成都麻羊MyoG基因的克隆与测序分析

根据猪MyoG基因的部分序列和绵羊MyoG mRNA设计引物,以成都麻羊、金堂黑山羊、白玉黑山羊和高原型藏山羊基因组为模板,应用PCR技术克隆测定MyoG基因序列．序列分析结果表明,成都麻羊MyoG基因长1957bp,由3个外显子和2个内含子组成,其中外显子Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的大小分别为398bp、82bp、122bp．内含子Ⅰ和内含子Ⅱ的大小分别为765bp和589bp．成都麻羊MyoG基因序列与金堂黑山羊、白玉黑山羊和高原型藏山羊的MyoG基因序列进行比对,同源性分别为99．9％、99．7％和99．3％,而它们氨基酸序列的同源性都为100％．这为进一步研究成都麻羊MyoG基因的表达、生物学活性和应用奠定了一定基础．     

成都麻羊的保种与利用

成都麻羊是优良地方山羊品种,对我国山羊品种的改良和新品种培育起了重要作用,尚需对其进行保种和利用研究．根据当代动物保种模式（活体保种、冻精冻胚保存、体细胞保存和分子标记辅助保存）,结合成都麻羊的现状,以活体保种和利用为宜．在成都麻羊主产区,对丘陵型和山地型成都麻羊开展本品种选育,建立三级繁育体系,加强饲养管理,不断提高品种的生产性能,向市场推广优秀种羊,在成都麻羊非主产区,引入波尔山羊作控制性试验,引入波尔山羊产肉性能高的基因,既能保留成都麻羊肉质细嫩、味鲜可口、膻味轻、板皮品质好和适应当地生态条件等优良基因,又能克服波尔山羊肌纤维较粗的缺点,以不断提高成都麻羊产肉力,达到保种、提高和利用的目的．     

成都麻羊的生长速度研究

采用常规方法,测定成都麻羊在不同生长阶段的体重、体尺,以探讨其生长速度.结果表明:初生公羔体重为1.80±0.42kg,母羔为1.54±0.27kg;2月龄断奶公羔重为8.89±1.80kg,母羔为8.53±1.91kg;6月龄公羊重为17.40±5.80kg,母羊为18.50±5.84;12月龄公羊体重为28.32±1.81kg,母羊为26.22±4.52kg;3岁公羊体重为51±3.48kg,母羊为36.2±5.98kg;哺乳期日增重公羊111.33g,母羊为74.50g;2~6月龄公羊日增重为45.90~109.50g,母羊为73.30~116.20g;6月龄体重公羊占成年体重的34.05%以上,母羊51.10%以上;12月龄体重公羊占成年体重的55.42%,母羊72.43%;6月龄公羊体尺指标占成年的76.67%,母羊占74.76%;12月龄公羊体尺指标为成年的84.07%以上,母羊为80.46%;6月龄母羊胴体重7.00±0.41kg,屠宰率为43.20%;成年母羊胴体重13.41±3.38kg,屠宰率为47.20%.     

成都麻羊屠宰性状测定

通过对成年成都麻羊母羊(n=14)和六月龄母羊(n=5)的屠宰性状测定,结果显示,成年成都麻羊母羊宰前活重为31.31±2.10kg,胴体重为14.68±1.52kg,屠宰率为51.36±2.24%,净肉重为12.15±1.32kg,净肉率为38.8±1.49%.六月龄母羊的宰前活重为16.20±0.43kg,胴体重为7.00±0.41kg,净肉重为5.2±0.32kg,屠宰率和净肉率分别为43.20±1.32%和32.10±1.02%.成年成都麻羊宰前活重与胴体重和净肉重的回归方程分别为y1=0.271x 5.288和y2=0.132x 5.812.     

成都麻羊的生态地理分布及其生态类型

采用实地调查和生态地理比较等方法,研究成都麻羊的生态地理分布及其生态类型.结果表明,成都麻羊2007年存栏数量30多万只,主要分布在东经102°15′～104°30′,北纬30°15′～31°40′范围的生态地区.成都麻羊有两个生态类型,即丘陵型和山地型.两个生态类型的成都麻羊分布地区的自然生态条件、体格大小和生产性能等均有较大差异.丘陵型成都麻羊体格较大,体尺体重、产肉性能和繁殖性能均高于山地型成都麻羊.对两个生态类型的成都麻羊,均需要提高饲养水平和加强本品种选育,进一步提高产肉性能.     

成都麻羊血液生化遗传标记的研究

采用ＰＡＧＥ电泳法对成都麻羊的Ｈｂ、Ａｌｂ、Ｔｆ、Ｐｏ、Ａｍ、Ａｋｐ和Ｅｓ七个基因座的等位基因及ＬＤＨ的谱带与活力进行了检测．研究结果显示,成都麻羊的Ｈｂ基因座表现为单态,Ａｌｂ、Ｔｆ、Ｐｏ、Ａｍ、Ａｋｐ和Ｅｓ六个基因座表现出遗传多态性,得出了它们的基因型频率及基因频率;ＬＤＨ电泳显示５条谱带,其活力顺序为ＬＤＨ１＞ＬＤＨ３＞ＬＤＨ２＞ＬＤＨ５＞ＬＤＨ４．对Ａｌｂ、Ｔｆ、Ｐｏ、Ａｍ和Ｅｓ五个基因座上的基因型分布作适合性检验,发现这五个基因座上的基因型频率分布是平衡的．利用Ｈｂ、Ａｌｂ、Ｔｆ、Ｐｏ、Ａｋｐ、Ａｍ和Ｅｓ七个基因座上等位基因频率资料进行遗传变异分析,发现成都麻羊群体内基因纯合度高,杂合度低,遗传变异小．同时还利用Ｈｂ、Ｔｆ二个基因座上等位基因资料,对成都麻羊与国内其它１１个山羊品种（类型、品系）的亲缘关系进行了聚类分析,得出了聚类树系图．     

成都麻羊牧草消化率动态测定

作者研究表明,成都麻羊对牧草中干物质,粗纤维、灰分、粗脂肪、粗蛋白质的消化率,夏季成年母羊分别为78.36％、69.74％、74.06％、55.89％和80.76％,育成母羊分别为82.08％、79.18％、74.88％、57.51％和82.09％,育成公羊分别为83.25％、78.49％、78.84％、64.05％和84.35％;冬季成年母羊分别为66.06％、60.08％、53.04％…、和55.04％,育成母羊分别为64.29％、64.75％、52.05％、…和50.69％,育成公羊分别为69.84％、63.74％、61.36％…和61.81％。其消化率表现出夏季明显高于冬季,育成羊高于成年母羊的规律性。     

成都麻羊瘤胃纤毛虫与其消化代谢的研究

选用１０只装置永久性瘤胃瘘管的雌性成都麻羊．在其放牧条件下，对其瘤胃纤毛虫及瘤胃消化代谢进行了同步研究．研究结果表明：瘤胃纤毛虫的数量及种类，可受瘤胃内环境影响，而纤毛虫又是调控瘤胃消化代谢和内环境的重要因素．     

成都麻羊产乳量及乳的生化遗传特性研究

采用羔羊在每次哺乳前后体重差法测定成都麻羊的产乳量,以M ilk Scan-1340A/B型全自动综合乳质测定仪和聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)等方法,分析成都麻羊乳的生化遗传特性.结果表明,羔羊哺乳期母羊产乳量初产母羊为32.05±1.51 kg,经产母羊为46.15±1.78kg;乳中常规营养成分含量,乳脂58.69±2.71g/L,乳蛋白44.18±2.65g/L,乳糖46.44±3.06g/L,总固形物157.88±2.16g/L;电泳分析显示,乳蛋白组分中酪蛋白占优势(70.04±2.55%);乳上皮粘蛋白MUC I在SDS-PAGE上呈现12种基因型,受B、C、D、E、F和G共6个等位基因的控制,其中,FF为优势基因型,F为优势基因.     

成都麻羊的产肉性能与乳常规营养成分研究

对成都麻羊成年母羊和6月龄母羊进行了屠宰测定,分析了肉和常乳的常规营养成分以及肉氨基酸含量.结果表明,成都麻羊成年母羊宰前活重31.31±2.10kg、胴体重14.68±1.52kg、净肉重12.15±1.32kg、内脂重1.40±0.08kg、屠宰率为51.36±2.24%、净肉率为31.77±4.0%;成都麻羊6月龄母羊宰前活重16.2±0.43、胴体重7.0±0.41kg、净肉重5.2±0.32kg、屠宰率为43.21±1.32%、净肉率为38.81±1.49%、.成年母羊鲜肉常规营养成分含量(%)水份71.44 0.22,粗蛋白20.4±0.04,粗脂肪10.69±0.12,能量7968.90±175.16KJ/kg.成年母羊鲜肉氨基酸含量(mg/100g)氨基酸总量27940.0±550.0、必需氨基酸11035.0±65.0、非必需氨基酸16905.0±495.0;成都麻羊乳常规营养成分含量(g/L)乳蛋白45.8±2.2,乳脂59.3±3.3、乳糖44.0±3.2.     

应用波尔山羊提高成都麻羊产肉性能研究

通过波尔山羊与成都麻羊二元杂交试验，含波血75％、50％和25％的杂种羊，均比成都麻羊的产肉性能有明显的提高。在不同生长发育阶段,含波血75％和50％的杂种羊体尺和体重均极显著大于成都麻羊（P＜0．01）；含波血25％的杂种羊体尺和体重也多极显著大于成都麻羊（P＜0．01）。含波血75％，50％和25％的杂种羊，24月龄公羊体重比成都麻羊相应重30．9kg、25．6kg和3．6kg，分别提高78．6％、65．1％和9．2％，差异极显著（P＜0．01），母羊比成都麻羊相应重21．7kg 17.3kg和4．5kg，分别提高66．6％53．1％和13．8％，差异极显著（P＜0．01）。含波血75％，50％和25％的杂种羊的日增重，在哺乳期公羊比成都麻羊相应重67．4g、66．7g和15g，分别提高59．5％、58．9％和13．2％，母羊比成都麻羊相应重41．7g、50．0g和11．2g，分别提高38．5％、46．2％和10．3％。杂种羊日增重在4月龄内都还明显高于成都麻羊， 特别是含波血75％和50％的杂种羊更为突出，保持高速增重时间长，在周岁内日增重公羊是成都麻羊的2．8倍和3．0倍，母羊相应为2．1倍和2．3倍。杂种羊的繁殖性能与成都麻羊比较差异不大。含波血75％，50％和25％的杂种羊的产肉性能与成都麻羊比较提高非常明显，6月龄羯羊的胴体重分别比成都麻羊重5．9kg、5．0kg和2．5kg，屠宰率相应高8．4、6．4和3．8个百分点，净肉率分别高7．9、6．7和4．0个百分点，差异均极显著（P＜0．01）。     

成都麻羊与四川各地黑山羊品种(群体)mtDNA D-1oop序列多态性研究

采用mtDNA多态性标记对成都麻羊与四川各地黑山羊品种(群体)D-loop序列多态性进行分析.结果表明,供试山羊品种(群体)mtDNA片段长度为16kb左右,mtDNA D-loop片段长度为1210～1212bp,共检测到10种单倍型,群体间共有多态座位83个,单一多态座位23个,简约信息座位24个,平均核苷酸歧异度为0.001510,D-loop序列多态性较贫乏.经聚类,成都麻羊与四川各地黑山羊品种(群体)分为两大类,成都麻羊首先与金堂黑山羊(D=0.203)聚在一起后,再依次与乐至黑山羊(D=0.223)、建昌黑山羊(D=0.477)、白玉黑山羊(D=0.593)形成一大类;合江黑山羊与江安黑山羊(D=0.231)先聚在一起后,再与自贡黑山羊(D=0.337)聚为1类,营山黑山羊与嘉陵黑山羊(D=0.242)聚为1类,2类形成另一大类.最后两个大类聚在一起.聚类结果与供试山羊品种(群体)来源和生态地理分布相一致.     

成都麻羊与四川9个黑山羊品种(群体)乳的生化组成及酪蛋白多态性研究

采用常规方法测定成都麻羊和四川9个黑山羊品种(群体)乳常规营养成分含量;以垂直板电泳经考马斯亮蓝染色分析乳蛋白组成;用碱性尿素电泳法分析酪蛋白多态性.结果表明,成都麻羊乳常规营养成分含量(g/L):乳蛋白为45.77±2.24、乳糖为44.00±3.20、乳脂肪为59.50±3.30.成都麻羊和四川9个黑山羊品种(群体)乳蛋白含量(g/L)范围为41.36～46.37,以营山黑山羊最低(41.36),金堂黑山羊最高(46.37),差异极显著(P<0.01);乳糖含量(g/L)范围为44.00～47.30,以成都麻羊最低(44.00),金堂黑山羊最高(47.30),差异极显著(P<0.01);乳脂含量(g/L)范围为55.45～60.52,以白玉黑山羊最低(55.45),自贡黑山羊最高(60.52),差异极显著(P<0.01).成都麻羊乳蛋白组分含量(%):α-La为5.80±0.61,β-Lg为14.77±0.26,CN为70.04±2.55,IgG为7.31±0.83,SA为2.08±0.23.成都麻羊与四川9个黑山羊品种(群体)乳蛋白组分含量(%)范围:α-La为5.35～5.96,β-Lg为14.46～15.87,CN为68.42～71.01,IgG为7.04～7.34,SA为2.02～2.40.在供试山羊品种(群体)中β-CN呈单态,带型为β-CN(AB);α-CN均呈现:αS1-CN(H),αS1-CN(L)、αS2-CN(CC)和αS2-CN(CD),在建昌黑山羊和白玉黑山羊中,还存在αS2-CN(DD).对αS2-CN遗传多态型与乳常规营养成分含量进行多重比较发现,在建昌黑山羊和白玉黑山羊中,αS2-CN(CC)型和αS2-CN(CD)型乳脂含量显著高于αS2-CN(DD)型的乳脂含量(P<0.05).     

乐至黑山羊催乳素受体基因cDNA克隆及序列分析

根据GenBank中绵羊催乳素受体（PRLR）基因序列（AF041257.1）设计1对引物,以乐至黑山羊脑垂体总RNA为模板,通过RT-PCR技术对乐至黑山羊PRLR基因cDNA克隆测序和序列分析.结果表明：扩增出的乐至黑山羊PRLR基因cDNA序列长为1743bp,编码581个氨基酸.乐至黑山羊与绵羊、牦牛、欧洲牛、野猪和人的核苷酸同源性分别为：98.34％、94.67％、94.27％、77.48％、74.33％.以核苷酸序列构建分子进化树,乐至黑山羊先与绵羊聚为一类,再与欧洲牛和牦牛聚为一类,而后与野猪聚为一类,最后与人聚为一类.     

生物信息学技术克隆并分析新基因STRF7

为进一步研究信号转导相关的新基因片段BE644250,采用生物信息学方法克隆基全长cDNA,并分析了其ORF,电子表达谱,染色体定位等,之后对全长序列进行了实验验证。电子延伸（contig)获得了729bp的延伸产物,含一个典型的74aa的ORF,命名为STRF7。与已知蛋白无明显同源性,部分地相似于人的源框蛋白CDX－4和酵母的转录调节子ADR6,属一新发现的基因;RT－PCR从IL－6刺激后的U937中克隆了STRF7基因,基序列与电子延伸结果安全一致,进一步的分析显示STRF7在多种组织中表达并定位于第6号染色体上,上述结果显示,STRF7是一个新基因,编码含74aa的蛋白,并且是一个潜在的转录因子。