土贝母苷甲诱导人红白血病细胞K562凋亡

用MTT法检测苷甲对K562细胞生长的抑制作用,分别采用形态学方法(光学显微镜、倒置显微镜、荧光显微镜)检查在苷甲作用下K562细胞形态的变化以及用流式细胞术观察在苷甲作用下K562细胞凋亡及周期变化的情况.结果显示:苷甲抑制K562细胞的生长,其24、48、72h的IC50值分别为19.7、18.5、15.9μmol/L.苷甲诱导K562细胞出现典型凋亡细胞的形态学特征.20μmol/L苷甲作用K562细胞6 h,流式细胞仪即检出亚倍体峰,G2/M期细胞增多.随着作用时间延长,细胞被阻滞于G2/M期更加明显,细胞的凋亡率也增加.该实验证明:苷甲能抑制K562细胞的生长,把细胞阻滞在G2/M期并诱导细胞发生凋亡.     

微波对K562/MDR细胞凋亡及热休克蛋白70表达的影响

研究微波引起白血病耐药细胞株K562／MDR的凋亡以及对热休克蛋白70表达的影响。使用MTT方法检测细胞存活率，AnnexinV/PI双参数法检测K562／MDR细胞的凋亡率，流式细胞仪检测热休克蛋白70的表达。结果表明，微波可起K562／MDR细胞的凋亡，经0.20,0.60W/cm^2功率密度微波作用20min（保持43℃），37℃培养24h后，细胞凋亡率分别为10％、13．6％，而水浴加热引起的凋亡率仅为3．8％，微波照射影响细胞内热休克蛋白70的表达，在43℃时，0.20,0.60W/cm^2功率密度微波作用20min抑制HSP70的表达，实验说明微波能引起K562／MDR细胞的凋亡，该凋亡与微波引起的热休克蛋白表达的改变可能有联系。     

黄芩苷诱导Jurkat T细胞凋亡的体外研究

目的:研究黄芩苷(BA)抑制Jurkat T细胞(人T淋巴细胞白血病细胞株)的生长和诱导其凋亡的作用及机制。方法:以噻唑兰(MTT)比色法测定BA对细胞生长的抑制率;胞内[Ca2 ]i和线粒体跨膜电势(ΔΨm)分别用F luo-4/AM和D iOC6(3)荧光探针标记,流式细胞仪检测;PI染色流式细胞术分析细胞周期分布及凋亡率;凋亡细胞形态以Hoechst33342/PI染色后荧光显微镜观察。结果:BA明显抑制Jurkat细胞增殖(P<0.01),并呈时间、浓度依赖性;BA可浓度依赖的诱导Jurkat细胞[Ca2 ]i浓度上升、线粒体膜电势ΔΨm降低,将细胞周期阻滞在S期,凋亡率增加,荧光显微镜下可见经BA(100 mg/L)作用的细胞呈现典型的凋亡核固缩表现,胞核呈致密浓染的颗粒状荧光。结论:BA体外显著抑制Jurkat T细胞增殖及诱导其凋亡,其机制可能与胞内[Ca2 ]i及线粒体依赖的凋亡通路有关。     

小剂量阿糖胞苷体外诱导HL-60细胞凋亡的作用

阿糖胞苷是白血病的重要药物,其小剂量化疗仍用于临床治疗白血病,并取得了一定的疗效,但其作用机制尚未完全阐明,可能与药物诱导细胞分化或凋亡有关.文中用TUNEL法和流式细胞仪分析小剂量Ara-C(10-8M)对HL-60细胞周期和细胞凋亡的影响,用免疫组化法和原位杂交法分别检测P53蛋白和p53mRNA、bcl-2mRNA表达水平的改变,以探讨bcl-2和p53基因表达与小剂量阿糖胞苷诱导HL-60细胞凋亡的关系.结果表明:小剂量Ara-C能诱导HL-60细胞凋亡,其分子机制可能与P53蛋白、p53mRNA表达增加和bcl-2mRNA表达降低有关.     

石蒜碱诱导人白血病K562细胞凋亡的研究

为研究石蒜碱诱导白血病K562细胞凋亡机制,采用体外细胞培养方式,通过CCK-8法描绘细胞生长曲线,测定细胞增殖活性,CCK-8结果显示石蒜碱能够抑制K562细胞生长,且呈现剂量依赖性,其IC50=4.13μmol/L.倒置显微镜进行细胞形态学观察,石蒜碱作用细胞后,细胞形态学发生改变.PI单染法检测细胞凋亡率,数据显示,石蒜碱诱导K562细胞的凋亡率与给药剂量呈正相关.Western-blot法检测P53蛋白表达情况,随着石蒜碱浓度的增加,P53活性增强(P0.05).结果显示,石蒜碱抑制白血病K562细胞增殖,诱导细胞凋亡,其凋亡诱导作用可能与细胞内P53基因的表达有关.     

三尖杉酯碱诱导HeLa细胞凋亡的研究

报道了三尖杉酯碱 (harringtonine ,HT)可以诱导HeLa细胞凋亡 .采用Heochst33342荧光染色、琼脂糖凝胶电泳及流式细胞光度术 (FCM)的方法 ,研究了HT对HeLa细胞凋亡的影响 .利用细胞同步化技术和斑点杂交法研究发现 ,HT影响了HeLa细胞c myc和bcl 2基因的表达并且与细胞周期密切相关 .初步探讨其凋亡诱导的机制 ,认为HT通过在G1和G2 期下调细胞凋亡抑制基因bcl 2的诱导凋亡 ,以及下调c myc癌基因阻滞细胞增殖 ,并延迟凋亡发生 .这些结果对于了解HT的药物作用机制和提高临床化疗疗效具有重要意义 .     

洋地黄毒苷诱导小细胞肺癌NCI-H446细胞增殖和凋亡的影响

应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测洋地黄毒苷对NCI-H446细胞增殖的抑制效果;用AO-EB染色、DNA凝胶电泳分析以及AnnexinⅤ检测法检测细胞凋亡;用碘化丙啶(PI)染色测定其周期变化,利用激光共聚焦显微镜观察细胞内活性氧(ROS)和钙离子(Ca2+)的变化.结果显示洋地黄毒苷明显抑制NCI-H446细胞增殖,AO-EB染色、DNA电泳及AnnexinV检测法显示细胞有明显的凋亡现象,PI染色显示处于S期的细胞增多,激光共聚焦显微镜观察表明细胞内活性氧和钙离子浓度均升高.表明洋地黄毒苷能明显抑制NCI-H446细胞增殖,且细胞被阻滞在S期.细胞内活性氧和钙离子浓度的增加可能与其诱导细胞凋亡有关.     

siRNA抑制BCR—ABL基因诱导K562细胞凋亡的初探

目的：通过mRNA结构预测软件预测出BCR—ABLmRNA二级结构,未形成二级结构的区域作为靶序列。方法：针对BCR—ABLmRNA二级结构中的单链区域设计四对siRNA,通过Lipotap脂质体作为转染载体去转染K562细胞。结果：所设计的四对siRNA其中有一对siRNA转染K562细胞后,K562细胞出现凋亡现象。结论：通过该方法有针对性的设计siRNA,避免了把mRNA的二级结构区域作为靶序列,提高了所设计siRNA的效果。     

槐果碱对人红白血病K562细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用

研究了槐果碱对人红白血病细胞株K562的增殖抑制和诱导细胞凋亡的作用，应用流式细胞仪进一步观察槐果碱对K562细胞周期的影响。结果表明：槐果碱对K562细胞生长有明显的抑制作用，且这种抑制作用呈浓度依赖性、时间依赖性。细胞经0．8g／L、1．0g／L的槐果碱作用48h后，即呈现典型的细胞凋亡形态学变化，作用72h后DNA凝胶电泳出现片段的梯形条带。流式细胞仪分析显示，用1．0g／L槐果碱使K562细胞阻滞于G0／G1期，作用72h后G0／G1细胞比例由38．0％上升到56．2％。槐果碱对人红白血病细胞K562的增殖具有明显的抑制作用，并能诱导其发生凋亡。     

微波和长春新碱对白血病细胞的体外净化研究

旨在研究一种较好的微波和长春新碱的联合方法,用于白血病细胞的体外净化．将微波和长春新碱分别单独以及联合作用于正常骨髓细胞ＨＬ６０、Ｕ９３７和Ｋ５６２细胞株,通过ＧＭ－ＣＦＵ和ｔＣＦＵ的测定来评价体外净化的效果．结果发现微波和长春新碱对ＧＭ－ＣＦＵ、ｔＣＦＵ存活率均表现出抑制作用,抑制程度呈现出功率相关性和浓度相关性;在一定范围内,微波和长春新碱对３种细胞株ｔＣＦＵ存活率的抑制显著大于ＧＭ－ＣＦＵ（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）;微波和长春新碱联合作用对３种细胞株的杀伤作用比单用长春新碱有显著性增加（Ｐ＜０．０５）,而不显著增加对ＧＭ－ＣＦＵ的抑制（Ｐ＞０．０５）．这一结果提示微波和长春新碱联合用于白血病细胞的体外净化能产生协同效应,值得进一步研究．     

力达霉素对人红白血病K562细胞死亡的影响

利用100,10和1nmol·L-1力达霉素(LDM)处理人红白血病K562细胞(p53,p16基因缺失),初步探讨了LDM对K562细胞死亡的影响. 结果表明,LDM可明显抑制K562细胞的活性,并呈现剂量依赖效应. 细胞核染色质呈点状或斑块状凝集.通过流式细胞术对细胞周期时相的分析表明,高剂量LDM处理引起S期细胞的比例明显升高,死亡细胞的比例明显增加,提示LDM通过引起DNA的损伤,可阻断细胞周期的进程,促进细胞的死亡实现抑癌作用.     

汞离子对卵细胞体外生长和凋亡的影响研究

重金属对人体健康的毒害作用一直受到人们的普遍关注,其中汞元素的生殖毒性近年来尤其受到重视Aditya[1]采用荧光显微技术测得Hg2+可大大降低鱼卵细胞中的RNA/DNA比值.另有报道指出,低浓度Hg2+可加速爪蛙卵细胞中蛋氨酸向蛋白质的转化[2].     

麝香百合离体繁殖与移栽技术研究

对麝香百合（Ｌｉｌｉｕｍ ｌｏｎｇｉｆｌｏｒｕｍ Ｔｈｕｎｂ）在离体快速繁殖中的取材部位、生根培养其中的激素配比和移栽基质进行了研究,结果表明：幼茎段和中部鳞片是较优材料;在生根培养中,培养基以１／２ＭＳ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／１＋２％蔗糖＋０．７％琼脂（ＰＨ５．７）为宜,炼苗３天后生根幼苗转入移栽介质,最适宜过渡基质为１／３园土＋１／３腐殖土＋１／３锯末,过渡１０天后进入大田,过渡基质对麝香百合移栽大田后的成活率没有影响,但对其地上、地下部分的营养生长有显著影响。     

人脐带静脉血管内皮细胞的体外培养及其凋亡的研究

本文从提取生长因子入手，建立人脐带静脉血管内皮细胞系，用电镜进行了细胞鉴定，然后用去除生长因子（FGF和胎牛血清）的方法诱导细胞凋亡，利用荧光显微技术、DNA凝胶电泳、电镜技术和流式细胞分光光度技术，研究了血管内皮细胞凋亡过程中超微结构和细胞周期的变化。发现去除生长因子3h后，在细胞发生明显的DNA片段化和形成凋亡小体的同时，细胞核与细胞质的超微结构发生了明显的变化，S期细胞显著减少，G1期无明显变化，G2细胞显著增多，说明用去除生长因子的方法诱导血管内皮细胞凋亡时，细胞从G2期脱离细胞周期进入凋亡程序，本文的人血管内皮细胞在体外的成功培养和对该细胞凋记的研究对深入研究其凋亡的分子调控机制具有重要的参考价值。     

青霉素对樱桃离体培养试管苗生长及抑菌作用的研究

在樱桃离体培养中，于ｃｏｌｔ砧木试管苗生长和生根培养基添加１００～５００×１０－６ｍｇ／Ｌ的青霉素，其对试管苗有不同程度的促进生长和生根作用；２００～５００×１０－６ｍｇ／Ｌ的青霉素，对污染试管苗的细菌有不同程度的抑制和消除作用，但对霉菌无效．     

多烯脂肪酸及其硒化物的体外抗癌活性研究

本文采用体外细胞培养技术,对多烯脂肪酸类化合物进行了系统的体外抗癌活性研究,发现多种多烯脂肪酸及其硒化物对小鼠 S_(180)腹水型癌细胞均能产生良好的杀伤作用,其中硒化油酸和硒化亚麻酸的活性为最高.     

小鼠骨髓造血基质细胞体外培养及其功能的研究

采用细胞培养从正常LACA雄性小鼠骨髓中分离得到1株造血基质细胞（HSC），该细胞胞体较大，呈多角形，不吞噬酵母多糖，HSC粘壁层有其培养上清液均具有明显刺激CFU－GM体外增殖分化的功能，将HSC输注到经射线照射的雌性小鼠体内，PCR技术检测结果显示，HSC具有重建受体小鼠造血微环境的作用。     

细胞转化过程中微丝解聚的研究

ＮＩＨ３Ｔ３细胞以劳氏肉瘤病毒（ＲＳＶ）经温度敏感突变株转染形成的细胞株ｔｓＬＡ９０，细胞在允许温度（４０℃）时为正常表型，在允许温度（３３℃）下为转化表型。４０℃时，微丝分布发达，从４０℃移至３３℃１ｈ，微丝完全解聚，同时，其外基质成分纤粘蛋白（ＦＮ）亦相伴解聚。若在４０℃以外源性ＦＮ或对蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）具有抑制作用的三氟拉嗪进行预处理后，再转入３３℃时便能抑制微丝的解聚。结果提示，除ＲＳＶ