克隆及其在E.coli BL21(DE3)plysS中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
用CTAB法从枯草杆菌(纳豆株)中提取基因组DNA,聚合酶链式反应(PCR)扩增获得837bp的DNA片段,将该基因片断克隆到pMD18-T载体上,筛选重组子,通过限制性内切酶、PCR技术和测序分析确定该重组子所含插入片断为纳豆激酶基因.利用基因重组技术构建了纳豆激酶基因的融合表达载体,转化E.coli BL21(DE3)plysS后经IPTG诱导在大肠杆菌中高效表达,经SDS—PAGE电泳及bandscan软件分析融合蛋白分子量约为33.4kD,约占菌体总蛋白29.4%. 相似文献
11.
项目教学法在生物化学实验实训中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
项目教学法是一种以项目或案例为基础,以学生为主体,类似于科学研究和项目管理的一种现代教学方法。在生物化学实验实训教学中应用项目教学法,能够有效提高学生对生物化学实验的兴趣和积极性,充分挖掘学生的潜能,积极开拓学生的视野,同时加强了师生间的互动与关系,最终体现在扎实训练学生的操作技能,提高学生的综合实验能力。 相似文献
12.
13.
14.
基于项目的CDIO理念在课程教学中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
根据CDIO工程教育理念,结合线性系统理论课程特点,设计了模拟真实工程环境的龙门吊车控制实验项目。该项目以设计为导向、工程能力培养为目标,构思了以吊运过程平稳性和快速性为总体控制目标的实验教学内容。在项目实施中,以问题为导向,引导学生主动学习,并在完成项目的整个过程中主动探寻学科知识。教学实践证明基于项目的教学模式极大地提高了学生学习的积极性和主动性,提高了科学研究能力和工程实践能力。 相似文献
15.
16.
17.
随着高校对学生科研重视程度的逐渐提升,高校学生从事科研的积极性不断提高,科研活动内容不断丰富。但是,学生科研工作的组织与管理体制尚不成熟,在某些程度上还存在缺陷。为此,要实现教学方式从“传授型教学”向“创造型教学”的转变;完善科研项目的组织结构并加强管理;制定完善的学生、指导教师的考核与奖励机制。 相似文献
18.
该文从《冲压成形工艺与模具设计》课程的教学任务和培养目标出发,结合了多年的教学实践,对该课程在教学方法上作了新的尝试和进一步探索。针对“技术本科”学校学生的实际情况,本课程改变以往课堂讲授为主的教学方式,引入项目教学模式,综合运用启发式教学、研讨式教学等灵活多样的教学方法,并结合多种教学手段,提高学生的学习兴趣,增加教学效果。 相似文献
19.
为适应社会经济发展对高素质应用型化学人才的需要,结合学生的具体情况和本实验课程的特点,在无机化学实验教学中实施“引入问题培养学生的学习兴趣、培养学生的基本实验技能、培养学生的科研实验技能、培养学生分析实验结果能力、实验教学内容以研究型实验为主、考试以研究型实验内容为主、研究型无机化学实验课题与学生科研立项相结合”七项举措,对“科学研究依托无机化学实验教学-无机化学实验教学支持科学研究-科学研究反哺无机化学实验教学”这一研究型无机化学实验教学模式进行了探索. 相似文献
20.
单片机原理课程对于电子、电信、计算机和自动控制等专业的学生来说是一门重要的专业基础课程,但由于长期以来大都采用传统的教学模式,缺乏一定的改革和创新,导致单片机原理课程的教学内容和手段都显得陈旧。针对这种状况.我们引入多媒体教学和传统教学模式相结合、汇编语言教学中引入标准C语言、学生研究性学习项目立项和Keil C51等几方面来进行探索性的改革,通过问卷调查的方式发现,大部分学生对单片机原理的教学改革是认可的。 相似文献