UV胁迫酵母细胞凋亡过程的拉曼光谱研究

【目的】了解UV诱导酵母细胞发生凋亡过程中生物大分子的变化及细胞凋亡的分子机制。【方法】应用单细胞激光光镊拉曼光谱技术(LTRS),实时研究酵母细胞凋亡过程中拉曼光谱强度的动态变化,分析单个细胞凋亡过程的生理生化变化。【结果】致死剂量UV照射酵母细胞后,细胞发生凋亡。对于群体细胞,归属于核酸的1085cm-1,1300cm-1,蛋白质的850cm-1,1440cm-1,1604cm-1,1650cm-1和脂类的1085cm-1,1300cm-1,1440cm-1拉曼峰强度都随凋亡时间的延长而降低,反映酵母细胞在凋亡过程中,细胞内核酸、蛋白质、脂质等大分子物质的含量随时间变化逐步减少;1604cm-1下降幅度最大,到凋亡后期下降60%,反映细胞凋亡过程中能量代谢受阻,呼吸产能活力下降,推测与麦角固醇结构与功能改变有关。单个细胞凋亡过程动态的光谱变化显示,归属于蛋白质等生物大分子的光谱强度也呈下降趋势,但是在90~120min和125~167min时间段里,850cm-1,1085cm-1,1300cm-1,1440cm-1和1665cm-1拉曼峰强度出现恢复性的上升和下降过程,说明群体细胞平均后的光谱数据信息,掩盖了个体细胞凋亡过程中一些信息的变化,群体细胞的结果不能完全反映个体细胞真实的生理状态。【结论】LTRS基于单个细胞水平上的研究,能更直接、真实地反映UV胁迫下细胞内生物大分子变化的动态信息。     

外源多胺对宁夏枸杞离体形态发生过程中可溶性蛋白组分和过氧化物酶同工酶酶谱的影响

利用已建立的宁夏枸杞(Lycium barbarum L.)器官发生和体细胞胚发生体系,对多胺在高等植物离体形态发生中的作用以及部分生化特征进行了研究。将不同多胺预处理过的愈伤组织诱导器官发生的实验中,Spd能显著提高不定芽的再生频率,而CHA的预处理对不定芽形成产生的阻碍最为严重。在体细胞胚发生体系中,Spd,Put的处理能促进体细胞胚成苗,而MGBG,CHA的处理明显降低了成苗率。不同的多胺及其生物合成抑制剂均能影响两种再生体系的可溶性蛋白组分和过氧化物酶(POD)同工酶谱的表达;但对器官发生和体细胞胚发生途径特异多肋(46．3,36．2kD)的合成没有明显影响;而对存在于器官发生全过程、仅出现于体细胞胚发生后期阶段的44kD多肽,MGBG在两种途径中都能阻碍它的表达,Put仅在体细胞胚发生中有抑制作用。这些结果显示多胺可能在高等植物离体形态发生中起“第二信使”作用。     

水样中痕量Cr(VI)的富集及测定

本文以环氧氯丙烷做交联剂，与β-环糊精反应，合成一种具有三维网状结构并不溶于水的大分子物质。该物质与显色剂朱基萤光酮发生包结作用，形成包结树脂。用此树脂富集痕量Cr（VI），结果令人满意。     

苜蓿转化细胞系核酸和蛋白质合成的研究

以苜蓿转化细胞系和对照细胞系为材料，利用同位素标志方法研究了3种大分子物质－－DNA、RNA和蛋白质的合成动态。结果表明，与对照细胞系相比，转化细胞系的生长速度明显加快，DNA、RNA和蛋白质的合成旺盛，合成速度显提高。同时，转化细胞系DNA、RNA和蛋白质出现最大合成速度的时间均相应地延迟。     

银杏组织培养研究进展

为了全面了解银杏组织培养现状，找出银杏组织培养的规律，概述了利用银杏的器官培养、愈伤组织培养、细胞悬浮培养、花粉培养、胚及其发生的培养、毛状根培养等组织培养手段进行银杏种质保存及生理学研究的现状。并指出，弄清次生代谢物合成途径及其关键步骤的关键酶，利用原生质体、雌配子体细胞和花粉获得体细胞胚，建立起一个将胚长成植株的体系，是今后努力的方向。     

落叶松体细胞胚胎发生的研究进展

落叶松体细胞胚胎发生属于间接体细胞胚胎发生途径，主要包括三个步骤：胚性培养物诱导、继代与增殖及其体胚成熟和萌发。供体植物的基因型及其培养基的成分等是影响落叶松体细胞胚胎发生的重要因素。体细胞胚胎发生是一种有效的大规模克隆繁殖方法，并且在许多有重要经济价值的树种中都取得了很大进展，目前已从30多种松柏类植物诱导出体细胞胚。落叶松体细胞胚胎发生的应用大多数集中于胚性培养物的超低温保存、原生质体培养、转基因等技术，并对落叶松体细胞胚胎发生的研究趋势作了展望。     

聚醚多元醇大分子单体与苯乙烯／丙烯腈共聚合反应动力学 …

利用大分子单体法合成了聚合物聚醚多元醇，测定了各反应条件下乙烯基单体的转化速率和最终产品中微粒大小，发现聚合反应的动力学规律，与以小分子物质为反应介质的分散聚合基本一致，大分子单体用量，搅拌速率和反应温度均影响乙烯基单体转化速率和微粒大小。     

痕量汞离子富集方法的研究

本文以环氧氯丙烷为交联剂与β－环糊精发生反应,合成一种具有三维网状结构并不不于的大分子物质。将物质与显色剂ＰＡＲ作用,生成一种包结化合物树脂。用该树脂富集痕量汞离子,令人工满意。     

不同光照条件下龙眼体胚发生过程中过氧化物酶同工酶酶谱分析

试验以龙眼胚性愈伤组织为材料,研究不同光照条件对龙眼体细胞胚胎发生各阶段过氧化物酶(POD)同工酶的影响。结果表明:龙眼体细胞胚胎发生各阶段过氧化物酶(POD)同工酶出现了很大的变化。酶带数量总的变化趋势是胚性愈伤组织谱带条数较少,球形胚发生过程中增多,到了子叶形胚后谱带条数又减少;不同光照条件下,蓝光的谱带条数最多,说明不同光照条件对龙眼体细胞胚胎发生有不同效应,意味着蓝光条件下体细胞胚胎内物质代谢是最活跃的,蓝光对体细胞胚胎生长有促进作用。     

野蔷薇内源多胺的HPLC测定方法及其组织变化规律

以野蔷薇为材料，提取内源多胺，用高效液相色谱法HPLC进行腐胺、亚精胺、精胺含量测定.结果表明，多胺提取过程中，样品用量0.2 g、冰浴浸提液300μL、苯甲酰化反应37℃,提取效率最高.HPLC检测参数：流动相为V（甲醇）∶V（水）(60∶40),进样量15μL,流速1 mL·min^-1,柱温30℃,检测波长254 nm,保留时间15 min时，3种内源多胺可完全分离并定量测定，相关系数均大于0.99,测定加标回收率为87.17%～103.64%,表明该方法可靠.在野蔷薇体细胞胚胎发生过程中，叶片培养3 h,内源多胺无明显变化，培养3 d后，多胺总量和腐胺含量显著增加，5 d后，亚精胺和精胺含量显著增加，亚精胺含量最高，精胺其次，腐胺含量极显著下降，同时多胺总量下降，说明在野蔷薇体细胞胚胎发生的启动阶段，腐胺向下游产物亚精胺和精胺发生了转化；在培养25 d的愈伤组织中，多胺总量显著下降，腐胺和精胺含量很低，说明在野蔷薇愈伤组织增殖阶段，可能精胺作用不大.该试验建立了内源多胺的2 mL提取体系，该方法降低了样品材料的用量，多胺提取过程更简便高效，并初步探索了野蔷薇...     

宁夏枸杞愈伤组织器官发生和体细胞胚发生过程中过氧化物酶和酸性磷酸酶同工酶的研究

利用已建立的宁夏枸杞（Ｌｙｃｉｕｍ ｂａｒｂａｒｕｍ Ｌ．）叶愈伤组织器官发生和体细胞胚发生体系,比较研究了两条离体再生途径早期阶段愈伤组织的生长特性、过氧化物酶（ＰＯＤ）和酸性磷酸酶同工酶的活性及酶谱的变化。结果表明：（１）与继代愈伤组织的“Ｓ”形生长曲线不同,器官发生和体细胞胚发生过程的愈伤组织生长延迟期不明显,且第３ｄ后一直处于指数生长期,培养后期器官发生的愈伤组织生长速率快于体细胞胚发生;     

旱芹人工种子内培养物的形态发生和生理生化的研究

本文讨论有关旱芹人工种子内部培养物由体细胞脱分化产生胚性细胞、胚状体,直到成株的过程中形态发生的问题,对胚性细胞所处的状态、胚状体筛选和畸形胚、胚性细胞(团)或子叶胚包裹人工种子及其萌发特点、播种基质等等方面进行了分析比较,并提出一些有关旱芹人工种子研制的基本结论。 实验对培养物的叶绿素含量和过氧化物同工酶谱进行了测定,并得到了水溶性蛋白和过氧化物酶的培养时间曲线,以期从生化指标探讨人工种子这一特定条件下培养物的生理生化变化。     

茴香胚性愈伤组织的诱导和再生植株

以茴香幼苗的茎和叶柄为外植体，在不同种类和浓度的植物激素处理下产生了愈伤组织，进一步诱导生成胚性愈伤组织，在分化培养基上，愈伤组织通过形态建成的两种基本方式：器官发生和胚状体发生，得到了茴香的再生植株。     

泡桐体细胞胚胎发生过程中过氧化物酶的变化

以毛泡桐、兰考泡桐和白花泡桐的叶片为外植体进行体细胞胚胎发生的诱导,探讨体胚发生过程中过氧化物酶同工酶的变化.结果表明,在兰考泡桐、白花泡桐和毛泡桐叶片体细胞胚胎发生过程中,均有4种过氧化物同工酶稳定出现在体胚发生的不同时期,反映出在泡桐体细胞胚胎发生过程中对这些酶的需求是稳定的.这些稳定出现的酶可能是维持细胞代谢的一些基因表达的产物.而其它种类的同工酶在体细胞胚发生的不同阶段出现或消失,有可能作为体细胞胚胎发生的标志酶.     

外源激素对防风体细胞胚发生和发育的影响

目的探讨生长素和细胞分裂素对防风体细胞胚发生和发育过程的影响。方法组织培养和石蜡切片。结果0．5mg／L2，4-D是诱导胚性愈伤组织最适宜的生长素浓度，0．5mg／LNAA在胚性愈伤组织的长期继代培养中替代0．5mg／L2，4-D可减少畸形胚的发生，NAA浓度降至0．2mg／L时促进体细胞胚的发生和分化；生长素加一定比例的细胞分裂素(6-BA或KT)可有效促进体细胞胚的发生；通过逐步降低生长素和细胞分裂素的浓度，可促进体细胞胚的分化和生长；体细胞胚在无附加激素或附加激素浓度分别低于0．2mg／LNAA和0．5mg／L6-BA的MS培养基上，均能发育成完整的植株。结论一定浓度的生长素是诱导防风胚性愈伤组织的关键因素，细胞分裂素在体细胞胚的发生和发育过程中起协同作用。     

小麦胚性细胞发生中淀粉代谢动态的量化研究

结合生物学研究，应用计算机图像技术，根据细胞形态计量学原理，以量化形式揭示了小麦胚性细胞发生中淀粉的代谢动态。研究结果表明，在小麦体细胞胚发生过程中淀粉的代谢呈现动态变化，在胚性细胞形成时，单个胚性细胞内淀粉的积累达到第一个峰值５．００９８％，随着胚性细胞的分裂，淀粉含量逐渐下降，球形胚期淀粉再次积累，形成第二个峰值２．３６５６％，还结合量化结果讨论了淀粉代谢动态与体细胞胚发生，发育过程的关系。     

福录考的组织培养研究 Ⅰ外植体的分化及植株再生

福录考的不同器官分化顺序为叶片>顶芽>茎节>未授粉子房及胚珠,叶上表面向上的外植体比叶上表面向下的分化率高。叶脱分化后,以不定芽和胚状体两条途径分化植株,并通过微型扦插建立无性快繁系。再生植株有两种类型:正常苗和玻璃苗。     

小麦花和花序分化过程中细胞内含物的变化

本文对小麦茎生长锥分化及花和花序发育过程中细胞内物质的变化进行了研究。其变化规律可总结为以下两方面:(1)DNA,RNA 和蛋白质分布的细胞区域基本一致,且都在发生新器官和迅速生长发育的原分生组织细胞中含量最丰富。(2)淀粉物质的大量积累都是向着迅速生长与发育的新器官方面转移,而且积累淀粉的细胞区域总是紧靠在原分生组织的后面,但不在原分生组织细胞中,穗轴上不同部位小穗及小穗上不同部位小花的发育状况与所获得的营养物质(主要是多糖)成正相关。     

花卉体细胞胚胎发生研究进展

综述花卉体细胞胚胎发生途径、体细胞胚胎发生过程的生理生化变化及其影响因素、体细胞胚胎发生与胚性基因的表达和花卉体细胞无性系变异等方面的研究进展,植物体细胞胚胎发生研究在基因工程体细胞融合、细胞突变体诱导、人工种子、杂种合子胚的挽救、种质保存、苗木快速繁殖等诸多方面有着广阔的应用前景,也是遗传学、转基因工程体系、生理生化、植物发育过程的基因表达和调控、功能基因组研究等方面一个必不可少的新兴研究系统.