超声波辐照对大肠杆菌细胞膜的影响

为了解大肠杆菌经超声波作用后其细胞膜的变化状况,采用荧光染料二乙酸荧光素、罗丹明123、二氯荧光黄双乙酸盐对大肠杆菌样品染色,并通过荧光分光光度计、荧光显微镜和透射电镜检测、观察.结果显示:荧光探针测定法可用于测定大肠杆菌细胞膜的变化.在超声波频率为25 kHz、电功率为300W的条件下处理90 s后,细胞结构完整,膜双分子层变模糊,表面有破损成小孔的地方,内含物外渗.膜通透性增加12.7%,膜电位下降26.7%,胞内活性氧水平上升.     

湿地植物的抑菌效应研究

根据1次典型实验结果研究了狐尾藻,浮萍,香蒲和菖蒲对水体中大肠杆菌生长的抑制作用.结果表明,受试植物中浮萍、菖蒲分泌的代谢产物对大肠杆菌SOD产生胁迫效应并抑制其生长;BOD5与大肠杆菌生长具有正相关性,湿地植物通过去除水体BOD5亦可实现抑菌效应.     

Genome sequence of enterohaemorrhagic Escherichia coli O157:H7

The bacterium Escherichia coli O157:H7 is a worldwide threat to public health and has been implicated in many outbreaks of haemorrhagic colitis, some of which included fatalities caused by haemolytic uraemic syndrome. Close to 75,000 cases of O157:H7 infection are now estimated to occur annually in the United States. The severity of disease, the lack of effective treatment and the potential for large-scale outbreaks from contaminated food supplies have propelled intensive research on the pathogenesis and detection of E. coli O157:H7 (ref. 4). Here we have sequenced the genome of E. coli O157:H7 to identify candidate genes responsible for pathogenesis, to develop better methods of strain detection and to advance our understanding of the evolution of E. coli, through comparison with the genome of the non-pathogenic laboratory strain E. coli K-12 (ref. 5). We find that lateral gene transfer is far more extensive than previously anticipated. In fact, 1,387 new genes encoded in strain-specific clusters of diverse sizes were found in O157:H7. These include candidate virulence factors, alternative metabolic capacities, several prophages and other new functions--all of which could be targets for surveillance.     

有机溶剂对大肠杆菌细胞膜的影响

通过对甲苯、四氯化碳、正己烷、邻苯二甲酸二乙酯4种有机溶剂对大肠杆菌K12存活率、细胞膜电位、通透性和脂肪酸组成的影响研究发现:大肠杆菌对正己烷、邻苯二甲酸二乙酯耐受性较对四氯化碳和甲苯的耐受性强;在有机溶剂刺激下,可以看到细胞膜电位的降低及细胞膜通透性的增加,细胞膜饱和脂肪酸比例增加.在加入0.3%四氯化碳30min后,细胞膜电位下降了16.3%,通透性增加34.5%,饱和脂肪酸比例达到38.7%.因此,大肠杆菌通过细胞膜的变化来适应有机溶剂的刺激.     

肠出血性大肠杆菌O157:H7感染小鼠动物模型的初步建立

目的　建立肠出血性大肠杆菌O15 7:H7感染小鼠动物模型。方法　选用离乳小鼠随机分组 ,先以丝裂霉素和萘啶酮酸处理 ,提高小鼠对肠出血性大肠杆菌O15 7的敏感性 ,再分别以不同剂量口服接种肠出血性大肠杆菌O15 7:H7EDL933W ,进行临床和病理学检查。结果　利用对O15 7不易感的小鼠 ,复制出人类感染O15 7所出现的主要病理变化和部分临床症状 ,初步建立了动物模型。讨论　该动物模型对探索肠出血性大肠杆菌O15 7:H7的感染机制、毒力因子的作用有重要意义 ,并为O15 7:H7的疫苗侯选株安全性的评价打下初步基础。     

磷酸饥饿诱导大肠杆菌同步化

用改良的Ｋｅｐｅｓ磷酸饥饿法诱导大肠杆菌Ｋ—１２ＡＭ１２６４同步化生长，细胞经８轮同步化步骤后可在磷酸不限制培养基中自由生长保持２～３次同步化细胞周期。Ｋ—１２ＡＭ１２６４大肠杆菌的细胞增倍和分化周期分别为５５和１５ｍｉｎ，同步化细胞周期可分达３个时相。细胞分裂期（Ｐ），细胞分裂和染色体复制起始间期（Ｑ）以及染色体复制起始和细胞分裂间期（Ｒ）。Ｒ期又可分Ｒ１和Ｒ２两个亚期。在Ｒ１亚期胸腺呼啶掺入ＤＮＡ的速度增加，在Ｒ２亚期掺入速度保持恒定。Ｒ１和Ｒ２期分别为１５和１０ｍｉｎ。     

胆固醇-7,8-脱氢酶大肠杆菌工程菌的构建

7-去氢胆固醇在化妆品和医药领域具有较大的应用需求,但现有的生产方法为化工法,流程复杂,且易污染环境.发酵法生产7-去氢胆固醇是一条新颖且具有潜在竞争力的生产途径.以虾Y-器官微粒体的cDNA文库为模板进行胆固醇-7,8-脱氢酶基因的扩增,与质粒载体连接后转化大肠杆菌,并对该工程菌的生物催化胆固醇-7,8-脱氢能力进行检测.     

人白细胞介素7重组蛋白原核表达载体在大肠杆菌中的表达和鉴定

目的:构建重组人白细胞介素7(rhIL-7)的原核表达载体,在大肠杆菌中表达并鉴定.方法:以RT-PCR方法扩增编码IL-7的cDNA片段,插入至pET-3d载体中,构建rhIL-7的原核表达载体,阳性克隆经测序鉴定,转化至大肠杆菌BL21(DE3),优化rhIL-7表达条件,利用免疫印迹鉴定重组蛋白.结果:重组载体经DNA测序显示包含正确的rhIL-7编码序列,重组载体转入大肠杆菌后,经IPTG诱导后外源蛋白表达,相对分子质量为17 400,与IL-7理论分子质量一致;免疫印迹显示,外源蛋白可以被人IL-7特异性抗体识别,表明在原核表达的外源蛋白是rhIL-7.rhIL-7主要表达于包涵体中,包涵体表达优化条件为:温度为37 ℃、IPTG浓度为0.4 mmol/L、诱导时间为4 h.结论:成功的构建了rhIL-7的原核表达载体.     

大肠杆菌O157:H7基因组研究进展

对大肠杆菌O157：H7基因组的结构、特点等近年来的研究进展进行了综述。