PEG 4000/(NH_4)_2SO_4双水相体系萃取欧李种仁蛋白研究

利用聚乙二醇(PEG)4000/(NH_4)_2SO_4双水相体系萃取欧李种仁蛋白.研究了PEG 4000/(NH_4)_2SO_4双水相体系的体系组成对蛋白分配系数及回收率的影响,最后确定了最佳的双水相萃取体系.在18%的(NH_4)_2SO_4与10%的聚乙二醇构成的双水相体系中,蛋白的分配系数最小为0.495,回收率为92.0%.对体系的最大萃取容量测定结果表明,双水相体系易于放大和进行连续性操作,适用于大规模生产活性蛋白.     

2种盐与PEG4000组成的双水相体系及其对BSA萃取的影响

通过对PEG4000-NaH2PO4和PEG4000-(NH4)2SO4双水相体系最佳条件的确定,研究双水相体系对BSA萃取的影响.考察NaH2PO4、(NH4)2SO4、PEG4000的质量分数,BSA的质量浓度对双水相形成以及牛血清白蛋白分配行为的影响.结果表明,PEG4000-NaH2PO4双水相系统中w(PEG4000)=10.50%,w(NaH2PO4)=20%,回收率最大为89.4%;PEG4000-(NH4)2SO4双水相系统中,w(PEG4000)=12%,w((NH4)2SO4)=17.50%,回收率最大为91.5%.PEG4000-(NH4)2SO4双水相体系比PEG4000-NaH2PO4更易分离纯化得到大量目标蛋白质.     

双水相萃取红景天苷的研究

聚乙二醇(PEG)/盐的水溶液双相体系(ATPS)形成双相行为和双相分配行为的研究.研究了聚乙二醇(PEG)的分子量和质量分数,盐种类,盐的质量分数,离子强度,红景天初始浓度对红景天提取率的影响.并通过正交试验,确定最佳双水相PEG/(NH_4)_2SO_4体系的条件,产生一个简单的预处理方法为提取和测定红景天苷.当双水相体系是20%PEG1000,20%(NH_4)_2SO_4和1%KCl时,提取效果最好,提取率是95.32%.     

双波辅助提取结合双水相萃取分离纯化龙须菜多糖研究

对龙须菜多糖双波辅助提取工艺进行响应面法优化,最佳条件为:超声波50 W,提取时间31.7 min、微波温度87℃、料液比1∶60.7,在此条件下龙须菜多糖提取率为34.84%。筛选双水相体系获得一种可较好去除蛋白的乙醇/(NH_4)_2SO_4双水相体系.结果表明:双水相系线长度为50时,中间相龙须菜粗多糖回收率最高可达81.1%,证实双波辅助提取结合双水相萃取可成为一种龙须菜粗多糖提取的有效技术手段.     

双水相萃取与疏水层析分离基因工程人溶菌酶

采用双水相萃取与疏水层析分离纯化重组巴氏毕赤酵母表达的基因工程人溶菌酶.通过正交实验方法研究了聚合物浓度、盐浓度和pH对双水相体系萃取人溶菌酶过程的影响.结果表明:当双水相萃取的pH为4,硫酸钠、氯化钠、PEG4000的质量浓度为0.13、0.06和0.08时,人溶菌酶上相回收率达98.8%,纯化因子18.0,浓缩因子3.6.双水相萃取后选用高效疏水层析色谱纯化人溶菌酶,经苯基高取代基介质疏水层析后得到纯化因子为22.7,收率为88.4%的人溶菌酶纯化产品,电泳纯度检测为100%.     

荧光测定阿司匹林肠溶片中水杨酸实验的绿色化

以PEG800-PVP3000-(NH_4)2SO_4-H_2O为体系,双水相萃取取代原氯仿萃取,分离富集待测物水杨酸,实现了荧光检测阿司匹林肠溶片中水杨酸含量的荧光光谱分析实验的绿色化。实验测定了水杨酸在PEG-PVP水相中最佳激发波长315nm,最佳发射波长386nm,水杨酸在0～10μg/m L浓度范围符合比尔定律,阿司匹林肠溶片中水杨酸的含量约为20%。实验培养了学生利用分析仪器检测实际样品的综合能力。     

两水相系统萃取糖化酶的相平衡

含有聚乙二醇(PEG)和硫酸铵(NH_4)_2SO_4的两水相系统,能有效地用于从发酵液中提取糖化酶。研究表明:随着PEG平均分子量降低、成相组分浓度的适当增加以及加入较高浓度的无机盐,均能提高酶的分配系数。PEG浓度增大,(NH_4)_2SO_4浓度的减小有利于相比的增大。在同一条系线上,相比的确定应从提取收率和酶的浓缩两方面综合考虑。已发现,在含有26%PEG400-16%(NH_4)_2SO_4,pH4.4的系统中(相比1.2),糖化酶的分配系数为47,收率为96%。     

人溶菌酶的双水相萃取法分离

采用双水相体系直接从重组巴氏毕赤酵母发酵上清液中分离人溶菌酶,研究了体系中聚乙二醇(PEG)平均分子量,PEG、硫酸钠和氯化钠浓度,pH对人溶菌酶和总蛋白的分配系数、相体积比、萃取率和纯化因子的影响。结果表明:在PEG 4000、N a2SO4和N aC l质量分数分别为0.08、0.13、0.06,pH为5.6时,在室温下的双水相萃取率达96.63%,纯化因子为6.5。     

双水相萃取法富集分离地木耳中的藻蓝蛋白

采用聚乙二醇(PEG4000)/硫酸盐双水相体系,经一次萃取从地木耳细胞破碎液中富集分离藻蓝蛋白.分别考察萃取时间、硫酸盐种类及浓度、PEG4000浓度、溶液pH值和离子强度对双水相萃取分离地木耳中藻蓝蛋白的影响.结果表明:在萃取时间为30 min,Na2SO4的质量分数为15％,PEG4000的质量分数为12％,加入...     

W-305C螯合树脂提取铼的性能研究

本文研究了 W-305C 螫合树脂从含铼的 H_2SO_4-(NH_4)_2 SO_4溶液中提取铼的性能.试验结果表明,在 pH=9条件下,该树脂对铼的动态吸附率为99.48%.用8%NH_3·H_2O 与2%(NH_4)_2SO_4混合溶液淋洗铼,其洗脱率为98.92%.经吸附—洗脱操作,溶液铼浓度增大19倍,铼的总收率达98.41%.用红外光谱法探讨了树脂吸附铼的机理.     

椰果内生枯草芽孢杆菌YZ-21产β-甘露聚糖酶的纯化及酶学性质研究

[目的]分离纯化来源于内生枯草芽孢杆菌YZ-21的β-甘露聚糖酶,并研究其酶学性质.[方法]采用乙醇沉淀法、硫酸铵盐析法、聚乙二醇(PEG)/硫酸铵[(NH_4)_2SO_4]双水相体系进行分离与纯化,在此基础研究它的酶学性质.[结果]比较3种纯化方法,最优方法为双水相萃取法,在双水相体系为16%(NH_4)_2SO_4、18%PEG2000、2%NaCl条件下,纯化倍数最高可以达到3.06,酶回收率达到99.26%;酶学性质研究表明,β-甘露聚糖酶的最适反应pH为7.0,最适的反应温度是40℃,pH稳定性在3.0～7.0,热稳定范围在35～55℃之间;Ca~(2+),Ba~(2+),Mg~(2+),K~+,Co~(2+)对酶都有激活作用,而Ca~(2+)激活作用最强,Cu~(2+),Na~+,Zn~(2+),Mn~(2+),EDTA对酶有抑制作用.[结论]利用双水相萃取法较好纯化了β-甘露聚糖酶,酶学性质良好,可以广泛应用于饲料添加剂、纸浆漂白和食品加工等领域.     

Cu(Ⅱ)、Co(Ⅱ)、Ni(Ⅱ)、Zn(Ⅱ)、Cd(Ⅱ)非有机溶剂液—液萃取行为的研究

本文研究了PEG—EBT—(NH_4)_2SO_4体系对Cu(Ⅱ)、Co(Ⅱ)、Ni(Ⅱ)、Zn(Ⅱ)、Cd(Ⅱ)的非有机溶剂萃取行为。指出在pH7～10(NH_3H_2O～NH_3Cl)的水溶液中,有(NH_4)_2SO_4存在下,Cu(Ⅱ)、Co(Ⅱ)、Ni(Ⅱ)、Zn(Ⅱ)可被PEG相几乎完全萃取,而Cd(Ⅱ)基本上不被萃取。从而获得了(d(Ⅱ)与Cu(Ⅱ)、Co(Ⅱ)、Ni(Ⅱ)、Zn(Ⅱ)混合离子的定量分离。     

利用Tween 80去除b型流感嗜血杆菌荚膜多糖中杂蛋白方法的优化

通过单因素试验和Box-Behnken实验设计考察在蛋白去除过程中b型流感嗜血杆菌荚膜多糖浓度、Tween 80及(NH_4)_2SO_4含量对多糖回收率及蛋白残留含量的影响,建立回归模型.预测荚膜多糖质量浓度8.54mg/mL、Tween 80质量分数12.9%、(NH_4)_2SO_4质量分数28.12%为该方法的最佳参数组合,并通过实验进行验证其符合度分别达到93.9%和90.3%,符合度较高.研究通过实验设计(design of experiments,DOE)试验建立并优化了Hib荚膜多糖中杂蛋白的新方法,能够应用于实际的生产工艺中.     

用Mn(H_2PO_4)_2作催化剂快速测定废水COD

本文提出用Mn(H_2PO_4)_2作催化剂,在H_2SO_4-H_3PO_4混酸溶液中快速测定废水COD的新方法。正交实验确定的最佳条件是:Mn(H_2PO_4)_20.3g;H_2SO_4:H_3PO_4=6(体积比);回流时间5min。该方法与标准法相比,测定结果相近,测试时间缩减24倍,测试费用降低85%。     

乙醇/硫酸铵双水相体系分离纯化款冬花总黄酮

以低温烘干的款冬花为原料,利用乙醇/硫酸铵双水相体系分离纯化款冬花总黄酮。首先对无水乙醇、(NH_4)_2SO_4、黄酮粗提取液、NaCl质量分数和pH值进行单因素研究,然后利用Box-Benhnken Design实验对(NH_4)_2SO_4质量分数、无水乙醇质量分数、黄酮粗提取液质量分数、pH值进行了优化;结果表明:(NH_4)_2SO_4质量分数为15.5%、无水乙醇质量分数为32.2%、黄酮粗提取液质量分数为20.4%、pH=4.1时款冬花总黄酮萃取率可达99.21%,与预测的99.44%非常接近。     

钛的阳极氧化的研究

阳极氧化可提高钛的耐蚀性。为了探求最佳耐蚀氮化膜的生成条件,作者分别在(NH_4)_2SO_4、K_2SO_4、(NH_4)_2CO_3、KOH、H_3PO_4+H_3BO_3及K_2SO_4+KOH等溶液中,对钛进行了不同电压、不同时间下的阳极氧化,并将各种条件下钝化后的钛在同样条件下比较其耐蚀性,从而获得了最佳耐蚀膜的生成条件。在最佳耐蚀膜生成条件下钝化后的钛其耐蚀性可提高20倍。     

重组大肠杆菌Trx-hPTH蛋白在双水相体系内的初步纯化

用双水相体系萃取技术对重组大肠杆菌表达的人甲状旁腺激素融合蛋白Trx-hPTH进行了初步纯化,考察了盐的种类、PEG的平均分子量及浓度、MgSO4浓度、pH等因素对Trx-hPTH蛋白在PEG-MgSO4体系内分配行为的影响。结果表明:当双水相体系中w(MgSO4)=0.16,w(PEG 1000)=0.20,pH为8.0时,一步萃取后目标蛋白的分配系数为3.4,回收率为88.6%。     

聚乙二醇共沉复溶双水相法提纯氯过氧化物酶的条件研究

来源于海洋真菌Caldariomyces fumago的氯过氧化物酶是一种用途广泛的氧化酶,由于它在生物合成过程中浓度积累低、活力稳定性差,高纯度酶提纯过程回收率低,价格昂贵等原因限制了氯过氧化物酶的应用.利用亲水聚合物PEG6000在高离子强度下失水沉淀夹带酶蛋白特点,结合PEG/（NH4）2SO4双水相萃取得到高浓度酶蛋白,再经Sephadex G-75柱层析纯化可得到高纯度酶样品.结果显示：60%饱和度的（NH4）2SO4溶液可使PEG6000夹带沉淀出总酶活力95%的氯过氧化物酶,酶在PEG/（NH4）2SO4双水相系统中上下相分配率k可以达到0.228以下,回收率达到65.2%,纯度提高了7.4倍,柱层析后酶纯度只略有提高,总回收率稍有下降.研究结果为低浓度生物活性物质的高效率提取提供了新的途径.     

磁性阳离子吸附树脂在双水相体系中分离神秘果蛋白的研究

利用磁性阳离子吸附树脂与双水相体系联用对神秘果蛋白进行分离和纯化.探究了溶液p H值、离子强度和吸附速率对羧基改性粒子吸附神秘果蛋白能力的影响,并考察了双水相的组成、溶液p H和氯化钠质量分数对该体系萃取神秘果蛋白效果的影响.结果表明,当羧基改性粒子在溶液p H值为4.9,且不加氯化钠时,吸附神秘果蛋白效果最佳.双水相体系中,当PEG 4000质量分数为16%,(NH4)2SO4质量分数为8%时,该双水相体系对神秘果蛋白的萃取效果最佳.联合两种方法,经紫外分光光度法测定,从25 g冻干神秘果果肉中,提取出了30 mg的神秘果蛋白.     

三元体系Na_2SO_4-(NH_4)_2SO_4-H_2O中的Na_2SO_4·10H_2O-(NH_4)_2SO_4和Na_2SO_4·10H_2O-(NH_4)_2SO_4·Na_2SO_4·4H_2O多温截面图

本文对Na_2SO_4-(NH_4)_2SO_4-H_2O三元体系中的Na_2SO_4·10H_2O_-(NH_4)_2SO_4(Ⅰ)和Na_2SO_4·10H_2O-(NH_4)_2SO_4·Na_2SO_4·4H_2O(Ⅱ)两个多温截面进行了研究.在(Ⅰ)中有三个四相转熔点:P_1,38wt%(NH_4)_2SO_4,58.8℃;P_2,10.9 wt%(NH_4)_2SO_4,26℃;P_3,39.1 wt%(NH_4)_2SO_4,-16℃.在(Ⅱ)中有两个四相转熔点:P_1,100 wt%(NH_4)_2SO_4·Na_2SO_4·4H_2O,59℃;P_2,23.62 wt%(NH_4)_2SO_4·Na_2SO_4·4H_2O,26.1℃,转熔反应热为180 J/g。