赖氨酸的提取精制

用甘蔗糖蜜为碳源发酵生产赖氨酸提取精制工艺是关系到总回收率和产品质量的问题。本文用国产732强酸性阳离子交换树脂对糖蜜发酵液中赖氨酸的吸附和洗脱进行了初步的研究。试验结果表明:树脂对赖氨酸的交换量,工业纯溶液在赖氨酸主要呈正一价离子的酸碱度时,发酵液在赖氨酸主要是在二价离子的酸碱度时为最大。用~#1洗脱剂洗脱结果最好。配合使用~#1洗脱剂时采用732铵型树脂可以省去树脂的转型步骤,工艺上最为合理。     

大孔弱酸DK110树脂提取庆大霉素的研究

本文比较了用大孔弱酸DK110和强酸732两种不同类型的树脂,提取庆大霉素的交换和洗脱性能。对DK110提取过程中,发酵液的预处理、灰分、色素和非活性小组分的去除等工艺条件进行了研究。实验表明,用DK110提取庆大霉素静态交换容量可比732树脂提高50%以上,收率提高6%左右,生产周期缩短1/3。同时,还具有解吸峰集中、杂质容易去除等优点。     

阴离子交换纤维在红霉素发酵液脱色中的应用

 研究了聚丙烯基强碱性阴离子交换纤维对红霉素发酵液的脱色性能。考察了接触时间、pH值等因素对脱色效果的影响。结果表明,与离子交换树脂相比离子交换纤维具有脱色容量高、脱色速度快、再生速度快等优点。环境温度301K时,静态脱色30min可达到平衡,脱色率85.3%,红霉素损失率1.17%;动态脱色可提高红霉素成品的质量又不影响其收率。因此,可以将离子交换纤维应用于红霉素发酵液的脱色领域来提高红霉素产品的质量。     

鲜三七根茎中提取三七总皂苷的纯化及脱色工艺研究

目的:研究影响分离、纯化、脱色三七总皂苷的主要影响因素,确立三七总皂苷纯化脱色工艺.方法:鲜三七提取液,按醇沉1次,时间为12h,醇沉浓度为70%的乙醇,醇沉浓度与样液比例为1:1,加絮凝剂浓度为4%的工艺进行处理,采用D101大孔吸附树脂富集纯化和D941离子交换树脂脱色三七总皂苷.结果:70%的乙醇为洗脱剂,上柱液浓度为0.2g生药/mL,上柱液的量为200mL,上柱后先用蒸馏水快速冲柱的倍量为1.5,洗脱剂的倍量为3倍,洗脱时的速度(滴速)为60滴/min.结论:D101大孔吸附树脂富集纯化和D941离子交换树脂脱色三七总皂苷,效果较好.     

利用离子交换法分离草酸青霉发酵液中的三峡肽素

三峡肽素是草酸青霉(Penicillum oxalicum)发酵液中的一种线性五肽,对柑橘类水果的采后致腐菌有强烈的抑制作用,是一种潜在的水果保鲜剂.实验室主要通过发酵液醇沉淀、旋蒸浓缩、液相制备等方法进行小规模分离.为了提高三峡肽素的大规模分离能力,利用732强酸性苯乙烯阳离子交换树脂和D201大孔强碱性阴离子交换树脂对其进行了分离,探索了分离条件,优化了工艺参数,并分析了分离收率.结果表明：离子交换法可有效分离三峡肽素,阳离子交换树脂的最佳上样pH值为3.2,洗脱pH值为9,洗脱盐氯化钠的浓度为0.5 mol/L,收率可达88.42%,且色素和残糖含量较低.阴离子型树脂的收率略高,可达92.92%,其最佳分离条件为上样pH值为10,洗脱pH值为4,洗脱盐浓度为0.1 mol/L,但是去色素和残糖的能力及脱盐效率要弱于阳离子型树脂.     

强酸型离子交换纤维PVF—g—SO3H对碱性氨基酸的分离研究

研究强酸型阳离子交换纤维PVF－g-SO3H对碱性氨基酸L－组氨酸和L－赖氨酸的吸附分离性能,并与732号树脂进行比较。结果表明PVF－g-SO3H纤维不仅对单组份赖氨酸或组氨酸的吸附率比732号树脂高约1．5％－3．9％,而且其洗脱率高约12．5％－13．4％,同时对混合氨基酸的洗脱峰既强而且分辨率高。再生后纤维和树脂的总提取率都有微小的下降,但纤维的再生提取率仍高于732号树脂10％以上。实验的最佳洗脱条件为：洗脱液柠檬酸－柠檬酸钠的pH值为4．6,填充柱长径比为20,洗脱速率为1mL/min。     

树脂对楸灵素吸附与洗脱特性的影响

以含有楸灵素的楸树内生真菌FSN002发酵液为原料, 采用静态实验法考察树脂对楸灵素的吸附过程, 建立树脂吸附动力学模型, 并通过模型分析定量研究各种树脂对楸灵素吸附与洗脱特性的影响. 结果表明, 树脂对楸灵素的吸附过程符合一级动力学模型, 其中反相树脂对楸灵素的最大吸附能力平均为39.39 mg/mL, 是离子交换树脂的1.38倍; 反相树脂吸附的楸灵素不易洗脱, 平均洗脱收率为12.2%, 离子交换树脂的平均洗脱收率为46.6%, 其中阴离子交换树脂D201的楸灵素洗脱收率最高达83.0%, 吸附速率较快, 综合性能较好.     

离子交换法提取α—酮基—L古龙酸的研究

用离子交换法对发酵液中维生素Ｃ中间体α－酮基－Ｌ－古龙酸的提取工艺进行了研究，系统筛选，研究了四种大孔弱碱性阴离子交换树脂对ＫＧＡ的静态和动态吸附性能以及影响因素，并对洗脱条件进行了探索，实验结果表明，Ｅ５树脂对发酵液中ＫＧＡ的提炼是切实可行的。     

离子交换法提取α－酮基－L－古龙酸的研究

用离子交换法对发酵液中维生素Ｃ中间体α－酮基－Ｌ－古龙酸（ＫＧＡ）的提取工艺进行了研究。系统筛选、研究了四种大孔弱碱性阴离子交换树脂对ＫＧＡ的静态和动态吸附性能以及影响因素，并对洗脱条件进行了探索。实验结果表明，Ｅ５树脂对发酵液中ＫＧＡ的提炼是切实可行的。     

从米糠中制取高纯度肌醇新工艺研究

研究了以米糠为原料,用离子交换树脂提纯制取高纯度肌醇的新工艺.与沉淀法相比,产品质量好,操作工艺简单:用717阴离子交换树脂直接吸附米糠酸浸液中的植酸,树脂经5%氢氧化钠溶液洗脱后,洗脱液在植酸盐浓度为20%,压力为1.5 MPa的条件下水解7～8 h,过滤并通过701、732阴阳离子交换树脂脱除色素及无机盐后结晶得到高纯度肌醇.其纯度为99.3%,熔点225～226℃,肌醇收率以米糠计为1.34%.     

液态发酵生产衣康酸的条件研究

以菌株土曲霉Aspergillus terreus液态发酵生产衣康酸,进行碳源、氮源和镁铁盐、磷酸二氢钾含量与衣康酸的产率关系的研究.实验结果表明:在37℃下,180r/m的恒温振荡器中连续培养5d,其发酵培养的最适宜的培养基组成为:葡萄糖为碳源,含量为5g;NH4NO3为氮源,含量为0.2g;MgSO4.7H2O能够促进菌体生长和发酵产酸,其含量为0.16g;FeSO4.7H2O为0.004g及KH2PO4为0.006g.此时,衣康酸的产率最高达4.5%.     

赖氨酸为限制性氨基酸的杂交骨髓瘤细胞生长动力学模型

影响动物细胞培养的因素众多,其中氨基酸的影响不可忽略.实验发现,在杂交骨髓瘤细胞培养过程中,赖氨酸是限制性氨基酸,故建立了考虑该限制性氨基酸的杂交骨髓瘤细胞非结构动力学模型.模型将赖氨酸区分为胞内赖氨酸及胞外赖氨酸,并且认为对细胞生长产生影响的是胞内赖氨酸的浓度.仿真结果表明,在此基础上完成的动力学模型能较好地描述动物细胞生长过程.     

超滤去除L-乳酸发酵液中蛋白的工艺研究

采用超滤技术从L-乳酸发酵液中分离去除蛋白,研究了超滤过程中的操作压力、操作温度、超滤液的体积和料液初始浓度等主要因素,对膜通量和发酵液中蛋白质及乳酸钙2种主要组分截留率的影响;并确立了采用聚砜膜去除乳酸中蛋白工艺的最佳参数,在此条件下,蛋白质去除率达到91.5%,乳酸钙损失为2%。     

Y-152和K-156在果蝇ADH催化中的作用

果蝇醇脱氢酶酪氨酸－１５２（Ｙ－１５２）和赖氨酸－１５６（Ｋ－１５６）处于同类脱氢酶的保守位点。经人工定点突变和酶动力学分析,前者的苯丙氨酸（Ｙ１５２Ｆ）、组氨酸（Ｙ１５２Ｈ）和谷氨酸突变体（Ｙ１５２Ｅ）及后者的异亮氨酸突变体（Ｋ１５６Ｉ）均丧失催化活性。而半胱氨酸－１５２（Ｙ１５２Ｃ）及精氨酸－１５６（Ｋ１５６Ｒ）突变体活性分别是对应野生型的０．２５％和２．２％。此外,Ｙ１５２Ｃ和Ｋ１５６Ｒ的Ｋ     

产共轭亚油酸乳酸菌的选育和鉴定

采用紫外分光光度法测定共轭亚油酸的含量,从13株实验室保存的乳酸菌中筛选出8株具有转化亚油酸生成共轭亚油酸能力的菌株.其中As1.2686产量最高,发酵液中共轭亚油酸含量达到13.63 mg/L;其次是菌株B11693,共轭亚油酸产量为11.55 mg/L.选择B11693做进一步的菌种鉴定,将传统的形态学、生理生化鉴定方法和细菌16SrDNA分子生物学鉴定方法相结合,鉴定菌株B11693为短乳杆菌.     

反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定丙酮酸发酵液中丙酮酸

提出一种利用反向高效液相色谱法(RP-HPLC)测定丙酮酸发酵液中丙酮酸的方法。应用反相C18色谱柱 ODS-2 HYPERSIL 250 mm×4．6 mm 5μm,以0．05 mol·L-1NH4H2PO4(用H3PO4调pH2．6)为流动相,发酵液经稀硫酸预处理后直接进样分离定量,每一样品的分析过程不超过5 min,可及时了解丙酮酸发酵过程中丙酮酸的变化,适于发酵液中丙酮酸的检测。     

发酵液中透明质酸含量测定方法的比较研究

比较了Bitter-Muir法和CTAB浊度法用于测定透明质酸质量浓度的准确度和精确度,发现在没有杂质的情况下,二者都适用于透明质酸浓度的测定.研究了葡萄糖、蛋白质、无机盐和酵母膏等发酵液成分对2种测量方法的影响,结果表明,这些物质对Bitter-Muir法存在较大影响,而对CTAB浊度法的干扰较小.CTAB浊度法的操作简便快捷,发酵液无需预处理即可直接测定.     

The complete biosynthesis of the genetically encoded amino acid pyrrolysine from lysine

Pyrrolysine, the twenty-second amino acid found to be encoded in the natural genetic code, is necessary for all of the known pathways by which methane is formed from methylamines. Pyrrolysine comprises a methylated pyrroline carboxylate in amide linkage to the ε-amino group of L-lysine. In certain Archaea, three methyltransferases initiate methanogenesis from the various methylamines, and these enzymes are encoded by genes with an in-frame amber codon that is translated as pyrrolysine. Escherichia coli that has been transformed with the pylTSBCD genes from methanogenic Archaea can incorporate endogenously biosynthesized pyrrolysine into proteins. The decoding of UAG as pyrrolysine requires pylT, which produces tRNA(Pyl) (also called tRNA(CUA)), and pylS, which encodes a pyrrolysyl-tRNA synthetase. The pylB, pylC and pylD genes are each required for tRNA-independent pyrrolysine synthesis. Pyrrolysine is the last remaining genetically encoded amino acid with an unknown biosynthetic pathway. Here we provide genetic and mass spectrometric evidence for a pylBCD-dependent pathway in which pyrrolysine arises from two lysines. We show that a newly uncovered UAG-encoded amino acid, desmethylpyrrolysine, is made from lysine and exogenous D-ornithine in a pylC-dependent process followed by a pylD-dependent process, but it is not further converted to pyrrolysine. These results indicate that the radical S-adenosyl-L-methionine (SAM) protein PylB mediates a lysine mutase reaction that produces 3-methylornithine, which is then ligated to a second molecule of lysine by PylC before oxidation by PylD results in pyrrolysine. The discovery of lysine as the sole precursor to pyrrolysine will further inform discussions of the evolution of the genetic code and amino acid biosynthetic pathways. Furthermore, intermediates of the pathway may provide new avenues by which the pyl system can be exploited to produce recombinant proteins with useful modified residues.     

添加氨基酸替代生长猪日粮中部分粗蛋白质效果的研究

试验设置对照、赖+蛋氨酸两个体系,对照体系设置1个对照组,根据氨基酸添加量,赖+蛋氨酸体系设置高、中、低3个水平组,共4个组.试验各组均在对照组基础上取代2.0%的日粮粗蛋白质.试验猪为杜大长三元杂交商品猪,按随机区组设计分为4组,每组8头,公母各半.根据增重、料肉比、单位增重饲料成本等指标综合评定试验结果.结果表明:在本试验设置范围内,添加赖+蛋氨酸可以替代日粮中部分粗蛋白质,科肉比与单位增重饲料成本较对照组有明显改善;并综合评定出低水平赖+蛋氨酸组为3个试验组中最佳效果组.     

钼对红霉素生物合成的影响

在利用糖多孢红色链霉菌HB发酵生产红霉素的过程中,于48 h向发酵液中加入钼酸钠,通过对代谢途径关键调控酶活力的测定以及运用高效液相色谱法对发酵液中相关有机酸含量的测定,结论显示:当发酵液中钼酸钠的加入量为0.056 g/100 mL时,部分代谢流向有利于红霉素生物合成的方向迁移,在一定程度上提高了红霉素的生产速率和产量.