昆虫精子获能与顶体反应的研究

综述了近年来国内外在昆虫精子获能与顶体反应方面的研究概况,并系统地简述了昆虫精子顶体复合体基本结构,以及目前用于动物精子获能与顶体反应方面先进的方法和技术,同时对昆虫受精机理的研究进行了展望     

BAY及DMSO在体外对小鼠精子顶体反应的影响

目的探究BAY(激素敏感脂酶抑制剂)及DMSO(二甲基亚砜)对小鼠精子顶体反应(AR)的直接影响。方法分别通过5个和6个不同的浓度梯度的BAY及DMSO在体外探究其对小鼠精子AR的影响,在不同孵育时间段采用FITC-PSA和考马斯亮蓝染色法对小鼠精子的顶体反应进行鉴定。结果在所选浓度范围内BAY未能直接影响精子的顶体反应及存活率(P>0.05),而DMSO在一定浓度和时间内可直接影响精子顶体反应及精子存活率。结论 DMSO和BAY对小鼠精子发生的作用是通过不同途径来实现的,前者可直接影响精子顶体反应和精子的存活率,而后者则与顶体反应及存活率无关。提示在AR的研究中使用DMSO时需控制好作用浓度及作用时间。     

精子获能及顶体反应中与Ca~(2+)相关的变化

获能及顶体反应是受精过程中两个重要的步骤,也是受精所必需的.这两个过程可被胞内 信号调节,但具体过程还不很清楚.目前已经知道Ca2 在其中起了重要的作用.对Ca2 在获能和 顶体反应中所发挥的效应做了简要综述.     

重组人卵透明带蛋白(rhZP3)对人精子顶体反应的诱导作用

目的：观察重组人卵透明带蛋白（rhZP3）对人精子顶体反应的诱导作用。方法：正常生育力人精子经过获能后,分别用BSA、孕酮和含不同浓度的重组人ZP3蛋白的培养液共孵育。诱导精子顶体反应,对实验组和对照组的精子的顶体发生状态用考马斯亮蓝染色法进行评价。结果：精子与培养液共孵育30min后,rhZP3组与BSA组之间差异有显著性（P〈0．05）,顶体反应率随rhZP3质量浓度增加而升高。结论：重组人ZP3蛋白对人精子顶体反应有显著的诱导效应,且在一定范围内与质量浓度成正相关,重组人ZP3蛋白具有发展精子顶体反应试剂盒的潜能。     

中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)精子的形态和顶体反应的研究

研究了利用离子载体A23187诱导中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）精子产生顶体反应的最佳条件．结果表明：从雌性中华绒螫蟹纳精囊中获得的精子，在pH值为6．0，CaCl2浓度为0．2％的人工海水中，用离子载体A23187（40μg／mL）诱导70min，可以得到最大的精子顶体反应率（72％）．在此基础上用光镜观察了顶体反应过程中精子显微结构的变化，并采用天然海水配制的台盼蓝染色液和曙红B染色液对中华绒螯蟹精子的形态进行观察，确定中华绒螫蟹精子的顶体反应过程大致可分为4个阶段：第一阶段为辐射臂收缩，头帽鼓起；第二阶段为顶体囊外翻；第三阶段为顶体管前伸；第四阶段为顶体丝形成．     

以精子载体法制备转基因小鼠的初步研究

将外源融合基因BaLA-HI与DOSPER脂质体等比较混合,加入获能精子悬液中,37度,5％CO2共培养0．5h,以这种处理精子作为转基因载体乾鼠的体外受精及胚胎移植,在获得的40只移植后代后,经PCR特异片段扩增和Southern杂交,共检测出2只呈相性的转基因小鼠,证明人胰 基因已在小鼠染色体上实现了整合,基因整合率为5％。     

小鼠附睾精子的显微受精

目的：建立显微受精的方法,并探讨小鼠附睾精子在显微注射进入卵母细胞后的受精能力。方法：用显微注射法把小鼠附睾头和附睾尾精子注入卵母细胞的胞质内或卵周隙进行显微受精。结果：把单个附睾尾精子注入卵细胞质中,培养后１４个存活的卵细胞中,有５个卵裂为２－细胞期胚胎;将单个附睾头精子注入卵母细胞中,有２５个存活,其中９个受精发育为２－细胞期胚胎;将附睾尾精子注入卵周隙进行带下受精,３０个存活的卵细胞中有４个     

高压电脉冲处理对小鼠精子超微结构及体外受精的影响

用电脉冲法处理小鼠精子后进行体外受业有、体外受精贸的卵裂率和桑椹胚发育率都有所降低,以1．0kv/cm,30μs的最佳处理条件处理过的组其卵裂和桑椹胚发育率分别为63．5％和50．9％,与对照组的84．1％和80．0％相比,有显差异（P＜0．01）,说明电脉冲处理对精子受精率和胚胎的体外早期发育有影响。将1．0kv/cm,30μs和4．8kv/cm,90μs电脉冲处理后的精子与正常对照组（离心后重悬于电脉冲缓冲液）的精子分别离心固定后制作电镜切片,观察结果发现,电脉冲处理组的顶体外细胞膜膨胀了膨胀,覆盖顶体的细胞膜隐入,在顶体后区有细胞膜的断裂现象,其变化率分别是：1．0kv/cm,30μs处理组为36．3％;4．8kv/cm,90μs处理组为46．7％,较低电压脉冲处理组精子顶体部分发生了类似顶体反应的变化恩赐 高压电脉冲处理组的线粒体发现了空泡化和线粒体的大小不均一性变化。     

昆明山海棠诱发小鼠精子非整倍体的研究

应用荧光原位杂交（FISH）技术评价了昆明山海棠水抽提物（THH）在雄性小鼠生殖细胞形成过程中的非常整倍体诱发效应,以THH（120mg/kg,240mg/kg,480mg/kg)腹腔注射昆明种雄性小白鼠,根据小鼠精子发育周期,于处理后22天后取小鼠附睾精子涂片,以生物素标记的8号染色体着丝粒重复顺序探针进行FISH,荧光显微镜下分析受试物处理动物后精子特异异染色体分离情况,结果发现,THH在中间剂量组（240mg/kg)的高剂量组（480mg/kg)诱发精子非整倍体频率的显著高于溶剂对照（P＜0．001）,低剂量组（120mg/kg)的异常精子频率与溶剂对照无显著差异（P＞0．05）,研究证明,THH在雄性小鼠生殖细胞发育过程中具有染色体不分离诱发效应。     

硝酸钐对雄性小鼠的急性毒性及精子质量的影响

通过灌胃口服方式,研究了硝酸钐对雄性小鼠的半数致死量(LD50),并探讨了不同染毒剂量下存活小鼠的脏器系数、精子质量的变化.结果表明:硝酸钐对雄性小鼠的LD50为3 393.56 mg/kg,LD50的95%可信限为3 175.50～3 626.60 mg/kg;小鼠染毒后体质量增加缓慢,肾脏脏器系数明显地低于对照组(P＜0.05);2 880.00mg/kg剂量组小鼠的脾脏脏器系数与对照组相比极显著增加(P＜0.01),且小鼠精子活力明显降低(P＜0.05).提示硝酸钐对雄性小鼠的毒性较低,但染毒后部分脏器有急性损伤,而且会降低小鼠的精子质量.     

人输卵管液和输卵管上皮细胞培养液诱发精子的顶体反应

目的：探讨人输卵管液和上皮细胞培养液对人精子顶体反应的诱发作用。方法：用Ｈａｍ′ｓＦ１０作对照组，输卵管液和上皮细胞培养液为实验组，分别与生育力组（ｎ＝２０）和不育组（ｎ＝２０）的精子进行共孵育，用精子顶体三色染色法对顶体状态进行评价。结果：共孵育３ｈ时与Ｈａｍ′ｓＦ１０对照组相比较，两种输卵管液均可显著提高生育力组和不育组的精子顶反应率（Ｐ〈０．０５），但这两种输卵管液处理的生育力组与不育组之间     

盐酸川芎嗪对雄性小鼠精子数量、活动率及其恢复的影响

借鉴文章实验证明川芎嗪对于小鼠的早期妊娠有一定的影响,对雄性小鼠也具有一定的生殖毒性,较长时间用药可以杀死精子,造成不育(与健康雌性小鼠自由交配不生育),但不影响雄性激素分泌,作为雄性避孕药使用有一定的优势,因此,本实验设计短期用药对小鼠精子活动率的影响及停药后的恢复情况,以观察川芎嗪对雄性的可能避孕作用.     

泛素-蛋白水解酶复合体通路在小鼠精子变态中的作用

应用重力沉降法分离睾丸各层细胞,通过蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白免疫迹观察各种生精细胞中泛素结合蛋白的表达规律,并通过免疫组织化学方法对其进行组织和细胞水平的定位,表明,在圆形精子和长形精子细胞中泛素结合蛋白增加,在成熟精子中量较低,在精原和精母细胞中量微弱。总蛋白电泳的结果表明,在精子变态过程中蛋白 变化以长形精子细胞转变为成熟精子阶段最为剧烈,其间许多蛋白消失同时半随一些新蛋白的出现,此阶段消     

中国科学院用“人造精子”制造雌性小鼠

中国科学院上海生物化学与细胞生物研究所李劲松、徐国良研究员找到一种改造小鼠精子的方法,可以对精子中的目标基因进行＂加工＂。     

雷公藤多苷致大鼠精子畸形初步研究

目的 采用雷公藤(Tripterygium wilfordii)多苷灌胃造模,分析大鼠精子异常形态,详细描述大鼠精子异常形态类型,为研究大鼠精子畸形提供参考.方法 雄性成年SD大鼠,雷公藤多苷剂量为30 mg/kg灌胃,给药4周及8周后,分别取大鼠附睾精子,用Diff-Quik染色法,在光镜下行精子形态分析.结果 (1...     

不同方法诱导西门塔尔公牛精子体外获能的研究

实验对西门塔尔牛精子体外获能培养基及方法的选择进行研究．结果表明：以mBww为培养基，添加咖啡因2mmol／L，亚牛磺酸70μmol／L经50μg／ml肝素和1g／L透明质酸酶处理牛精子，是诱导牛精子体外获能的有效方法．     

蛇蜕对小鼠早期炎症反应影响的初步研究

目的：探讨蛇蜕对小鼠早期炎症反应的影响,为蛇蜕的临床应用提供新的实验依据。方法：分别制备二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型、甲醛致小鼠足肿胀模型和醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高实验模型,观察蛇蜕对小鼠炎症反应的影响。结果：蛇蜕对多种早期炎症反应模型均有明显的抑制作用。结论：蛇蜕具有一定的抗炎活性。     

小鼠孤雌生殖的胚胎干细胞的初步研究

比较去透明带孤雌桑葚胚和留透明带孤雌囊胚、体内受精胚胎、体外受精胚胎在饲养层上囊胚的扩张率、岵壁生长率．结果表明去透明带孤雌桑葚胚比留透明带孤雌囊胚的扩张率显著（p〈0．05）提高,而贴壁率则极其显著地（p〈0．01）提高,此外前者还发生增殖．但孤雌胚胎的囊胚扩张率、贴壁率和增殖率均极其显著地（p〈0．01）低于体内受精胚胎和体外受精组;体内受精胚胎的体外发育最佳．说明去透明带孤雌桑葚胚比留透明带孤雌囊胚更利于在饲养层上贴壁生长,为建立孤雌生殖的胚胎干细胞系提供了基础．