地黄脱毒技术研究与应用

建立了地黄的脱病毒技术与工厂化生产技术，研究表明：地黄茎段培养适宜的消毒剂为0．05％HgCl2水溶液，消毒时间为8min～10min；诱导茎尖适宜的激素种类为6-BA，用量0．25mg／L；地黄试管苗工厂化生产的培养基配方为MS＋1／4大量元素＋1／2微量元素＋1／2白砂糖，可使成本降低48．7％．田间应用结果表明：脱毒地黄的光合速率、蒸腾速率及块茎膨大速度较对照明显增加，表现趋势为试管苗〉原原种苗〉原种苗〉对照苗。     

PP333对怀地黄种质离体保存的影响

研究了PP333对怀地黄"85-5"脱毒苗离体保存的影响.结果表明:适宜浓度PP333(1~2 mg.L-1,单位下同)可以延缓脱毒苗的生长速度,延长其保存时间,减少其继代次数;高浓度PP333(4~8)对其生长产生毒害作用,不利于种质保存.适宜怀地黄脱毒苗离体保存的培养基为MS+NAA0.02+6-BA0.2+PP3331,在该培养基上保存180 d后,存活率达68%,恢复培养时生长正常,成活率达100%.     

甘薯脱毒快繁技术及推广

甘薯又名白薯、红薯、山芋、红芋等,旋花科甘薯属植物,种植历史悠久,区域广泛,全国种植面积仅次于水稻、小麦和玉米,居第4位。我省种植面积约70万公顷,是甘薯种植大省之一。甘薯属高产作物,适应性广,抗灾害能力强,在粮食、饲料、工业原料、医疗保健等方面用途广泛,在国民经济中占有举足轻重的地位。     

重庆市主栽优良甘薯品种的茎尖培养脱毒研究

选用重庆市大面积推广的优良甘薯品种进行茎尖脱毒离体培养试验，结果表明：对来源于薯块萌发芽的茎尖进行组织培养，其成苗率最高，达53.2％；连续两次进行茎尖培养可明显增强脱毒效果；对于甘薯病毒病的检测，反转录PCR法（RT-PCR）比硝化纤维素膜酶联免疫吸附检测法（NCM-ELISA）更灵敏和可靠。     

怀地黄HPLC指纹图谱研究

目的:建立并比较怀地黄不同栽培品种HPLC指纹图谱,为强化怀地黄质量控制和品种鉴定与划分建立图谱标准.方法:采用HPLC,以0.4%醋酸溶液和乙腈进行梯度洗脱,检测波长为260nm;柱温:30℃;流速:1mL/min.使用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"进行数据处理,对不同栽培品种怀地黄的HPLC指纹图谱进行了相似度和聚类分析.结果:获得了HPLC优化技术条件;建立了含有18个特征指纹峰的怀地黄HPLC化学对照指纹图谱;9个农家品种划分为2大类,又可细分为4类.结论:该图谱可作为怀地黄质量控制的标准图谱,为怀地黄的质量控制、品种鉴别及划分提供理论和技术支撑.     

怀地黄不同品种花粉形态的扫描电镜观察

利用扫描电镜观察了14个品种怀地黄[Rehmannia glutinosa f.hueichingens-is(Chan et Sehih)Hsiao]的花粉形态.结果表明:花粉均为单粒花粉,呈长圆形至长矩圆形,大小为40.2~46.9μm,具3个萌发孔,网状纹饰,网眼明显;根据花粉形状可将其分为3类:(1)长方形或近长方形(2)椭圆形或近椭圆形(3)梭形.研究表明,花粉特征,特别是花粉的形态特征,在怀地黄不同品种间具有的可见变异,它们在分类学上的价值应予以关注.     

草莓的脱毒培养技术

本文研究了草莓的脱毒培养技术,对于国内外已采用的两种培养方法进行了改进和提高,并且得到了批量的脱毒苗投入生产应用。     

怀地黄多糖的含量测定

采用苯酚 硫酸比色法对怀地黄的中性多糖进行含量测定 ,测定波长 483nm ,多糖换算因子f=2 .332 ,测得多糖含量为 6 .5 9%。     

怀地黄不同品种块根显微结构与糖分含量的比较研究

采用石蜡切片和分光光度计对不同品种怀地黄块根的显微结构和糖分含量进行了研究,并用SPSS 10.0软件分析了两者之间的相关性.结果表明,怀地黄不同品种块根的显微结构差异明显,且还原糖含量的差异达到了显著水平.块根中还原糖含量、总糖含量均与块根各解剖结构特征呈正相关关系.     

怀地黄不同品种根部特征和有效成分含量比较

以怀地黄6个栽培品种为材料,初步探讨了怀地黄不同品种的根部性状和品质性状.在相同的栽培条件下,测量了怀地黄6个主流栽培品种的块根外观性状,利用石蜡切片法观察并测量不同品种块根的解剖结构,微量元素和梓醇含量的测定分别用荧光光度计和高效液相色谱法.结果表明怀地黄不同品种梓醇含量、单株块根鲜重和块根中木质部的面积都有明显差异,梓醇含量和块根中木质部的比例呈显著正相关.     

发根农杆菌T-DNA诱变怀地黄突变体或品系的遗传学分析

主要采用紫外吸收光谱法、高效液相色谱法、3,5-二硝基水杨酸比色法,PCR和SRAP技术,从叶绿素含量、还原糖和总糖含量、梓醇含量、毛蕊花糖苷含量和T-DNA片段的稳定性和基因组DNA的变化方面,对发根农杆菌转化怀地黄突变体或品系的变异性状进行了分析.发现怀地黄突变体或品系的叶片形态、植高、叶绿素含量、糖含量、梓醇和毛蕊花糖苷的含量均有变异,一个SRAP引物组合从其基因组DNA中扩增出一个对照中没有的约400bp的DNA片段,T1-T7代突变体或品系中均检测到rolB基因的存在.这些结果表明发根农杆菌T-DNA可以诱导怀地黄产生变异,并且稳定遗传.     

怀地黄85-5品种内遗传多样性的RAPD和ISSR分析

采用CTAB法提取了怀地黄85-5品种16个单株的基因组DNA,使用紫外分析和琼脂糖凝胶电泳检测其纯度和大小,利用RAPD及ISSR分析其品种内遗传多样性.从24个RAPD引物和43个ISSR引物中分别筛选出具有稳定多态性条带的RAPD引物3个和ISSR引物2个,分别对16个单株基因组DNA进行PCR扩增.3个RAPD引物共扩增出7条带,其中多态性条带为4个,多态性比率为57.14%.2个ISSR引物共扩增出17条带,其中多态性条带为11个,多态性比率为64.7%.结果表明,怀地黄85-5品种内存在遗传差异,但遗传多样性比地黄品种间的低.     

大叶白麻的离体培养及植株再生的研究

在附加激素的MS培养基上,培养大叶白麻消毒茎切断,诱导产生愈伤组织和丛生芽。经过继代培养,建立了大叶白麻无性繁殖系,实验结果表明:1)培养基MS+6BA1mg/L+NAA2mg/L愈伤组织诱导,MS+6BA1mg/L+NAA0.2mg/L及MS+6BA2mg/L诱导外殖体产生丛生芽和继代培养,1/2+IAA0.2mg/L诱导生根效果最好。     

高效液相色谱法测定蒙古黄芪中黄芪甲苷含量

确立了蒙古黄芪中黄芪甲苷含量的高效液相色谱测定方法(HPLC),色谱柱:C18(150×4.6mm,5μm)流动相为乙腈:水:磷酸=1:2:0.1,流速为1.20mL/min,检测器:紫外检测波长200nm,结果表明此方法测定蒙古黄芪中黄芪甲苷含量是可行的     

异翅独尾草蒽醌类成分的提取工艺

研究了超声波技术对异翅独尾草蒽醌类成分提取率的影响,并与传统方法作比较。结果表明,以70%乙醇为溶剂,采用超声波强化提取10min对总蒽醌的提取率与乙醇回流3次（每次30min）效果相当。乙醇浓度、提取温度对总蒽醌的提取有显著影响。最佳提取工艺为异翅独尾草用16倍量、90%乙醇在60℃下提取15min。     

组培条件对油樟试管苗玻璃化的影响

研究了外植体年龄、处理方式对油樟试管苗玻璃化的影响及封口膜的透气性和培养基中不同浓度的蔗糖、琼脂、细胞分裂素（BA）浓度等因素对油樟试管苗玻璃化的影响．结果表明,以当年生带芽茎段为外植体玻璃化苗少,污染少;玻璃化苗的数量随着糖分及琼脂浓度的降低、BA浓度的增加而加重;封口膜的透气性与油樟苗的玻璃化关系不大．通过在培养基中适当调整蔗糖、琼脂、BA的浓度,可有效地控制油樟玻璃化苗数．