苦参碱与人血浆蛋白结合率的分析测定

采用超滤法结合高效液相色谱法测定苦参碱与人血浆蛋白的结合率.血浆超滤液经二氯甲烷溶剂萃取后,以0.1%磷酸溶液(含0.1%三乙胺)-乙腈(体积比为93∶7)为流动相,槐定碱为内标,检测波长220nm下测定苦参碱.苦参碱在0.2~15.0μg/mL范围内线性关系良好,平均回收率为86.2%,日内、日间精密度均小于10%.超滤法结果表明,苦参碱在不同浓度下的血浆蛋白结合率为17.2%~23.1%,蛋白结合常数为(8.838±0.964)×103 L/mol.苦参碱与人血浆蛋白结合较弱,结合率在测定浓度范围呈浓度依赖性.     

香叶木苷的血浆蛋白结合率研究

研究香叶木苷的血浆蛋白结合率．以体外方式，用平衡透析法模拟香叶木苷在大鼠体内与血浆蛋白结合的过程，并以高效液相色谱法测定香叶木苷在透析袋内血浆中的药物质量浓度与透析袋外缓冲液中的质量浓度，计算血浆蛋白结合率．香叶木苷在血浆中药物质量浓度为1～90μg／mL范围内，其与大鼠血浆蛋白的结合率范围为29．83％～32．56％，波动较小，结果可靠．香叶木苷属于低血浆蛋白结合率药物，大部分药物分子以游离形式发挥药效．     

黄柏碱血浆蛋白结合率的分析测定

药物-血浆蛋白结合率是药动学研究的重要参数,通过超滤法结合高效液相色谱法测定了黄柏碱与血浆蛋白的结合率.含药血浆经超滤法得超滤液,以C18为固定相,乙腈-0.3%冰醋酸-三乙胺(体积比为20:80:0.5,其中0.3%为体积分数)为流动相,284nm检测波长下测定超滤液中黄柏碱.黄柏碱在0.20~20.00mg·L~(-1)质量浓度范围内线性关系良好,相关系数r为0.999 8,日内、日间精密度均小于2.5%.超滤法结果表明黄柏碱在不同浓度下的血浆蛋白结合率为26.45%~34.05%,蛋白结合常数为(1.214±0.132)×10~4 L/mol.     

蓬子菜中活性成分DXG大鼠血浆蛋白结合率测定

考察蓬子菜中活性成分DXG在大鼠血浆中的蛋白结合情况.采用平衡透析法测定DXG的大鼠血浆蛋白结合率.建立DXG透析外液和透析内液的HPLC测定方法,求得高、中、低不同质量浓度下,DXG的血浆蛋白结合率分别为29.39%,29.85%,32.94.该方法专属性强,灵敏度高,符合生物样品测定要求要求.DXG的大鼠血浆蛋白结合率较低,且不具有质量浓度依赖性.     

HPLC法测定酒石酸溴莫尼定滴眼液中苯扎氯铵含量

目的:建立高相液相色谱法测定酒石酸溴莫尼定滴眼液中苯扎氯铵含量的方法。方法:采用十八烷基键和硅胶为填充剂;以0.01mol/L的乙酸铵(用冰醋酸调pH至5.0±0.2)-乙腈(50:50)为流动相;检测波长为262nm;流速为1.5ml/min;柱温40℃;进样量20μL。结果:苯扎氯铵在1.7∽75μg/ml范围内呈良好的线性关系(R=0.9999);苯扎氯铵的检测限为8.2ng,定量限为20.6ng;苯扎氯铵的平均回收率在100.1%(n=9),RSD=0.9%。结论:该方法简单、准确、可靠,能够有效控制酒石酸溴莫尼定滴眼液中苯扎氯铵含量。     

LC_MS_MS法测定木通皂苷D大鼠灌胃给药的生物利用度

建立高效液相色谱-质谱联用法(LC-MS/MS)测定大鼠灌胃给药的生物利用度.大鼠随机分为2组,分别尾静脉和灌胃给予100mg·kg-1木通皂苷D,于不同时间点眼眶取血,用LC-MS/MS法检测血浆中药物质量浓度,计算大鼠灌胃给药的生物利用度.结果表明:木通皂苷D线性范围为10~1 000ng·mL-1,最低定量限为10ng·mL-1.准确度与精密度试验结果显示方法日间、日内变异均小于15%,相对偏差为-2.8%~4.6%,低、中、高3个质量浓度提取回收率为95.3%~108.1%.静脉组和口服组的药时曲线下面积AUC0-INF分别为(231 725.98±46 527.21)和(383.63±54.62)ng·h·mL-1,灌胃给药的绝对生物利用度为0.13%.表明木通皂苷D大鼠灌胃给药生物利用度很低.     

丁香苦苷血浆蛋白结合率的测定

测定丁香苦苷的血浆蛋白结合率.采用超速离心法除掉血浆蛋白,高效液相色谱法对高、中、低剂量给药后的丁香苦苷血药质量浓度进行测定.高、中、低剂量丁香苦苷的血浆蛋白结合率分别为50.81%,56.92%,57.28%.丁香苦苷血浆蛋白结合率不具有质量浓度依赖性,不易引起具有药理作用的游离型血药质量浓度发生明显变化,保证丁香苦苷临床用药有较好的安全性.     

HPLC法测定血浆及尿液中阿普唑仑浓度

采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),以甲醇-水(60¨40)为流动相,流速1.0ml/min,检测波长254nm,建立高效液相法(HPLC)测定血浆及尿液中阿普唑仑浓度。结果表明,HPLC法测定阿普唑仑和内标物的出峰时间是5.1min和8.73min,分离效果较好;阿普唑仑质控3种浓度(4.0μg/ml,8.0μg/ml,16.0μg/ml)日内和日间的RSD,血浆样品均小于6%,尿样均小于7%,血浆回收率为91.15%～93.69%,尿回收率为86.79%～90.11%,血浆及尿样品线性范围为2.0～64.0μg/ml,相关系数为0.9907。血浆和尿样品中阿普唑仑的最低检出限为2.0μg/ml。此条件可以对中毒药物阿普唑仑进行快速检测并定量,方法简便,准确。     

微波消化石墨炉原子吸收法测定配方食品中的钼

本文阐述了采用微波消化测定配方食品中微量的钼。用硝酸高压溶解,然后用石墨炉原子吸收测定。方法的检出限0.7 ng/ml,线性范围0~100 ng/ml,其回收率为95.1%~104.8%。该方法填补了配方食品中检测钼的空白,精密度高,检出限低。     

一种新的催化光度法测定痕量铁

本文基于在碱性介质中,活化剂硫氰酸钾存在下,痕量Fe对H_2O_2氧化铬黑T的褪色反应的催化作用建立了一个检出限为3.9×10~(-11)g/ml,线性范围为0.80～31.92ng/ml的催化光度测定铁的新方法。用于人发、水样中痕量铁的测定,R.S.D为1.3～2.0%,回收率为96～98.5%。     

EGF、IGF-Ⅰ对牛卵母细胞体外成熟的影响

在牛卵母细胞体外成熟培养液中添加不同量的EGF、IGF-Ⅰ,观察其对牛卵母细胞体外成熟的影响并确定成熟液中添加这两种生长因子的最佳浓度.在卵母细胞成熟培养液中分别添加1 ng/m l、10 ng/m l、50 ng/m l、100 ng/m l、200 ng/m l的EGF,10 ng/m l、50 ng/m l、100 ng/m l、150 ng/m l、200 ng/m l的IGF-Ⅰ,分析成熟培养22 h后的卵母细胞成熟率.发现添加有EGF实验组的成熟率分别是36.73%、42.18%、56.18%、53.67%、56.50%,同对照组相比都较对照组的成熟率(34.04%)高,且50 ng/m l、100 ng/m l、200 ng/m l实验组的成熟率同对照组差异显著(P<0.05).IGF-Ⅰ实验组的成熟率分别是38.46%、46.94%、58.73%、55.00%、58.70%,50 ng/m l、100 ng/m l、150 ng/m l、200 ng/m l都较对照组的成熟率(38.60%)要高,100 ng/m l、150 ng/m l、200 ng/m l实验组同对照组相比差异显著(P<0.05).将50 ng/m l的EGF、100 ng/m l的IGF-Ⅰ共同添加在成熟培养液中得到的成熟率为75.00%,同对照组(36.54%)相比差异极显著(P<0.01).在牛卵母细胞体外成熟培养液中添加EGF、IGF-Ⅰ会提高卵母细胞的成熟率,并且随着浓度的增加,这种作用将达到饱和,其最佳作用浓度为50ng/m l EGF、100 ng/m l IGF-Ⅰ.     

LC—MS法测定人血浆中米氮平浓度及应用

研究了液相质谱联用仪（LC—MS）测定人血浆中米氮平浓度的方法。在碱性条件下用乙酸乙酯提取,以盐酸苯海拉明为内标。采用XDB—C18反相柱（5μ）,质谱检测器采用AP—ESI,正离子模式,采集方式为SIM。流动相为甲醇-水（含0．1％醋酸和0．2％醋酸铵）（70：30,v／V）。在上述条件下米氮平在0．4～150ng／mL范围内线性关系良好,提取回收率大于75％,重现性相对标准差（RSD）均小于10％,检测限为0．4ng／mL。结果表明,该法方便、准确、灵敏,适用于米氮平片剂的药代动力学研究,也可以用于临床测定米氮平血浆药物浓度。     

双光道氢化物发生-原子荧光光谱法同时测定污水中的砷和汞

目的：为了建立一种同时快速测定污水中砷,汞的方法以提高工作效率。方法：采用湿法消解一氢化物发生一原子荧光光谱法同时测定污水中的砷,汞,并用于实际样品的测定。结果：砷在0～40ng／mL的范周内线性良好,相关系数r=0.9998,检出限0.09ng／mL,相对标准偏差4.2％（n=11）,回收率为92.9％～101.9％;0～4ng／mL的范围内线性良好,相关系数r=0.9998,检出限0.0078ng／mL,相对标准偏差1.9％（n=11）回收率90.8％～101.4％。结论：方法吴有简便,快速,准确的优点,应用于污水中砷,汞的检测,结果能满足要求。。     

LC-MS/MS法测定人血浆中克拉霉素的质量浓度

建立高效液相色谱-质谱联用法（LC-MS/MS）测定人血浆中克拉霉素的浓度.选用Shim-park VP-ODS色谱柱,以乙腈、φ=0.1%氨水、φ=0.4%甲酸乙腈溶液为流动相,采用梯度洗脱进行分离,样本经乙腈沉淀后进样,选用3200QTRAP型质谱仪的多重反应监测（MRM）扫描方式进行检测.克拉霉素质量浓度线性范围为5～1 000ng.mL-1,定量下限为5ng.mL-1,检测限为0.05ng.mL-1.准确度与精密度结果显示方法日间、日内变异均小于15%,相对偏差为-3.43%～2.97%,低、中、高3个质量浓度提取回收率为91.73%～107.73%,稳定性好.本研究所建立的方法快速、灵敏、专属性强、重现性好,可用于人体血浆中克拉霉素质量浓度的测定和药代动力学研究.     

Enantioselective assay of S（＋）－ and R（－）－propafenone in human urine by using RP－HPLC with pre－column chiral derlvatization

The enantioselective assay for S(+)- and R(-)-propafenone (PPF) in human urine that developed in this work involves extraction of propafenone from human urine and using S(+)-propafenone as internal standard, chiral derivatization with 2,3,4,6-tetra-O-beta-D-glucopranosyl isothiocyanate, and quantitation by an RP-HPLC system with UV detection (lambda=220 nm). A baseline separation of propafenone enantiomers was achieved on a 5-microm reverse phase ODS column, with a mixture of acetic acid (25:12:0.02,v/v) as mobile phase. There was good linear relationship from 24.9 ng/ml to 1875.0 ng/ml for both of enantiomers. The regression equations of the standard curves based on C(S-PPF) (or C(R-PPF)) versus ratio of A(S-PPF)/A(S) (or A(R-PPF)/A(S)) were y=0.0032x-0.081, (r=0.999) for S-PPF and y=0.0033x+0.0039, (r=0.998) for R-PPF, respectively. The method's limit of detection was 12.5 ng/ml for both enantiomers, and the method's limit of quantitation was 28.2+/-0.52 ng/ml for S-PPF, 30.4+/-methanol:water:glacial 0.53 ng/ml for R-PPF (RSD<8%, n=5). The analytical method yielded average recovery of 98.9% and 100.4% for S-PPF and R-PPF, respectively. The relative standard deviation was no more than 6.11% and 6.22% for S-PPF and R-PPF, respectively. The method enabled study of metabolism of S(+)- and R(-)-propafenone in human urine. The results from 7 volunteers administered 150 mg racemic propafenone indicated that propafenone enantiomers undergo stereoselective metabolism and that in the human body, S(+)-propafenone is metabolized more extensively than R(-)-propafenone.     

溴酸钾氧化藏红T动力学荧光法测定痕量溴离子

基于稀磷酸介质，痕量溴离子对溴酸钾氧化藏红Ｔ反应的抑制作用，建立了测定痕量溴离子的新动力学荧光法．方法检出限为０．５ｍｇ／ｍｌ．线性范围为０．８３－６７ｍｇ／ｍｌ，用于镁条和化学试剂中痕量溴离子的测定，结果满意．     

Effect of leptin on oocyte maturation and subsequent pregnancy rate of cloned embryos reconstructed by somatic cell nuclear transfer in pigs

Cloning pigs by somatic cell nuclear transfer （SCNT） has wide applications in basic research, human medicine and agricultural production. To improve cloning efficiency, the effect of two basic maturation media, NCSU-23 and TCM199, was compared, and TCM199 was selected for the following experiments with leptin. We systematically studied the effects of leptin supplementation on oocytes in vitro maturation （IVM）, in vitro development of parthenogenetically activated （PA） and SCNT embryos and in vivo development of SCNT embryos after embryo transfer （ET）. The results showed that supplementation of 100 or 200 ng/ml leptin into the maturation medium did not greatly affect nuclear maturation of oocytes, or cleavage rates of PA and SCNT （P 〉 0.05）. Blastocyst rates of PA and SCNT embryos were significantly improved when 100 or 200 ng/ml leptin was added to maturation medium, and the number of cells in PA blastocysts was also improved （P 〈 0.05）. The number of cells in blastocyst of SCNT was improved, when 100 ng/ml leptin was added （P 〈 0.05）. Furthermore, supplementation of 100 or 200 ng/ml leptin to the IVM medium may improve pregnancy rate and the delivery rate inpig cloning.     

用比布列西猩红共振光散射技术测定蛋白质

在酸性溶液中，比布列西猩红与蛋白质作用，产生共振光散射(RLS)增强光谱，最大散射峰位于286．0nm，且增强RLS强度在一定范围内与蛋白质浓度呈线性关系．研究了pH、比布列西猩红的浓度及离子强度对RLS强度的影响．人血清白蛋白(HSA)的线性范围为0.02～4．0μg／mL，牛血清白蛋(BSA)0．02-4．5μg／mL，溶菌酶(Lys)为0．02-2．0μg／mL，γ-球蛋白(γ-IgG)为0.0l-7.5μg／mL.测定的检测限(3σ)分别为：16．6ng／mL(HSA)，15．7ng／mL(BSA)，16．7ng／mL(Lys)和7．5ng／mL(γ-IgG)．此方法用于人血清样品测定，结果满意．