| 停循环相关脑损伤的大鼠海马线粒体COX蛋白获取及验证 |
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| 作者姓名： | 高永军 曹毅 袁勇 张喜兵 赵宁辉 徐蔚 |
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| 作者单位： | 1.（昆明医科大学 第二附属医院 神经外科,云南 昆明 650101） |
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| 基金项目： | 教育部博士学科点基金(20095317110001);云南省自然科学基金(2009CD177;2011FB200);云南省卫生厅科技项目(2010NS070) |
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| 摘 要： | 为了明确不同脑温停循环对大鼠海马线粒体差异蛋白质的影响，探讨深低温停循环的脑保护机制，研究以16G导管和22G留置针分别穿刺颈内静脉和尾动脉，建立大鼠闭胸式体外循环模型.并在该模型下完成常温（35.5～37.5 ℃）和深低温（27 ℃）状态下停循环10 min，提取海马组织并纯化线粒体，电镜超微结构显示线粒体纯度和完整性均良好，可以进行下一步研究.按照蛋白质组学要求取线粒体蛋白质匀浆，SDS-PAGE预实验显示标本符合蛋白质组学的需要.最后进行i-TRAQ标记的蛋白质组学分析，获取7个差异蛋白质（依据表达量1.5倍或0.67倍，p0.05）.之后对其中的差异蛋白质细胞色素C氧化酶进行深入研究，免疫荧光染色精确定性表明线粒体和细胞质的COX蛋白在NTCA和DHCA组间的分布是有差异的，Western-blot半定量分析提示3组之间COX蛋白表达量无明显变化（p0.05），由此判断急性期深低温停循环的脑保护作用与其减少线粒体蛋白质COX向胞质的释放有关。
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| 关 键 词： | 线粒体 超微结构 免疫荧光 细胞色素C氧化酶 深低温停循环 |
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