芒柄花素保护前脑缺血再灌注损伤中的血脑屏障并抑制神经炎症

目的:观察黄芪在脑缺血再灌注损伤模型中异黄酮成分"芒柄花素"对前脑缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障(BBB)的作用及抗神经炎症的效果.方法:大脑中动脉阻塞建立大鼠脑缺血模型,伊文思蓝渗透实验计算BBB通透性,原位明胶酶谱检测基质金属蛋白酶(MMPs)活性以及荧光定量PCR检测炎症因子mRNA表达.结果:芒柄花素可显著改善脑缺血再灌大鼠的神经功能缺损和BBB通透性,降低MMP-9的表达、脑内MMPs活性并减少诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素(IL-1β)等炎症因子的mRNA在缺血脑片上的表达.结论:芒柄花素具有降低脑缺血再灌注损伤中的BBB通透性和抑制神经炎症的作用.     

灯盏花素对家兔左心缺血再灌注后肺组织肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的:探讨灯盏花素对左心缺血再灌注后肺组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的影响.方法:60只成年健康新西兰家兔随机分为模型组和治疗组.两组家兔均结扎及再通左冠状动脉前降支复制左心缺血-再灌注模型,治疗组在缺血后10min经静脉给予灯盏花素注射液10mg·kg-1.在缺血30min、再灌注20min、40min 3个时间点,取外周血和支气管肺泡灌洗液(BALF),ELISA法检测TNF-α表达水平;取肺组织标本,免疫组织化学法检测肺组织中TNF-α的表达,HE染色和电镜检测肺组织形态学改变.结果:模型组可见I型和II型肺泡上皮变性,呈急性炎症损伤改变,治疗组损伤明显减轻.外周血、BALF和肺组织细胞中TNF-α表达均低于模型组(P<0.05).结论:灯盏花素可通过减少TNF-α的表达,减轻因左心缺血再灌注而导致的急性肺损伤.     

灯盏花素对糖尿病大鼠视网膜血流动力学变化的影响

探讨糖尿病大鼠视网膜中央动脉（CRA）的血流动力学变化及灯盏花素的防治作用。用链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病模型后，在第12-13周采用彩色多谱勒对各组视网膜中央动脉（CRA）进行血流参数的测量，包括峰值血流速度（PSV）、舒张期最低流速（EDV）、平均血流速度（MY）、阻力指数（RI）和搏动指数（PI）。糖尿病组大鼠CRA的血流速度较对照组显著降低（P〈0．01），而阻力指数和搏动指数则显著增高（P〈0．05）。在灯盏花素治疗组，糖尿病大鼠视网膜血流动力学得到显著改善，与糖尿病组相比CRA的血流速度显著增加（P〈0．01），阻力指数和搏动指数显著降低（P〈0．05）。12周的糖尿病大鼠视网膜已开始出现血流灌注不良和血流减少，但灯盏花素能明显改善糖尿病大鼠的视网膜的血流动力学，增加血流量和灌流量。     

灯盏花素注射液的处方优化

对灯盏花素注射液处方进行优化,以获得稳定性和澄明度良好注射液.采用单因素考察方法,以注射液外观性状、含量和澄明度等为考察指标,对药液pH值、助溶剂和抗氧化剂进行了考察和优化.结果表明,以Na2HPO4为助溶剂、EDTA-2Na和NaHSO3为抗氧剂、药液pH值约6.8,制得的注射液外观颜色为浅黄色、含量高和澄明度好.研究说明,根据筛选和优化的处方工艺制得的注射液质量较好.     

薄层色谱法测定单株灯盏花中灯盏花乙素的含量

 建立薄层色谱扫描法测定灯盏花植株单株中灯盏花乙素的含量,用以进行高通量的含量筛选.以乙酸乙酯、甲酸、水体积比5:1:1展开,扫描波长为337nm.灯盏花乙素线性范围为0.204~1.632μg,相关系数为0.9995,平均回收率为96.7%,相对标准偏差为3.90%.本法准确、简便、快速、重复性好,适用于优质单株的高通量筛选.     

芍药苷对局灶性脑缺血模型及血脑屏障的影响

观察芍药苷对脑缺血后再灌流期间血脑屏障及脑缺血神经病理改变症状、脑血流量的影响,采用大鼠局灶性脑缺血再灌流损伤实验模型,以神经行为学、脑组织含水量、病理组织学检查、血脑屏障通透性、脑血流量为指标,与模型对照组比较,局灶性脑缺血1h再复灌3d后,应用芍药苷的各组动物神经行为学、脑组织含水量、组织病理学改变和血脑屏障通透性均得到改善,大脑局部血流量显著增加,芍药苷对脑缺血后脑水肿、血脑屏障、大脑局部血流量具有保护作用。     

虫草素改善脑缺血小鼠学习记忆及保护海马神经元的作用研究

采用双侧颈动脉夹闭建立脑缺血模型,分别观察造模后和造模前腹腔注射100 mg?kg-1虫草素对小鼠Y迷宫行为训练的影响以及检测海马各区神经元数量的变化.结果表明,造模前给予虫草素能明显提高小鼠的正确反应率（p0.05）,减少达标所需训练次数（p0.05）,并显著增加海马CA1区和CA3区锥体神经元数量（p0.01）.造模后给予虫草素对小鼠的正确反应率没有显著影响（p0.05）,但显著减少达标所需训练次数（p0.05）;同时,海马CA3区神经元数量显著增加（p0.01）,而CA1区没有显著变化（p0.05）.由此可见,虫草素能改善脑缺血小鼠的学习能力,预防作用似乎比治疗作用更为显著,其相关机制可能与虫草素促进海马神经元的修复有关.     

红花和灯盏花素注射液体外抗氧化和抗补体活性比较研究

通过比较分析活血化瘀类中药注射液红花和灯盏花素的抗氧化和抗补体活性,深入探讨二者的药理活性。利用试剂盒检测红花和灯盏花素注射液的总抗氧化能力(T-AOC)、羟自由基清除能力以及超氧阴离子自由基清除能力,并通过采用细胞溶血法,检测二者对补体经典途径和旁路途径的抑制效应。结果显示:二者皆具有抗氧化活性,其中灯盏花素注射液的总抗氧化能力(T-AOC=1.74±0.06 U/mg)、羟自由基清除能力(EC_(50)=0.96 mg/mL)以及超氧阴离子清除能力(EC_(50)=7.22 mg/mL)均强于红花注射液(T-AOC=0.09±0.01 U/mg,羟自由基清除能力EC_(50)=27.13 mg/mL,超氧阴离子清除能力EC_(50)=19.22 mg/mL),其中灯盏花素注射液的总抗氧化能力强于BHT(T-AOC=0.54±0.03 U/mg);在抗补体活性方面,灯盏花素注射液(CH_(50)=0.27 mg/mL,AP_(50)=0.44 mg/mL)均强于红花注射液(CH_(50)=10.07 mg/mL,AP_(50)=4.53 mg/mL),但是弱于阳性对照肝素钠(CH_(50)=0.11 mg/mL,AP_(50)=0.08 mg/mL)。研究表明,红花和灯盏花素注射液都具有较强的体外抗氧化和抗补体活性,而灯盏花素注射液均强于红花注射液。     

灯盏花素葡萄糖注射液的药效学研究

目的验证灯盏花素葡萄糖注射液的临床前药效学作用;方法选择不同的药理学指标对灯盏花素葡萄糖注射液的药效学作用进行评价;结果灯盏花素葡萄糖注射液对实验性大鼠急性脑缺血具有显著的保护作用,可使大鼠血液中纤维蛋白溶解酶活性明显增加,对大鼠血液血栓形成具有明显的抑制作用,可使小鼠血液凝血时间显著性延长,对小鼠肠系膜微循环具有明显的改善作用,具有明显抑制血小板聚集的功能,亦可显著性降低家兔脑血管阻力,改善脑循环;结论试验结果证明了灯盏花素葡萄糖注射液具有良好的活血化瘀作用,对改善脑血循环、增加脑血流量、降低脑血管阻力、急性脑缺血改善、增加血液纤溶酶活性、防治血液血栓形成等功效显著;讨论研究结果与文献相关报道基本一致,为其临床广泛应用提供了有力的科学依据.     

灯盏花素提取纯化工艺及其片剂的制备

为确定灯盏细辛中灯盏花素的提取纯化工艺,以70%乙醇溶液超声波提取灯盏细辛药材,醇提浸膏进行HP-20大孔吸附树脂洗脱和酸沉工艺纯化,在(335±1)nm波长处采用紫外分光光度法测定了野黄芩苷的含量.以乳糖、蔗糖和微晶纤维素为填充剂,以交联聚维酮为崩解剂,制备了灯盏花素片剂(野黄芩苷标示量20 mg)并开展了质量检查.结果表明:大孔吸附树脂20%,50%,80%乙醇洗脱部位经酸沉后测定的含量分别为98%,79.8%,42.1%,而50%乙醇洗脱部位的得率最高达到12.14%.优选灯盏花素片剂处方为主药12%,MCC 40%,PVPP 30%,蔗糖13%,乳糖5%,硬脂酸镁0.5%,50%乙醇适量.该提取纯化方法能获得较高野黄芩苷含量的灯盏花素,制备的片剂质量检查合格.制备工艺操作性强,重现性好,能适应于工业大生产的需求.     

稀土元素钐对小鼠学习记忆的影响及其脑内机制

采用行为观察和生化检测相结合的方法,研究了小鼠长期饮用不同剂量的硝酸钐溶液对其学习记忆力、脑内单胺类神经递质含量及一氧化氮合成酶(NOS)活力的影响.结果表明:随着硝酸钐浓度的增高,小鼠的学习记忆能力下降,脑内多巴胺(DA)和5-羟基色胺(5-HT)含量减少,NOS活性降低.提示饮用50 mg/L的硝酸钐溶液对小鼠的学习记忆能力有明显的损伤作用,而且这种作用可能与脑内单胺类神经递质含量的降低和一氧化氮合成酶活力的降低有关.     

^99mTc complex conjugated to insulin： CNS radiopharmaceuticals design based on principles of blood-brain barrier transport vector

Hydrophilic ^99mTc-EC and nonlipophilic ^99mTc- MAMA＇-BA complexes, owing to the existing of intact blood-brain barrier （BBB） in vivo, cannot cross from blood to brain. Previous studies showed that insulin is selectively transported by receptor-mediated transcytosis through the brain capillary endothelial wall that makes up the BBB. In this paper, based on the characteristic of the insulin receptor enriched in brain capillary, the complexes of hydrophilic ^99mTc-EC and nonlipophilic ^99mTc-MAMA＇-BA are conjugated to insulin respectively. After purification, the radiochemical purity of ^99mTc-EC-insulin and ^99mTc-MAMA＇-BA-insulin was 〉 90% and the stability in vitro was good. Expectation for the special formulation can be internalized and endocytosed into the capillary membrane by the vector-mediated brain delivery system, and transported ^99mTc-labeled conjugate through the BBB in vivo, thus enhancing brain uptake in mice. The biodistribution results of ^99mTc-EC-insulin and ^99mTc-MAMA＇-BA-insulin in mice in- dicated that the brain uptake was higher than ^99mTc-EC and ^99mTc-MAMA＇-BA to some extent. The ratios of brain uptake of ^99mTc-EC-insulin to ^99mTc-EC, ^99mTc-MAMA＇-BA-insulin to ^99mTc-MAMA＇-BA were 4-6 at 2 and 3 h post-injection respectively. In conclusion, the given results have illustrated a new way of brain uptake enhancing for nonlipophilic like complexes that have BBB delivery problems. It has a potential value for the ongoing development of ^99mTc-labeled radiopharmaceuticals for CNS receptors imaging.     

ASICs阻断剂对大鼠脑I/R损伤炎性反应的影响

探讨了酸敏感离子通道阻断剂阿米洛利对大鼠脑I/R损伤性炎性反应的影响。采用Zea Longa线栓法建立Sprague-Dawley(SD)大鼠局灶性脑缺血再灌注(I/R)模型,于脑缺血2h再灌注24h时间点测定血清肿瘤坏死因子-α和血浆内皮素的含量。结果显示各组间比较差异有统计学意义:血清肿瘤坏死因子-α:F=9.937,P=0.000;血浆内皮素:F=49.487,P=0.000;阿米洛剂Ⅰ组和Ⅱ组的血清肿瘤坏死因子-α和血浆内皮素较相应I/R模型组低(P<0.05)。这表明,阿米洛利可能通过阻断酸敏感离子通道减轻Ca2超载,降低肿瘤坏死因子-α和血浆内皮素的含量而抑制炎性反应,发挥神经保护作用。     

壳寡糖及其衍生物对CCl4诱导的小鼠肝损伤的保护作用

研究壳寡糖（COS）、氨基葡萄糖（GlcNH2）和N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)对CCl4诱导的雄性昆明种小鼠肝毒性的保护作用,并探讨其可能机制. 小鼠腹腔注射CCl4（20mg/kg体重）24h后,血清天门冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)活性明显提高,引起肝脏脂质过氧化反应,巯基含量降低,总抗氧化能力（T-AOC）减弱,诱发基因毒性. 提前连续12天分别灌胃给予COS,GlcNH2 和GlcNAc（1.5g/kg体重）能够显著诱导金属硫蛋白（MT）的表达,体内的抗氧化防御系统随之增强以抵抗CCl4诱导的氧化损伤. 血清AST和ALT活性明显降低,肝脏丙二醛（MDA）生成被抑制,巯基含量,T-AOC明显恢复. 但是,从DNA电泳结果反应出的基因毒性并未减轻. 实验结果证明,提前给予COS,GlcNH2和GlcNAc对CCl4诱导的小鼠肝损伤能够起到有效的保护作用,其中,GlcNH2的作用效果最显著.     

PTS预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护效果及机制研究

目的探讨人参三醇皂苷(PTS)预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用机制。方法选用Wistar大鼠作为研究对象,随机分组:假手术组(生理盐水2 m L/kg体质量)、模型组(生理盐水2 m L/kg体质量)、PTS低剂量组(25 mg/kg)、PTS中剂量组(45 mg/kg)、PTS高剂量组(90 mg/kg)、阳性药组(生脉注射液450 mg/kg)。连续7 d腹腔注射给药,于末次给药1 h后进行MIRI造模手术,再灌注24 h后取材料测定各项指标。监测大鼠心电图ST段变化;检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;采用PCR检测心肌组织Bcl-2和Bax mRNA表达水平;光镜和电镜观察心肌组织病理和心肌细胞超微结构的改变。结果与模型组比较,PTS中剂量组和高剂量组能显著降低MIRI模型大鼠ST段和血清CK-MB、IL-6、TNF-α水平,改善心肌结构的损伤程度,增加抗凋亡蛋白Bcl-2表达,抑制前凋亡蛋白Bax的表达。结论 PTS对MIRI大鼠心肌具有保护作用,其作用机制可能是通过抑制炎症因子表达和调节凋亡关键酶来实现。     

间二硝基苯对小鼠睾丸生殖细胞DNA损伤作用的SCGE研究

采用小鼠睾丸支持细胞/ 生殖细胞共培养法以及单细胞凝胶电泳技术,研究了间二硝基苯对小鼠睾丸生殖细胞DNA的损伤作用.结果表明:间二硝基苯能够导致生殖细胞DNA链断裂,而且其受损率与剂量具有明显的剂量效应关系,与对照组相比均具有显著性差异(P＜0.01,P＜0.05);间二硝基苯可以引起离体小鼠睾丸生殖细胞DNA损伤,具有生殖毒性.     

几种螯合剂对镉致小鼠肝脏毒性解毒作用比较

为开发高效低毒的新型镉解毒剂,研究了镉染毒组小鼠和N-对羟甲苯甲基-D-葡糖二硫代氨基甲酸钠(HBGD)、N-苯甲基D 葡糖二硫代氨基甲酸钠(BGD)、二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)、二巯基丙醇(BAL)、乙二胺四乙酸(EDTA)等5种螯合剂治疗组小鼠血清天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)及乳酸脱氢酶(LDH)活性和小鼠肝脏的脂质过氧化物(LPO)值的变化.结果显示,染Cd(2. 5mg/kg,腹腔注射)后小鼠血清LDH、AST及ALT活性和肝脏LPO值显著高于对照组.分别染镉30min和24h后注射各螯合剂(400μmol/kg,腹腔注射),治疗24h后HBGD和BGD对镉引起的肝脏LPO值及血清LDH、AST、ALT活性的升高有显著的抑制作用(P<0. 05).表明HBGD和BGD对镉致小鼠肝脏毒性有较好的解毒作用,且自身毒性小,有望成为理想的镉解毒剂.     

矢车菊素-3-葡萄糖苷对重金属铅致大鼠肝、肾损伤的保护作用研究

探讨矢车菊素-3-葡萄糖苷对铅致大鼠肝肾损伤的保护作用。20只雄性SD大鼠随机分成4组,不同剂量花色苷灌服同时腹腔注射铅溶液,连续5 d,末次给药12 h后称重,收集样本。检测血清肝肾功能指标:谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、尿素和肌酐,部分肝肾行常规石蜡包埋、切片,病理学检测。结果表明:Pb暴露造成大鼠肝、肾损伤明显,脏器系数表现明显(P0.05)。保护各组血清ALT、AST、尿素、肌酐呈下降趋势,肝脏水变性、脂肪样变,肝细胞空泡化及肾小管管腔变窄、蛋白管型等病变均有不同程度的好转。研究结果显示矢车菊素-3-葡萄糖苷对Pb造成的肝肾损伤具有明显的保护作用,具体的机制还有待进一步的研究。     

二十二碳六烯酸乙酯对沙土鼠缺血再灌注脑损伤及水肿作用的研究

研究二十二碳六烯酸乙酯(E-DHA)对沙土鼠缺血再灌注脑损伤及其脑水肿的影响.选用雄性断奶沙土鼠灌胃给予二十二碳六烯酸乙酯(150 mg/(kg·d))或等体积溶媒10周,阻断沙土鼠双侧颈总动脉血流10 min,造成缺血再灌注模型;测定再灌注后脑组织中丙二醛(MDA)水平,还原型谷胱甘肽(GSH)含量,超歧化氧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和钾、钠-ATP酶(Na ,K -ATPase)活性,脑水含量,钠、钾离子浓度及海马CA1区神经细胞存活百分数.结果表明:E-DHA预处理显著降低缺血再灌注沙土鼠脑组织MDA水平,阻止GSH含量、GSH-PX和Na ,K -ATPase活性下降,而对SOD的活性未表现出明显作用;E-DHA亦调节缺血再灌注沙土鼠脑组织钠、钾离子浓度,减轻缺血再灌注所致的脑水肿和神经细胞死亡.提示E-DHA对脑缺血再灌注脑损伤有显著保护作用,机制可能其与抗氧化作用有关.