橄榄苦苷对染砷小鼠大脑神经免疫相关基因表达的影响

为了研究橄榄苦苷(OP,oleuropein)对染三氧化二砷(As_2O_3)小鼠大脑神经免疫相关基因表达的影响.将昆明小鼠随机分成对照组、As_2O_3组和As_2O_3+OP组,按不同方式灌胃,连续5周后,利用基因芯片技术来评价OP对染砷小鼠大脑神经免疫相关基因表达的影响.与对照组比较,As_2O_3组小鼠大脑白细胞介素(IL, interleukin)家族基因IL-3、IL-10、IL-11、IL-1a、IL-15、IL-20、IL-23a、IL-31、IL-1f6、IL-13、IL-25和IL-24表达下调,IL-17d表达上调;白细胞介素家族受体基因IL-13受体α1(IL-13ral)和IL-2受体γ链(IL-2rg)表达上调,IL-17受体C (IL-17rc)表达下调;下丘脑-垂体-肾上腺轴受体相关基因精氨酸加压素(Avp)、精氨酸加压素受体1B(Avpr1b)、精氨酸加压素受体1A(Avpr1a)、精氨酸加压素受体2(Avpr2)、促肾上腺皮质激素释放激素受体1(Crhr1)、促肾上腺皮质激素释放激素受体2(Crhr2)表达下调,促肾上腺皮质激素释放激素(Crh)和阿黑皮素原α(Pomc1)表达上调.经OP干预后,As_2O_3致小鼠的神经免疫毒性明显减轻,大脑组织白细胞介素家族部分基因和下丘脑-垂体-肾上腺轴受体相关基因的表达水平与对照组表达无差异.OP可降低As_2O_3对小鼠神经免疫的毒性,其机制与影响大脑组织白细胞介素家族部分基因和下丘脑-垂体-肾上腺轴受体相关基因的表达有关.     

ING4及IL-24双基因共表达腺病毒载体对MG-63人骨肉瘤细胞体外抑癌增效作用研究

目的用人肿瘤生长抑制因子(mING4)及人白介素24(IL-24)基因构建腺病毒双基因共表达载体(Ad-ING4-IL-24),并设Ad-ING4和Ad-IL-24单基因对照,研究双基因共表达载体对MG-63人骨肉瘤细胞体外抑癌增效作用.方法首先将已构建成功的Ad-ING4-IL-24,Ad-ING4及Ad-IL-24腺病毒感染QBI-293A细胞,经多轮扩增后获得高滴度的病毒子,测病毒效价后分别以100 MOI剂量感染MG-63细胞,用荧光显微镜、RT-PCR法检测ING-4及IL-24在MG-63细胞中的转录和表达;MTT法检测ING-4及IL-24基因表达对MG-63细胞的生长抑制效应;半定量RT-PCR法检测ING4及IL-24基因表达对MG-63细胞中的Bcl-2,Bax,Caspase3,p21,CD34等相关基因表达的影响.结果获得了高滴度的重组腺病毒Ad-ING4-IL-24,Ad-ING4,Ad-IL-24和Ad-GFP;治疗后MG-63细胞中ING-4及IL-24双基因表达对MG-63细胞增殖有明显抑制作用,ING-4及IL-24基因表达可通过上调细胞中Bax,Caspase3,p21和下调Bcl-2,CD34基因表达诱导细胞凋亡.在病毒子剂量为100 MOI时,Ad-ING4-IL-24对MG-63人骨肉瘤细胞抑制作用比对Ad-ING4和Ad-IL-24抑制效果更为显著.结论腺病毒介导的ING4或/和IL-24基因可明显抑制MG-63人骨肉瘤细胞的生长,且Ad-ING4-IL-24双基因比Ad-ING4和Ad-IL-24单基因的抑制效果更为显著,该现象可能是通过改变Bcl-2,Bax,Caspase3,p21,CD34基因表达水平来发挥抗肿瘤作用的.     

系统性红斑狼疮TH2型细胞因子受体基因的表达

目的 分析SLE患者外周血单一核细胞TH2型细胞因子mRNA的表达状况.方法 分离SLE外周血单一核细胞1×107/mL的浓度,进行总RNA提取,然后用1.5%的琼脂糖电泳,应用凝胶成像系统对电泳条带进行扫描.结果 SLE患者IL-4mRNA,IL-6mRNA和IL-10mRNA水平相比对照组显著升高.结论 TH2型细胞因子受体基因的表达在SLE发病机制中有明显的异常,其与相应蛋白表达的关系还有待进一步探讨.     

腺病毒介导人MDA-7/IL-24基因对人鼻咽癌细胞CNE的凋亡作用

mda-7(melanoma differentiaton-associated gene 7,黑色素瘤分化相关基因7),其表达产物又称 IL-24(Interleukin-24,白介素24),现有实验证明其对多种肿瘤细胞有明显的生长抑制和凋亡诱导作用,具有广泛的癌症治疗前景和预期.鼻咽癌作为中国南方多发的癌症,目前少有mda-7对其凋亡作用的研究,本实验利用腺病毒载体(复制缺陷型)构建搭载mda-7的重组病毒Ad-mda7及空病毒Ad-GFP,用HEK 293T细胞对病毒进行扩增,得到的重组病毒用于人鼻咽癌细胞CNE的凋亡研究.Hoechst 33258凋亡染色以及流式细胞仪PI染色检测结果表明:重组病毒Ad-mda7相比空病毒Ad-GFP以及PBS处理组,对CNE细胞有较明显的凋亡诱导作用.     

IL-21/4-IgG4融合基因的真核表达

利用新型细胞因子IL-21的变异体IL-21/4与IgG4构成融合基因IL-21/4-IgG4. 将构建好的融合基因载体poptivec- IL-21/4-IgG4转染到中华仓鼠卵巢细胞中,成功并稳定表达了IL-21/4-IgG4融合蛋白.     

鱼类白细胞介素-1β研究进展

白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)是一种有效的促炎细胞因子,参与细胞增殖、分化和凋亡等多种生命活动.在鱼类中,IL-1β基因已被广泛克隆和鉴定.鱼类与哺乳动物的IL-1β之间存在许多相似特征,在免疫调节过程中发挥着重要的功能.对IL-1β的进化研究能够揭示I L-1家族的起源和进化历程,有助于...     

共刺激分子B7和CD40对日本血吸虫感染小鼠Th1/Th2免疫偏移的调控作用

为观察干预B7/CD28和CD40/CD40L共刺激信号对Th1/Th2细胞因子表达水平和Th1/Th 2免疫偏移的调控作用, 分别取小鼠感染日本血吸虫后6、8、10和12周的脾淋巴细胞经抗CD8 0(B7-1)mAb、抗CD86(B7-2)mAb、抗CD40mAb和抗CD40LmAb处理后培养72h,用ELISA 双抗体夹心法测定培养上清中IFN-γ和IL-4的表达水平的动态变化并分析干预2种不同的共刺激信号对 Th1/Th2免疫偏移的影响.结果显示抗CD80mAb和抗CD86mAb均能显著抑制IL-4的表达水平, 尤其是抗CD86mAb对IL-4抑制作用尤为明显.抗CD40mAb和抗CD40LmAb也能影响Th2细胞因子的表达.其中以阻断CD40分子的作用更为显著.结果提示B7/CD28和CD40/CD40L共刺激信号可以调节Th1/Th2细胞因子的表达水平和调控Th1/Th2免疫偏移.干预B7/CD28和CD40/CD40L 介导的共刺激信号调控Th1/Th2免疫偏移有可能是一种控制血吸虫卵肉芽肿病变新型的免疫治疗途径.     

IL-1 8的研究进展

IL-18是新近发现的一种细胞因子,它具有诱导T细胞和NK细胞产生IFN-γ,增强T细胞和NK细胞的细胞毒作用等免疫调节功能,在抗肿瘤、抗病原微生物感染及抗超敏反应等方面有着潜在的应用前景.本文就IL-18的来源、分子结构、生物学作用以及应用展望等方面进行综述.     

人白细胞介素24蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及其自激活检测

构建人白细胞介素24蛋白酵母双杂交诱饵栽体,并检测其自激活作用.采用PCR技术特异性扩增人白细胞介素24基因IL-24,将其克隆入酵母双杂交诱饵质粒pGBKT7中,通过PCR扩增、限制性酶切鉴定及序列测定,获得质粒pGBKT7-IL-24.采用PEG/LiAc法将其转入酵母AH109中,经表型筛选检测其自激活作用,同时...     

白细胞介素-2(IL-2)在兽医中的应用进展(综述)

白细胞介素-2(IL-2)是动物机体最重要的细胞因子之一,在抗感染、抗肿瘤、抗毒索和免疫调节中发挥重要作用,而成为当今免疫学、临床医学等领域的研究热点。主要就IL-2在兽医中作为免疫佐剂和免疫治疗剂的应用进展进行综述。     

Apoptotic signal pathways and regulatory mechanisms of cancer cells induced by IL-24

The melanoma differentiation-associated gene-7(mda-7),IL-24,has the specific functions that induce cancer cell apoptosis without doing harm to normal cells. We systematically review the apoptotic signal pathways and their regulatory mechanisms induced by Ad.IL-24 and IL-24 in diverse cancer cells. IL-24 can participate in varied signal transduction pathways,including JAK,p38 MAPK,Wnt/β-catenin,JNK,ER stress and mitochondria-associated signal pathways. And we review five proteins interacting with IL-24,including Bip/GRP78,S1 R,PKR,Beclin1 and soluble clusterin,which are relative to the tumor-specific effect of IL-24. It is speculated that ER stress,G-protein pathways and MAPK signal pathways may be the primary upstream effectors which activate the sequential downstream mediators resulting in apoptosis induced by IL-24 in tumor cells. Experimental results also show that IL-24 sensitizes cancer cells and indirectly promotes apoptosis rather than functions as a direct apoptosis inducer itself.     

Bispecific antibody and its clinical applications in cancer

Bispecific antibody (BsAb) usually consists of two different antigen-binding arms, by which it is capable of simultaneously binding to target cells and effector cells, and can directly mediate the killing of target cells by retargeting and activating effector cells. The development of BsAb research goes through three main stages: chemical cross- linking of murine-derived monoclonal antibody, hybrid hybridomas and engineered BsAb. Among them, engineered BsAb has more formats than the other two, such as diabody, ScdHLX, ScZip, ScCH3, ScFab and BsIgG, etc. Compared with former murine-derived BsAbs, engineered BsAb has lower immunogenicity and stronger penetrating capacity, and currently, some of them appear suitable for clinical application in yields and qualities. Up to now, several phase Ⅰand phase Ⅱ clinical studies of BsAb, for instance, some (Fab’)₂ and Diabodies, have been performed. Among those BsAbs, anti-CD3/anti-tumor BsAbs is most common, they not only can activate T cell and induce CD3AK cytotoxic activity in in vitro experiment, and inhibit the growth of tumor on tumor-bearing mouse by retargeting T cells to lyse tumor cells, but also offer great promise in the therapy of some malignancies in clinic, especially of some advanced cancers as well as elimination of minimal residual tumors, indicated by increasing the tumor/blood ratio of antibody in patients and improving the natural killer cell (NK) anti-tumor activity in tumor sites, and also presenting of an increase level in TNF-α,INF-γ, IL-6, IL-8, IL-10 and soluble CD25, etc. The responses are also shown via improving the quality of life and prolonging the survival of partial patients. The “Knobs into Holes” technology is a new strategy emerging during research on engineered BsAb, it is likely to be useful for heterodimerization and can improve the quantity, purity and stability of BsAb, it is also anticipated to increase the clinical potential of BsAb in the future.     

植物多糖的免疫调节及抗肿瘤活性研究

目前,对恶性肿瘤的治疗,除手术、放疗和化疗三大治疗手段外,以免疫治疗为代表的肿瘤生物治疗已成为重要的肿瘤辅助治疗方法.正常人的免疫系统能识别和杀死恶性肿瘤细胞,免疫防护能力差或对不正常细胞识别能力差,均能导致癌症的发生率增高.因此,免疫刺激剂和免疫调节剂被认为是潜在的抗癌剂.多糖类就是一种重要的生物反应调节剂.植物多糖可通过对荷瘤机体的免疫调节作用达到抗肿瘤的效果已得到世界的公认.针对多种植物类多糖的免疫调节作用及抗肿瘤活性作一综述.     

松果有效成分研究——Ⅵ.红松与油松松塔及松子壳的抗癌活性

目的：研究松塔和松子壳的抗癌活性。方法：采用给小鼠接种肿瘤细胞法测定松塔和松子壳的抗癌活性。结果：从红松松塔的碱性水提取多糖（60mg/kg）CK—C,对S180抑瘤率为48.9%,而CK—DEF对U14的抑瘤率为36.0%和40.4%;对Hep A,CK—DEF作用优于环磷酰胺。结论：松塔和松子壳有效成分具有较好的抗癌作用。     

CPLT抗肿瘤作用研究

研究了CPLT在体内对肿瘤生长的抑制作用．采用体内抑瘤试验灌胃给药，测定了CPLT对小鼠LA795、S180、Lewis肺癌、U14及G422五种癌株的抑瘤作用．CPLT在剂量为100～400mg／kg时，对G422抑瘤率为41．7％～65．8％；138～267mg／kg时，对S180抑瘤率为34．4％～41．2％、对Ul4抑瘤率为24．3％～31．8％、对LA795抑瘤率为19．6％～42．3％；剂量为324mg／kg时对Lewis肺瘤抑瘤率为66．9％．CPLT有较广的抗瘤谱．     

Ⅳ型胶原酶及其抑制剂在抗肿瘤研究中的进展

作为基质金属蛋白酶家族成员的Ⅳ型胶原酶,除参与多种正常的生理功能外,还在肿瘤的发生发展过程中发挥着重要作用,与肿瘤的血管生成,肿瘤的侵袭和转移密切关联.研究发现有一些Ⅳ型胶原酶抑制剂能够通过抑制其酶活性,从而减缓肿瘤发展,这些抑制剂包括天然物质、人工合成物质及抗体类物质.目前,人们正利用抗体抑制剂进行抗肿瘤作用的研究,研发新型抗癌药物.     

Thermal ablation versus conventional regional hyperthermia has greater anti-tumor activity against melanoma in mice by upregulating CD4~+ cells and enhancing IL-2 secretion

To determine whether conventional hyperthermia (42-45℃) or ablation therapy (＞50℃) achieves better synergistic effects on direct cytotoxicity and anti-tumor immunity,we compared the therapeutic effects of two hyperthermia temperatures,43 and 55℃,in terms of cytotoxicity and upregulation of immune functions in a mouse malignant melanoma model.Melanoma-bearing mice were treated by directly applying regional hyperthermia to the tumor nodule with a heating light at a temperature of 43℃ for 30 min or 55℃ for 10 min.The tumor growth curve and mice survival rate were observed.To investigate the hyperthermia-induced immunological response,peripheral blood CD4~+ and CD8~+ T cells and the serum IL-2 level were determined.Our results indicated that application of regional hyperthermia at the ablation temperature (such as 55℃) achieved better synergistic anti-tumor effects than did conventional hyperthermia (43℃).Significant increases in the number of peripheral blood CD4~+ T cells and the serum IL-2 level likely contributed to the underlying mechanism.     

彗星实验在抗肿瘤药物研究中的应用

回顾了近年来彗星实验在抗肿瘤药物研究中的应用，将各种以肿瘤细胞为基本实验材料的不同实验，从材料、致损伤荆以及具体操作方法等方面进行总结和比较，为今后在同类的肿瘤细胞实验中应用彗星实验技术时提供参考。     

青龙衣的化学成分和抗肿瘤活性研究

研究青龙衣的化学成分及抗肿瘤活性.利用硅胶柱色谱和开放ODS柱色谱等分离技术从青龙衣的95%乙醇提取物中分离得到了11个化合物,通过理化性质、波谱数据分析等方法,鉴定了全部化合物结构.采用MTT法,选取人胃癌细胞株(SGC7901),人肝癌细胞株(Hep G2),人肺腺癌细胞株(A549),乳腺癌细胞株(MCF7),结肠癌细胞株(Lo Vo)对化合物体外抗肿瘤作用进行筛选.从青龙衣中分离鉴定了11个化合物,分别为正二十九烷醇(nonacosanol)(1),[1-(4'-甲氧基苯基)-7-(3'-甲氧基,2'-羟基苯基)-3',4'-环氧-3-庚酮[3',4'-epoxy-1-(4'-methoxylphenyl)-7-(3'-methoxyl-2'-hydroxyphenyl)-heptane-3-one](2),正三十一烷醇(hentriacontanal)(3),1-(4'-羟基苯基)-7-(3'-甲氧基-4'-羟基苯基)-庚烷-3-醇[1-(4'-hydorxyphenyl)-7-(3'-methoxy-4'-hydorxyphenyl)-hepta-3-ol](4),4,6-二羟基-3,4-二氢-1-萘酮(4,6-dihydroxy-3,4-dihydro-naphthalenone)(5),胡桃醌(5-hydroxy-1,4-naphthoquinone)(6),β-谷甾醇(beta-sitosterol)(7),齐墩果酸(oleanolic acid)(8),香草酸(vanillic acid)(9),槲皮素(quercetin)(10),香草醛(vanillin)(11).化合物5、10对肿瘤细胞均有很强的生长抑制作用,IC50≤35μmol/L.化合物8对肿瘤细胞有较强的生长抑制作用,IC50≤58μmol/L.化合物2、3、6和7对个别肿瘤细胞有作用,其他化合物对肿瘤细胞没有生长抑制作用.11个化合物均为已知化合物,其中化合物1,3,10,11为属内首分,化合物5、8和10均具有较显著的抗肿瘤活性.